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趋化因子CXCL12可能参与白细胞介素17A对小鼠肺成纤维细胞的活化 被引量:2
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作者 王华英 吕佳佩 +1 位作者 陈丽萍 俞万钧 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期758-764,共7页
目的:研究IL-17A促进小鼠肺成纤维细胞活化及趋化因子CXCL12在其中的作用。方法:以雄性BALB/c小鼠为研究对象,小鼠腹腔注射重组小鼠IL-17A后取小鼠肺组织。采用实时逆转录PCR和蛋白质印迹法检测小鼠肺组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ... 目的:研究IL-17A促进小鼠肺成纤维细胞活化及趋化因子CXCL12在其中的作用。方法:以雄性BALB/c小鼠为研究对象,小鼠腹腔注射重组小鼠IL-17A后取小鼠肺组织。采用实时逆转录PCR和蛋白质印迹法检测小鼠肺组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白表达,采用免疫组织化学法和实时逆转录PCR法测定肺组织中趋化因子CXCL12的表达。分离培养正常小鼠原代肺成纤维细胞,采用免疫荧光染色法和光学显微镜观察鉴定原代肺成纤维细胞。将分离的肺成纤维细胞与不同浓度的重组小鼠IL-17A共培养后收集细胞及上清液,采用实时逆转录PCR法测定细胞中α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12的mRNA水平,采用ELISA法测定培养上清液中Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12蛋白水平。结果:与对照组比较,重组小鼠IL-17A处理后小鼠肺组织中α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白水平均升高(均P<0.01)。与不同浓度的重组小鼠IL-17A共培养后,小鼠肺成纤维细胞表达α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12的mRNA明显增加(均P<0.01),其培养基上清液中Ⅰ型胶原蛋白、CXCL12的浓度也明显升高(均P<0.01),且呈剂量依赖性。结论:IL-17A能促进肺成纤维细胞的活化并转化为肌成纤维细胞,分泌Ⅰ型胶原蛋白明显增加,促进细胞外基质的沉积,从而导致肺纤维化的发生和发展,而活化的成纤维细胞分泌的趋化因子CXCL12可能参与了这个过程。 展开更多
关键词 白细胞介素17A 趋化因子 CXCL12 成纤维细胞 Α平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 小鼠
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