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基于BSA-seq的榧树雌雄性别分子标记筛选与应用
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作者 邬玉芬 田海丹 +1 位作者 汪佞元 焦云 《经济林研究》 北大核心 2025年第2期12-19,共8页
【目的】筛选快速鉴定榧树性别的分子标记,加快榧树雌雄株定向培育及育种进程。【方法】采用BSA-Seq技术,分别对榧树雌株和雄株混池进行测序分析。【结果】获得了1751232个Contig,其中长度大于1 MB的Contig合计有5796个。根据不同性别... 【目的】筛选快速鉴定榧树性别的分子标记,加快榧树雌雄株定向培育及育种进程。【方法】采用BSA-Seq技术,分别对榧树雌株和雄株混池进行测序分析。【结果】获得了1751232个Contig,其中长度大于1 MB的Contig合计有5796个。根据不同性别测序结果中Contig的对比分析,锁定部分性别关联位点并设计16对引物。引物分别来源于9个不同的Contig,其特异性位点突变序列长度为4~10 bp,PCR扩增产物长度预期为61~180 bp,最终筛选出与榧树雄株(含雌雄同株)性别紧密连锁的引物XF1754,其扩增产物长度仅为97 bp。进一步优化PCR循环条件,将循环数量设为17~22。琼脂糖凝胶电泳分析结果表明,仅需17个循环即可获得清晰可见的扩增条带。在ABI 3730荧光毛细管电泳检测平台上对XF1754扩增产物进行分析,结果显示,仅榧树雄株(含雌雄同株)样本能够扩增出单一且清晰的峰,与预期产物片段大小一致。因此,XF1754适用于荧光定量PCR仪和遗传分析仪等高通量检测平台。随机选择70份榧树不同性别种质自然群体进行分型与表型验证,结果表明使用XF1754可将榧树试材清晰地划分为2簇,分别代表雄株(含雌雄同株)群体与雌株种质群体,与实际的性别表型完全一致。【结论】筛选获得的XF1754标记可用于榧树种质资源性别性状的早期快速鉴定。 展开更多
关键词 榧树 雌雄 性别 分子标记
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