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LncRNA EFRL在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化巨噬细胞胞葬中的作用及机制研究
1
作者
杨佳琪
张正皓
+6 位作者
马芳
夏童童
刘虹麟
熊建团
马胜超
姜怡邓
郝银菊
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025年第7期577-584,共8页
目的探究胞葬作用相关长链非编码RNA(EFRL)在同型半胱氨酸(Hcy)致动脉粥样硬化(AS)巨噬细胞胞葬作用中的影响及其作用机制。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞,设立对照组(0μmol/L Hcy)和Hcy干预组(100μmol/L Hcy),Hcy干预的巨噬细胞转染...
目的探究胞葬作用相关长链非编码RNA(EFRL)在同型半胱氨酸(Hcy)致动脉粥样硬化(AS)巨噬细胞胞葬作用中的影响及其作用机制。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞,设立对照组(0μmol/L Hcy)和Hcy干预组(100μmol/L Hcy),Hcy干预的巨噬细胞转染锁核苷酸(GapmeR)后设置EFRL敲低阴性对照组(Hcy联合LNA-NC)和EFRL敲低组(Hcy联合LNA-EFRL);高通量测序获得差异性表达LncRNA MSTRG.88917.16(EFRL),基因组浏览器(UCSC)分析保守性,转录本蛋白编码潜能预测工具(CPC)和转录本蛋白编码能力预测软件(CPAT)分析编码蛋白能力,基因本体数据库(GO)和基因组破译方面的数据库(KEGG)分析相关生物学功能;核质分离法和RNA-FISH检测EFRL在巨噬细胞中定位;实时定量PCR检测Hcy干预的巨噬细胞中EFRL及靶基因遗传性痉挛性截瘫4型基因(SPAST)的表达水平;流式细胞术检测紫外线诱导的Jurkat细胞凋亡率;免疫荧光技术结合体外巨噬细胞胞葬实验分析巨噬细胞胞葬作用;ELISA检测炎症相关因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18含量。结果鉴定新的LncRNA MSTRG.88917.16并命名为EFRL(Efferocytosis Relatived LncRNA,胞葬作用相关长链非编码RNA);UCSC、CPC、CPAT明确EFRL保守性高且不具备编码蛋白能力,GO、KEGG功能富集分析显示EFRL可能参与巨噬细胞胞葬作用;核质分离法和RNA-FISH检测EFRL定位于巨噬细胞细胞核;与对照组相比,Hcy组中EFRL及靶基因SPAST表达水平增高;与对照组(0 min)相比较,实验组(15、30 min)凋亡率Annexin V>85%;与Hcy联合LNA-NC组相比,Hcy联合LNA-EFRL组中巨噬细胞胞葬作用增强,介导的炎症因子含量降低;与Hcy联合LNA-NC组相比,Hcy联合LNA-EFRL组中SPAST表达水平降低。结论降低EFRL的表达能够缓解Hcy抑制巨噬细胞胞葬作用的过程,其机制与EFRL调控下游靶基因SPAST有关。
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关键词
胞葬作用
同型半胱氨酸(Hcy)
动脉粥样硬化(AS)
长链非编码RNA
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职称材料
题名
LncRNA EFRL在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化巨噬细胞胞葬中的作用及机制研究
1
作者
杨佳琪
张正皓
马芳
夏童童
刘虹麟
熊建团
马胜超
姜怡邓
郝银菊
机构
国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室
宁夏回族自治区人民医院耳鼻喉科
宁夏
医科大学基础医学院病理生理学系
宁夏
医科大学检验学院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025年第7期577-584,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(82370293,82270492)
国家自然科学基金地区项目(82060139)
+1 种基金
国家自然科学基金区域创新发展联合基金(U21A20343)
宁夏回族自治区重点研发计划重点项目(2023BEG02074,2022BFH02013,2021BEG02033)。
文摘
目的探究胞葬作用相关长链非编码RNA(EFRL)在同型半胱氨酸(Hcy)致动脉粥样硬化(AS)巨噬细胞胞葬作用中的影响及其作用机制。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞,设立对照组(0μmol/L Hcy)和Hcy干预组(100μmol/L Hcy),Hcy干预的巨噬细胞转染锁核苷酸(GapmeR)后设置EFRL敲低阴性对照组(Hcy联合LNA-NC)和EFRL敲低组(Hcy联合LNA-EFRL);高通量测序获得差异性表达LncRNA MSTRG.88917.16(EFRL),基因组浏览器(UCSC)分析保守性,转录本蛋白编码潜能预测工具(CPC)和转录本蛋白编码能力预测软件(CPAT)分析编码蛋白能力,基因本体数据库(GO)和基因组破译方面的数据库(KEGG)分析相关生物学功能;核质分离法和RNA-FISH检测EFRL在巨噬细胞中定位;实时定量PCR检测Hcy干预的巨噬细胞中EFRL及靶基因遗传性痉挛性截瘫4型基因(SPAST)的表达水平;流式细胞术检测紫外线诱导的Jurkat细胞凋亡率;免疫荧光技术结合体外巨噬细胞胞葬实验分析巨噬细胞胞葬作用;ELISA检测炎症相关因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18含量。结果鉴定新的LncRNA MSTRG.88917.16并命名为EFRL(Efferocytosis Relatived LncRNA,胞葬作用相关长链非编码RNA);UCSC、CPC、CPAT明确EFRL保守性高且不具备编码蛋白能力,GO、KEGG功能富集分析显示EFRL可能参与巨噬细胞胞葬作用;核质分离法和RNA-FISH检测EFRL定位于巨噬细胞细胞核;与对照组相比,Hcy组中EFRL及靶基因SPAST表达水平增高;与对照组(0 min)相比较,实验组(15、30 min)凋亡率Annexin V>85%;与Hcy联合LNA-NC组相比,Hcy联合LNA-EFRL组中巨噬细胞胞葬作用增强,介导的炎症因子含量降低;与Hcy联合LNA-NC组相比,Hcy联合LNA-EFRL组中SPAST表达水平降低。结论降低EFRL的表达能够缓解Hcy抑制巨噬细胞胞葬作用的过程,其机制与EFRL调控下游靶基因SPAST有关。
关键词
胞葬作用
同型半胱氨酸(Hcy)
动脉粥样硬化(AS)
长链非编码RNA
Keywords
efferocytosis
homocysteine(Hcy)
atherosclerosis(AS)
Long non-coding RNA
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
R363 [医药卫生—病理学]
R543.5 [医药卫生—心血管疾病]
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出处
发文年
被引量
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1
LncRNA EFRL在同型半胱氨酸致动脉粥样硬化巨噬细胞胞葬中的作用及机制研究
杨佳琪
张正皓
马芳
夏童童
刘虹麟
熊建团
马胜超
姜怡邓
郝银菊
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025
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