宁夏回族自治区肉牛种业现状、问题及对策建议 被引量：6

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作者 马云 谷帅锋 +2 位作者 潘翠丽 杨梦丽 冯兰 《中国畜禽种业》 2023年第2期9-13,共5页

肉牛业作为宁夏“六特”产业之一,也是宁夏最新发展战略计划实施的开山之斧。宁夏肉牛种源丰富,既有引入品种,也有地方品种。随着西门塔尔牛和安格斯牛良种扩繁及固原黄牛资源评价与开发利用工作的开展实施,也暴露出一些问题,包括:群体... 肉牛业作为宁夏“六特”产业之一,也是宁夏最新发展战略计划实施的开山之斧。宁夏肉牛种源丰富,既有引入品种,也有地方品种。随着西门塔尔牛和安格斯牛良种扩繁及固原黄牛资源评价与开发利用工作的开展实施,也暴露出一些问题,包括:群体遗传改良基础性工作投入不足、品种繁杂、选育力度低下、种群遗传进展缓慢、育种目标不明确等问题。育种的最终目的是培育出既保留本土特色,又具有“优质-高端”性能的肉牛品种。因此该文对宁夏肉牛种业的发展现状、发展趋势以及存在的问题进行分析总结并提出建议,为进一步推动宁夏肉牛遗传育种产业发展提供参考。 展开更多

关键词 肉牛 种业创新 遗传育种 繁殖

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CRISPR/Cas9系统在家畜生殖细胞中的研究进展

2

作者 解雅茹 金昊延 +2 位作者 孔辰 蔡蓓 张令锴 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期479-491,共13页

生殖细胞是生命体遗传物质传递的主要载体,在家畜育种过程中发挥重要作用。人们对畜产品需求的不断增加促进了精确育种技术的发展。基因编辑技术显著提升基因强化和疾病治疗成效,这一进展凸显了将该技术应用于家畜生殖细胞研究的重要性... 生殖细胞是生命体遗传物质传递的主要载体,在家畜育种过程中发挥重要作用。人们对畜产品需求的不断增加促进了精确育种技术的发展。基因编辑技术显著提升基因强化和疾病治疗成效,这一进展凸显了将该技术应用于家畜生殖细胞研究的重要性。与其他基因编辑技术相比,CRISPR/Cas9系统和CRISPR/Cas12系统的研究较为深入。CRISPR/Cas技术已在多项研究中取得突破性进展,被视为一种极有潜力的育种改良手段。本文主要针对两种CRISPR/Cas系统及CRISPR/Cas9系统在家畜生殖细胞中的应用进行综述,对家畜生殖细胞形成过程进行简要概括,阐述CRISPR/Cas9系统和CRISPR/Cas12系统的原理、构成和衍生技术,介绍CRISPR/Cas9系统在家畜生殖细胞中的应用,对基因编辑技术广泛应用于家畜生殖细胞进行展望,旨在为未来畜牧基因编辑领域的研究提供参考。 展开更多

关键词 基因编辑技术 CRISPR/Cas9系统 CRISPR/Cas12系统 家畜生殖细胞

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3D细胞培养技术及其在毛囊发育研究中的应用

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作者 孔辰 田云 +1 位作者 高红瑞 蔡蓓 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期15-25,共11页

羊毛是重要的畜牧产品,由毛囊发育而来。毛囊是皮肤组织衍生的微器官,由毛囊干细胞、毛乳头、毛母质、外根鞘和内根鞘等20多种细胞组成,结构及细胞间通讯复杂。因此,提高羊毛产量和品质的前提是充分了解各种细胞相互作用下的毛囊发育特... 羊毛是重要的畜牧产品,由毛囊发育而来。毛囊是皮肤组织衍生的微器官,由毛囊干细胞、毛乳头、毛母质、外根鞘和内根鞘等20多种细胞组成,结构及细胞间通讯复杂。因此,提高羊毛产量和品质的前提是充分了解各种细胞相互作用下的毛囊发育特征。目前,细胞培养技术主要分为2D细胞培养和3D细胞培养。传统的2D细胞培养技术培养毛囊相关细胞时,与体内生长状况差距较大,毛发诱导能力逐渐丧失。3D细胞培养是将细胞在模拟组织和器官特异性的3D结构中进行培养,通过模拟天然环境,允许细胞聚集成为一定的形态,并且促进细胞-细胞的交流、细胞-细胞外基质的交流,从而恢复一定的在体功能,弥补了传统2D细胞培养的缺陷。本文简单介绍了3D细胞培养模型及种类、构建方法及在毛囊发育和生命科学相关研究中的应用,并展望了3D细胞培养技术在毛囊发育研究和其它领域的发展前景。 展开更多

关键词 3D细胞培养 毛囊 细胞外基质

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单细胞转录组测序技术在精子发生研究中的应用进展

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作者 马媛 金昊延 +2 位作者 王娜娜 李颀菡 张令锴 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4400-4409,共10页

精子发生是在哺乳动物睾丸内通过一系列细胞分化和发育,最终形成精子的过程,在时间和空间上具有高度异质性。随着生物信息学的不断更新与发展,以往研究大多依赖于对各种细胞类型的RNA进行分析。然而,从睾丸中分离每一种细胞类型是非常... 精子发生是在哺乳动物睾丸内通过一系列细胞分化和发育,最终形成精子的过程,在时间和空间上具有高度异质性。随着生物信息学的不断更新与发展,以往研究大多依赖于对各种细胞类型的RNA进行分析。然而,从睾丸中分离每一种细胞类型是非常大的挑战,因此在转录组水平上对于不同类型的睾丸生殖细胞的研究相对较少。近年来,由于科技的进步和发展,单细胞转录组测序(scRNA-Seq)技术已推出多种测序平台,其使用范围和场景不断扩大,在神经、肿瘤、免疫、生长发育和疾病等领域广泛应用,研究对象主要涉及人、模式生物及家畜。该技术可高效捕获睾丸内单个细胞,进行高通量测序分析,获取其转录组水平信息,精细描述其细胞类型,揭示细胞异质性,并推测其发育轨迹。目前,scRNA-Seq已经开始从家畜生殖细胞的角度对家畜精子发生相关机制进行更深入的探究,以此进一步研究家畜精子发生的相关过程。因此,作者在阐述scRNA-Seq技术方法的基础上,总结论述了其在牛、羊和猪等家畜精子发生领域中的应用进展,为家畜精子发生的研究提供理论基础。 展开更多

关键词 单细胞转录组测序 精子发生 家畜

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过表达circNMT1促进水牛脂肪细胞的成脂分化 被引量：3

5

作者 冯雪 赵金辉 +4 位作者 汪书哲 黄洁萍 魏雪锋 史远刚 马云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1077-1088,共12页

旨在鉴定非编码RNA circNMT1,明确其组织和细胞的表达模式,以及探究过表达circNMT1对脂肪细胞分化的影响。本试验以30月龄中国沼泽水牛(信阳水牛,n=3)的心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、背部皮下脂肪组织和前体脂肪细胞以及3T3-L1细胞为... 旨在鉴定非编码RNA circNMT1,明确其组织和细胞的表达模式,以及探究过表达circNMT1对脂肪细胞分化的影响。本试验以30月龄中国沼泽水牛(信阳水牛,n=3)的心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、背部皮下脂肪组织和前体脂肪细胞以及3T3-L1细胞为试验材料。通过半定量PCR和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)技术对circNMT1进行鉴定、细胞定位并明确其时空表达模式。进一步分别将其过表达到3T3-L1和水牛前体脂肪细胞中,利用形态学方法及定量方法检测过表达后脂滴累积情况,同时采用qRT-PCR检测脂肪标志基因相对表达水平的变化。结果表明,circNMT1是真实存在且稳定表达的circRNA,在水牛前体脂肪细胞的细胞核和细胞质中均表达,且在脂肪组织和成熟的脂肪细胞中高表达(P<0.001)。功能获得性试验表明,在3T3-L1细胞和水牛脂肪细胞,circNMT1显著促进脂肪细胞的脂滴积累,并且显著提高成脂标志基因PPARG、C/EBPα和FABP4的相对表达水平(P<0.01)。circNMT1可能是水牛脂肪细胞分化的正调控因子,这为circNMT1在水牛脂肪细胞中的调节作用提供了新见解。 展开更多

关键词 水牛 IMF 脂肪细胞 circRNA 过表达

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宁夏地区荷斯坦泌乳牛健康性状影响因素分析 被引量：2

6

作者 张俊星 张海亮 +7 位作者 韩丽云 马燕芬 温万 周佳敏 田佳 路婷婷 马云 王雅春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2389-2401,共13页

旨在探究宁夏地区荷斯坦泌乳牛健康问题发生的群体规律,分析风险因子对健康性状的影响。本研究收集并整理了宁夏地区13个规模化牧场2015—2021年间产犊的58549头泌乳牛的产犊和健康记录,采用UpSet程序和Spearman相关性分析方法揭示了不... 旨在探究宁夏地区荷斯坦泌乳牛健康问题发生的群体规律,分析风险因子对健康性状的影响。本研究收集并整理了宁夏地区13个规模化牧场2015—2021年间产犊的58549头泌乳牛的产犊和健康记录,采用UpSet程序和Spearman相关性分析方法揭示了不同健康问题之间的相关,利用Logistic回归模型分析了胎次、产犊季节、产犊难易评分等因素对6类健康性状的影响。研究结果表明,在宁夏地区的泌乳牛中,乳房健康和繁殖障碍在泌乳牛健康记录中占比较高,占比分别达29.97%和28.95%;产后前60 d是泌乳牛发生健康问题的关键阶段;随着胎次的增加,乳房健康、消化障碍、代谢障碍的发生率均逐渐升高,而繁殖障碍的发生率呈先下降后上升的趋势,2胎牛的发生率最低;健康问题之间表型相关性均较弱;风险因子Logistic分析发现,胎次、产犊季节和产犊难易评分对泌乳牛部分健康性状存在显著影响;春、夏季产犊的奶牛,代谢障碍的发生风险较高,秋、冬季产犊的奶牛,乳房健康和繁殖障碍的发生风险较高;难产母牛的代谢障碍和繁殖障碍的发生风险显著高于顺产母牛(1.30~1.82倍)。基于大规模牛群健康记录,本研究发现繁殖障碍和乳房健康是宁夏地区泌乳牛的关键健康问题,各类健康问题具有弱的表型相关,胎次、产犊季节和产犊难易评分均为泌乳牛健康性状的风险因子,研究结果为规模化牧场管理牛群健康问题提供参考,为奶牛健康性状的研究和选育提供理论依据。 展开更多

关键词 荷斯坦牛 健康性状 繁殖障碍 乳房健康 代谢障碍 风险因子

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NF-κB信号通路调控奶牛乳腺炎的分子作用机制 被引量：5

7

作者 李宇航 罗仍卓么 +3 位作者 王兴平 杨箭 马云 魏大为 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2740-2752,共13页

乳腺炎通常是由微生物感染引起的乳腺炎症反应,是奶牛最常见的疾病之一,可导致牛奶产量及品质下降,奶牛利用年限减少,严重地影响着牧场的经济效益。近年来,学者们在奶牛乳腺炎分子调节机制方面开展了大量研究,发现NF-κB及其信号通路可... 乳腺炎通常是由微生物感染引起的乳腺炎症反应,是奶牛最常见的疾病之一,可导致牛奶产量及品质下降,奶牛利用年限减少,严重地影响着牧场的经济效益。近年来,学者们在奶牛乳腺炎分子调节机制方面开展了大量研究,发现NF-κB及其信号通路可参与调控多个免疫相关基因的表达,在细胞炎症反应和免疫应答等过程起关键性作用,也是奶牛乳腺炎研究的热点。本文阐述了奶牛乳腺炎的病因和病理变化,以及NF-κB信号通路与机体免疫的关系,并重点综述了mRNA、非编码RNA(miRNA、lncRNA和circRNA)及生物活性物质通过NF-κB信号通路调控奶牛乳腺炎的最新研究进展,为奶牛乳腺炎的分子调控网络解析、抗乳腺炎分子育种与生物活性药物研发提供参考。 展开更多

关键词 奶牛 乳腺炎 NF-ΚB信号通路 非编码RNA 生物活性物质

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TLR7和TLR8在家畜性控技术中的研究进展

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作者 王娜娜 李颀菡 +4 位作者 马媛 金昊延 胡亚美 马云 张令锴 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期427-437,共11页

哺乳动物性别控制(sex control)技术在畜牧生产中有着重要的意义,在畜牧生产实践中,通过性别控制技术人类可以获得预想性别的优秀家畜后代,从而使家畜的泌乳性能、繁殖性能和生产性能发挥到最大。目前,传统的哺乳动物性别控制技术主要... 哺乳动物性别控制(sex control)技术在畜牧生产中有着重要的意义,在畜牧生产实践中,通过性别控制技术人类可以获得预想性别的优秀家畜后代,从而使家畜的泌乳性能、繁殖性能和生产性能发挥到最大。目前,传统的哺乳动物性别控制技术主要分为两类:受精前X/Y精子分离技术和受精后早期胚胎性别鉴定。这些方法都有各自的特点和局限性,如处理时间长、分离效率低、对精子活力和胚胎发育有损伤等,因此,这些技术有待进一步优化和完善。本文总结并分析了哺乳动物的传统性控技术,简述其各自特点及存在的问题。此外,利用激活Toll样受体7和Toll样受体8分离X/Y精子的新技术引起了广泛关注,与传统方法相比,该方法无需添加外源药物,具有高效、快速、无毒副作用等优点。尽管该技术已经成功应用于小鼠、羊、牛等动物的性别控制中,但在大规模应用上仍有一些问题需要进一步解决。本文总结了该技术的研究进展,分析了目前将该方法应用于实际生产中的可行性,并对该技术未来的发展趋势进行展望。 展开更多

关键词 哺乳动物 性别控制 精子分离 TLR7 TLR8

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固原黄牛不同部位肌肉组织代谢组学分析 被引量：3

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作者 王中波 刘爽 +10 位作者 贺丽霞 冯雪 杨梦丽 汪书哲 刘源 冯兰 丁晓玲 冀国尚 杨润军 张路培 马云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1565-1578,共14页

旨在探究与固原黄牛肉风味形成相关的关键代谢物、代谢途径和酶,为深入解析固原黄牛肉肉品组成提高肉品质量奠定基础。本研究选用同一生长条件下,24月龄的6头健康雄性固原黄牛作为研究对象,利用非靶向代谢组学技术对眼肉、肩肉和臀肉3... 旨在探究与固原黄牛肉风味形成相关的关键代谢物、代谢途径和酶,为深入解析固原黄牛肉肉品组成提高肉品质量奠定基础。本研究选用同一生长条件下,24月龄的6头健康雄性固原黄牛作为研究对象,利用非靶向代谢组学技术对眼肉、肩肉和臀肉3个组进行代谢物分析鉴定,通过主成分分析、偏最小二乘法判别分析和聚类分析筛选差异代谢物,并对筛选结果进行富集分析。随后,利用FELLA分析调控不饱和脂肪酸合成代谢相关的途径以及潜在的关键代谢物,同时对差异代谢物进行WGCNA分析。代谢物分析结果显示,固原黄牛眼肉、肩肉和臀肉3个组共鉴定出689个代谢物,其中脂质和类脂分子占比32.08%,脂肪酸类代谢物49种,聚类分析肩肉组和臀肉组样本聚为一类,眼肉组样本单独为一类。N6,N6,N6-三甲基-L-赖氨酸(N6,N6,N6-trimethyl-L-lysine)和麦芽三糖(maltotriose)是眼肉、肩肉和臀肉组与组之间共同的差异代谢物,二者含量均在眼肉最高。KEGG通路分析显示,差异代谢物主要富集在不饱和脂肪酸生物合成、嘌呤代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等代谢通路。通过WGCNA分析筛选出与3个肌肉部位相关的模块,并鉴定出了各模块中的关键代谢物。本研究通过对固原黄牛不同部位肌肉组织进行代谢组学分析,鉴定到与肉品质差异和风味形成相关的10种关键代谢物和17种关键酶,为今后探究固原黄牛肉风味形成的分子调控机制和分子育种提供理论基础,同时也为其他肉牛的品质性状育种提供参考。 展开更多

关键词 固原黄牛 非靶向代谢组学 风味 不饱和脂肪酸 分子育种

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奶牛代谢病发病机制解析及植物提取物的防控作用 被引量：2

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作者 马莉花 王娜娜 +3 位作者 马学虎 徐晓锋 马云 马燕芬 《中国饲料》 北大核心 2024年第11期8-14,共7页

奶牛在养殖过程中易患各种疾病,极大的制约了养殖业的发展。植物提取物具有天然、绿色、毒副作用小等优点,引起了饲料行业的广泛关注。植物提取物作为一种来源广泛且含有生物碱、皂苷、单宁和多糖等多种生物活性物质的饲料添加剂,具有... 奶牛在养殖过程中易患各种疾病,极大的制约了养殖业的发展。植物提取物具有天然、绿色、毒副作用小等优点,引起了饲料行业的广泛关注。植物提取物作为一种来源广泛且含有生物碱、皂苷、单宁和多糖等多种生物活性物质的饲料添加剂,具有抗氧化、抗应激、提高免疫力、改善肠道健康等特殊生物调控作用,在奶牛养殖方面具有广阔的应用前景。本文围绕植物提取物对奶牛常见疾病的调控进行综述,旨在为植物提取物在奶牛疾病方面的研究和实际生产中的应用提供参考。 展开更多

关键词 奶牛疾病 植物提取物 胃肠道菌群 氧化应激

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荷斯坦牛产后首次发情表现性状遗传参数估计

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作者 杨桐桐 张海亮 +8 位作者 王澳 常瑶 李珊珊 郭佳和 张俊星 黄越川 韩丽云 王瑜 王雅春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5050-5058,共9页

旨在通过智能项圈记录的发情记录定义奶牛发情表现性状,探究奶牛产后首次发情表现的群体规律并估计遗传参数。本研究数据来自宁夏地区8个规模化奶牛场的荷斯坦牛,收集了2020—2023年35519头奶牛的272589811条发情记录和649274条繁殖记录... 旨在通过智能项圈记录的发情记录定义奶牛发情表现性状,探究奶牛产后首次发情表现的群体规律并估计遗传参数。本研究数据来自宁夏地区8个规模化奶牛场的荷斯坦牛,收集了2020—2023年35519头奶牛的272589811条发情记录和649274条繁殖记录,定义了3个发情表现性状,包括产后首次发情的持续时间、发情指数及产犊至首次发情间隔;采用SAS 9.2软件的GLM过程,分析了非遗传因素对产后首次发情表现性状的影响;基于DMU软件的DMUAI模块,使用单性状和双性状模型估计了产后首次发情表现性状的遗传参数。结果表明,荷斯坦牛产后首次发情的持续时间、发情指数以及产犊至首次发情间隔的平均值分别为45.87 h、80.25 au和44.43 d,胎次、首次配种日龄、昼夜效应、场效应和产犊年季效应对上述3个性状均有显著影响(P<0.05);产后首次发情的持续时间属于中等遗传力性状,遗传力估计值为0.139,发情指数和产犊至首次发情间隔属于低遗传力性状,遗传力均低于0.1;产后首次发情表现性状之间存在中至高的遗传相关,遗传相关系数的绝对值为0.179~0.722;产后首次发情性状与常规繁殖性状之间存在中高遗传相关,遗传相关系数的绝对值为0.146~0.766。通过智能项圈数据可以准确量化并监测奶牛的发情状况,从而解决传统记录方式的局限性。基于项圈数据定义的奶牛产后首次发情表现性状是可遗传的,将其与常规繁殖性状结合进行综合选择可为繁殖性能的选育提供新方向。 展开更多

关键词 奶牛 繁殖性状 产后首次发情 遗传参数

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固原黄牛遗传背景及其体尺指数、肉用指数分析 被引量：4

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作者 刘爽 贺丽霞 +9 位作者 马钧 冯雪 杨梦丽 汪书哲 杨润军 房希碧 咸海龙 王永康 张路培 马云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2376-2388,共13页

旨在鉴定固原黄牛是相对独立的肉牛遗传资源,进一步描述其生长发育规律,为固原黄牛肉用种质资源的鉴定和选育提供一定的理论依据。本研究通过历史文献和调查研究分析固原黄牛的演变历史;使用GGP Bovine 100K基因芯片检测和公共数据库中... 旨在鉴定固原黄牛是相对独立的肉牛遗传资源,进一步描述其生长发育规律,为固原黄牛肉用种质资源的鉴定和选育提供一定的理论依据。本研究通过历史文献和调查研究分析固原黄牛的演变历史;使用GGP Bovine 100K基因芯片检测和公共数据库中下载包括固原黄牛在内共计13个品种、337个个体全基因组遗传变异数据,通过多维标度分析和构建邻接法系统发育树,分析固原黄牛遗传背景;以红安格斯牛×固原黄牛杂交牛为对照群体,测定与收集不同生长发育阶段固原黄牛的体重、体尺、背膘厚和眼肌面积等表型数据,参照《中国畜禽遗传资源志·牛志》公开发表的秦川牛和蒙古牛的表型数据,从表型描述挖掘固原黄牛相关指标的群体规律。结果表明,固原黄牛是固原本土黄牛与周边蒙古牛和秦川牛相互影响,经过长期选育形成的体型外貌一致的独特类群;现存固原黄牛群体在遗传结构上与邻近的秦川牛和晋南牛遗传关系较近,是相对独立的资源群体;与固原黄牛青年母牛相比较,固原黄牛成年母牛体躯指数提升了9.57%;用红安格斯牛杂交改良后,固原黄牛杂交牛母牛胸围指数和体躯指数分别提升了11.59%、12.70%,固原黄牛杂交牛公牛体长指数、胸围指数分别提升了15.15%、19.26%;固原黄牛成年母牛肉用指数为2.65±0.46,固原黄牛成年公牛肉用指数为2.87±0.35,均属役用牛;固原黄牛公牛背膘厚为(5.29±1.41)mm,高于蒙古牛公牛背膘厚(4.00±1.00)mm;固原黄牛公牛眼肌面积为(62.17±8.51)cm^(2),介于秦川牛公牛眼肌面积(79.80±9.70)cm^(2)和蒙古牛公牛眼肌面积之间(50.40±9.80)cm^(2)。固原黄牛是新的肉牛遗传资源,拥有良好的肉用种质特性,但其体尺指数、肉用指数还未达到专用化肉牛标准,后期需要加强选育,并进行良种扩繁和遗传改良,进一步发挥其种质资源特性。 展开更多

关键词 固原黄牛 遗传背景 体尺指数 肉用指数 种质资源

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奶牛乳脂代谢关键miRNAs的筛选及鉴定 被引量：1

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作者 刘佳敏 禹保军 +6 位作者 母童 张迪 冯小芳 张娟 王影 温万 顾亚玲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期4244-4257,共14页

旨在探究影响中国荷斯坦奶牛乳脂代谢过程的关键miRNAs及靶mRNAs。本研究选择泌乳中后期(150~220 d)的第一胎次且乳脂率具有极端差异的8头宁夏荷斯坦奶牛,根据乳脂率的差异分为两组:高乳脂组和低乳脂组,每组4个重复。采集8头奶牛的奶样... 旨在探究影响中国荷斯坦奶牛乳脂代谢过程的关键miRNAs及靶mRNAs。本研究选择泌乳中后期(150~220 d)的第一胎次且乳脂率具有极端差异的8头宁夏荷斯坦奶牛,根据乳脂率的差异分为两组:高乳脂组和低乳脂组,每组4个重复。采集8头奶牛的奶样分离乳腺上皮细胞,进行转录组测序和生物信息学分析,筛选出差异表达miRNA-mRNA并与乳脂率进行相关性分析。通过实时荧光定量PCR验证miRNAs和mRNAs表达。结果表明,8个small RNA(sRNA)文库测序获得11 976 914~16 235 680的clean reads,占总raw reads的比例均在97%以上,Q30达到91%以上,sRNA片段长度主要分布在21~24 nt。在高乳脂组和低乳脂组间共鉴定了34个差异表达miRNAs(16个上调,18个下调)。GO和KEGG富集分析表明,差异表达miRNAs的靶基因在细胞内信号转导、单一生物体过程、激酶结合和磷酸转移酶活性等功能条目显著富集,并且显著富集到TNF信号传导途径、MAPK信号传导途径、Ras信号传导途径、Rap1信号通路和催产素信号传导途径等乳脂代谢相关通路。通过miRNA-mRNA综合分析,共获得16个miRNA-靶基因对,其中miR-1343-3p和MTM1与乳脂率显著负相关,miR-370、miR-2285cb和SRRM2与乳脂率显著正相关。RT-qPCR验证差异表达miRNA和mRNA与转录组测序表达趋势一致。这些结果从miRNA和mRNA水平探究了宁夏地区荷斯坦奶牛乳脂代谢的功能机制,鉴定出miR-370-MTM1、miR-1343-3p-DIS3L2、miR-2285cb-XLOC-122799和miR-2387-SRRM2互作对可能是调控奶牛乳脂代谢的关键因子。 展开更多

关键词 MIRNA 乳脂 中国荷斯坦奶牛 转录组学 miRNA-mRNA互作

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奶牛乳腺炎模型的建立及炎症相关因子基因mRNA转录水平的分析 被引量：8

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作者 罗仍卓么 王晋鹏 +4 位作者 焦鹏 李彦霞 董益闻 魏大为 王兴平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2763-2772,共10页

旨在探讨金黄色葡萄球菌(S.aureus)型和大肠杆菌(E.coli)型乳腺炎奶牛乳腺组织的炎症相关因子基因的mRNA转录水平。将105 CFU·mL^(-1)的S.aureus和E.coli经乳导管分别注入奶牛乳房,在感染第7天采用活体无菌手术法采集乳腺组织,并... 旨在探讨金黄色葡萄球菌(S.aureus)型和大肠杆菌(E.coli)型乳腺炎奶牛乳腺组织的炎症相关因子基因的mRNA转录水平。将105 CFU·mL^(-1)的S.aureus和E.coli经乳导管分别注入奶牛乳房,在感染第7天采用活体无菌手术法采集乳腺组织,并采用组织HE染色和免疫荧光法进行乳腺炎模型的鉴定;利用qPCR分别检测了2个诱导组和对照组奶牛乳腺组织的趋化因子家族(CCL2、CCL8、CXCR1、CXCL2和CXCL13)、补体因子(CFI和CFB)、自噬调节因子DEPP1和白细胞介素受体IL21R共9个基因的mRNA转录水平。结果显示:与对照组相比,TLR4/NF-κB炎症相关信号通路中的关键分子(TLR4、NF-κB和TNFα)在2个诱导组乳腺组织中的蛋白表达水平均极显著上调(P<0.01);结合HE染色结果,表明本试验成功构建了2种类型的奶牛乳腺炎活体模型。mRNA转录水平的检测结果表明,与对照组相比,7个基因(CCL2、CCL8、CXCR1、CXCL2、CFI、CFB和IL21R)在2个诱导组乳腺组织中的mRNA转录水平均极显著上调(P<0.001),CXCL13的mRNA转录水平仅在S.aurues诱导组乳腺组织中极显著上调(P<0.01);DEPP1的mRNA转录水平在2个诱导组中均极显著下调(P<0.01)。此外,CCL2、CCL8、CXCR1、CFI和IL21R共5个基因在E.coli诱导组中的mRNA转录水平均极显著高于S.aureus组(P<0.01)。S.aureus和E.coli感染均可导致奶牛产生严重的临床乳腺炎症状,并促使上述炎症相关基因的mRNA转录水平在乳腺组织中发生变化,以应对乳腺炎症的发生与发展过程;趋化因子CCL2等5个基因在E.coli诱导组中的mRNA转录水平显著高于S.aureus诱导组,解释了E.coli常常能引起急性乳腺炎,而S.aureus可引起慢性乳腺炎的原因。上述结果可为深入研究不同类型乳腺炎的分子调控机制提供参考。 展开更多

关键词 奶牛 乳腺炎 基因表达 炎症

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奶牛乳腺炎差异表达lncRNA BCL2对炎症及凋亡相关mRNA表达的影响 被引量：4

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作者 焦鹏 王兴平 +5 位作者 汪书哲 王晋鹏 罗仍卓么 贾立 魏大为 马云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期2160-2171,共12页

本研究旨在探讨长链非编码RNA BCL2(lncRNA BCL2)对奶牛乳腺上皮细胞炎症及凋亡中的调控作用。利用RNAhybrid、Targetscan和miRwalk软件分析lncRNA BCL2海绵吸附的miRNAs及其所靶向的mRNAs,并对这些靶基因进行KEGG通路富集分析;采用qPCR... 本研究旨在探讨长链非编码RNA BCL2(lncRNA BCL2)对奶牛乳腺上皮细胞炎症及凋亡中的调控作用。利用RNAhybrid、Targetscan和miRwalk软件分析lncRNA BCL2海绵吸附的miRNAs及其所靶向的mRNAs,并对这些靶基因进行KEGG通路富集分析;采用qPCR和lncRNA超表达技术研究了lncRNA BCL2在乳腺组织和乳腺上皮细胞炎症中的表达情况及其对乳腺上皮细胞炎症和凋亡相关基因表达的影响。结果发现,与对照组相比,lncRNA BCL2在临床乳腺炎奶牛的乳腺组织和LPS诱导炎症的乳腺上皮细胞中的表达量均显著下调(P<0.05);在lncRNA BCL2超表达的情况下,乳腺上皮细胞内炎症因子IL-1β与IL-8及炎症信号通路关键基因NF-κB(p65/p50)的表达量均显著上调(P<0.05);细胞凋亡相关的CASP3和CASP9基因的表达显著下降(P<0.05),BCL2表达量显著上调(P<0.001),且BCL2与BAX比值大于2。该结果与生物信息学分析结果相符,表明lncRNA BCL2可能通过lncRNA BCL2-miRNA-BCL2-(NLRP1,CASP1,NLRP3)网络调控奶牛乳腺上皮细胞的炎症与凋亡。综上,奶牛乳腺炎过程中,lncRNA BCL2的表达量下调,减弱了其对IL-1β、IL-8和NF-κB表达上调的作用,从而可能缓解了乳腺炎症;同时,lncRNA BCL2表达量下降减弱了其下调CASP3和CASP9基因表达和上调BCL2基因表达的作用,从而可能促进了奶牛乳腺上皮细胞凋亡。 展开更多

关键词 lncRNA BCL2 乳腺上皮细胞 细胞炎症 细胞凋亡 乳腺炎

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牛ADIG基因启动子转录调控分析 被引量：3

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作者 唐林 魏大为 +5 位作者 汪书哲 雷召雄 高晓茜 王兴平 马燕芬 马云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期722-730,共9页

旨在构建脂肪生成素基因(adipohenin,ADIG)在牛不同组织中的表达谱,鉴定其核心启动子区域及关键转录因子,以期阐明其转录调控的分子机制。本研究采集3头((24±2)月龄)健康南阳公牛的心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织,通过逆... 旨在构建脂肪生成素基因(adipohenin,ADIG)在牛不同组织中的表达谱,鉴定其核心启动子区域及关键转录因子,以期阐明其转录调控的分子机制。本研究采集3头((24±2)月龄)健康南阳公牛的心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织,通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组织中ADIG基因的相对表达量;克隆获得牛ADIG基因上游启动子区2245 bp序列,构建6个pGL3-WT,与pRL-TK共转染293T细胞、原代脂肪细胞和3T3-L1细胞,进一步利用生物信息学预测其核心启动子区的关键转录因子。结果发现,ADIG基因在南阳牛肺(P<0.05)、肾(P<0.05)和皮下脂肪(P<0.05)组织中高表达;克隆得到2245 bp及其6段缺失片段序列的ADIG基因的启动子序列,成功构建了pADIG-1621/+59、pADIG-1288/+59、pADIG-850/+59、pADIG-589/+59、pADIG-321/+59和pADIG-79/+59双荧光素酶报告载体,并检测到牛ADIG基因启动子核心区域在-321/-79;生物信息学初步预测牛ADIG基因核心区域含有C/EBPα、PPARδ、CREB、STAT5和AP-2α等转录因子结合位点。综上,牛ADIG基因在皮下脂肪组织中表达量最高,其启动子核心区位于-321/-79,C/EBPα、PPARδ、CREB、STAT5和AP-2α等转录因子对ADIG基因转录活性具有调控作用。本研究结果为探究ADIG基因在肉牛分子水平上的改良培育提供理论依据。 展开更多

关键词 南阳牛 ADIG基因 启动子 转录调控 双荧光素酶报告基因

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苜蓿源miR168b跨界调控奶牛体内乳脂相关靶基因的筛选

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作者 贾晶莹 刘宝宝 +2 位作者 马云 段红娟 蔡小艳 《草业学报》 CSCD 北大核心 2023年第10期173-186,共14页

筛选出高乳脂奶牛和低乳脂奶牛血液和牛奶中显著差异表达的苜蓿来源miRNAs及其在奶牛体内的潜在靶基因,可为进一步探究苜蓿源miRNAs(mtr-miRNAs)在基因水平调节牛奶乳脂率奠定基础。试验首先对生产4胎,日粮水平一致的荷斯坦奶牛牛奶进... 筛选出高乳脂奶牛和低乳脂奶牛血液和牛奶中显著差异表达的苜蓿来源miRNAs及其在奶牛体内的潜在靶基因,可为进一步探究苜蓿源miRNAs(mtr-miRNAs)在基因水平调节牛奶乳脂率奠定基础。试验首先对生产4胎,日粮水平一致的荷斯坦奶牛牛奶进行了奶牛生产性能(dairy herd improvement,DHI)检测,在高乳脂和低乳脂奶牛中各选3头作为重复。运用RT-qPCR对奶牛血液和牛奶中的苜蓿源miRNAs进行定量,筛选出差异表达miRNAs后对其进行靶基因预测和分析,并根据miRNA-mRNA结合位点和定量结果筛选出与乳脂代谢相关的靶基因。结果如下:1)DHI检测筛选出了3头高乳脂奶牛和3头低乳脂奶牛,高乳脂奶牛牛奶中脂肪含量>4.2%,低乳脂奶牛牛奶中脂肪含量<3.5%;2)苜蓿源novel-miR54、miR156f、miR166a、miR168b和miR168c-3p在奶牛血液和牛奶中均能检测到,其中mtr-miR168b在高乳脂奶牛血液中的表达量极显著低于在低乳脂奶牛中的表达量(P<0.01),在高乳脂奶牛牛奶中的表达量显著低于在低乳脂奶牛中的表达量(P<0.05);3)mtr-miR168b在乳腺上皮细胞中高表达抑制了其中脂代谢标志基因PPARγ,SCD1,CEBP/β和SREBP1的表达量;4)mtr-miR168b预测靶基因分别有1834和296个与GO和KEGG数据库比对成功,靶基因主要与N-聚糖生物合成(3.72%)、cGMP-PKG信号通路(2.37%)和血管平滑肌收缩(2.37%)密切相关,甘油磷脂代谢(1.69%)通路也被显著富集;5)筛选出CPT1A和STARD7两个与脂代谢密切相关的基因,并通过双荧光素酶报告确认了miR-168b和CPT1A与STARD7的靶向关系。由此可见,mtr-miR168b可抑制乳腺上皮细胞中的成脂标志基因的表达,试验为后续验证苜蓿源miRNAs调控奶牛乳脂率提供了可进一步验证的靶基因。 展开更多

关键词 荷斯坦奶牛 跨界调控 mtr-miR168b 乳脂 靶基因

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