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慢病毒介导的犬WRD细胞p53基因沉默及稳定感染细胞系的建立被引量：2: 1; 作者李芳闫琰 +5 位作者张茜李建宁姚青高玉婧杨怡孙玉宁《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1721-1727,共7页; 目的构建靶向犬p53基因慢病毒干扰载体,建立稳定沉默p53基因的WRD/p53-细胞系。方法设计并构建4条针对犬p53基因的特异性shRNA干扰质粒。将构建的慢病毒表达载体(p GMLV-p53)和包装质粒(packaging mix)组成的包装系统共转染293T细胞,包... 展开更多; 关键词 P53 RNA干扰慢病毒载体 WRD细胞 P53; 在线阅读下载PDF 职称材料

枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1表达并降低MMP-9及HIF-1α表达被引量：7: 2; 作者朱燕妮孙玉宁 +5 位作者关文霞闫琰张薇白鲁根孔海涛李芳《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期906-910,916,共6页; 目的监测在缺氧条件下进行枸杞多糖处理后肺血管平滑肌细胞中沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达。方法血管平滑肌细胞分为常氧(200 m L/L O2)培养的正常细胞、2μmol/... 展开更多; 关键词枸杞多糖沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1) 缺氧诱导因子1α(HIF-1α) 基质金属蛋白酶(MMP-9) 肺动脉平滑肌细胞肺动脉高压; 在线阅读下载PDF 职称材料

Sirt-1和Hif-1α在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中的表达及其意义被引量：11: 3; 作者李芳关文霞 +2 位作者任飞仝雪霞孙玉宁《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期356-361,共6页; 目的:检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中沉默信息调节子(Sirt-1)和缺氧诱导因子1α(Hif-1α)的表达,探讨Sirt-1和Hif-1α的表达在COPD发生发展中的作用。方法:应用肺功能仪对COPD急性加重期组(n=20)、COPD稳定期... 展开更多; 关键词沉默信息调节子缺氧诱导因子1 慢性阻塞性肺疾病外周血单个核细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

X射线辐照引起GC1小鼠精原细胞凋亡诱导因子核转位并诱导其凋亡被引量：1: 4; 作者杨慧莹丁敬宾 +3 位作者王志军丁娟夏新舍赵薇《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期357-361,共5页; 目的研究X射线辐照后GC1小鼠精原细胞凋亡诱导因子(AIF)细胞定位的变化。方法 GC1细胞分别给予0、3、6、9 Gy X射线辐照,溴脱氧尿苷(Brd U)掺入实验检测辐照对细胞增殖速率的影响;辐照后48 h,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察... 展开更多; 关键词凋亡诱导因子细胞凋亡 GC1小鼠精原细胞株 X射线; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢病毒介导的犬WRD细胞p53基因沉默及稳定感染细胞系的建立被引量：2: 1; 作者李芳闫琰张茜李建宁姚青高玉婧杨怡孙玉宁; 机构宁夏医科大学总院呼吸与危重医学科宁夏医科大学生物化学与分子生物学系; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1721-1727,共7页; 基金国家自然科学基金(81060130)~~; 文摘目的构建靶向犬p53基因慢病毒干扰载体,建立稳定沉默p53基因的WRD/p53-细胞系。方法设计并构建4条针对犬p53基因的特异性shRNA干扰质粒。将构建的慢病毒表达载体(p GMLV-p53)和包装质粒(packaging mix)组成的包装系统共转染293T细胞,包装病毒,收集病毒原液,超滤浓缩,并测定滴度。包装好的慢病毒感染WRD细胞,Western blot和实时荧光定量PCR方法检测不同靶点RNA干扰载体对p53基因的干扰效果,确定有效靶点。针对有效靶点慢病毒颗粒以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染WRD细胞,puromycin抗生素筛选稳定感染细胞系WRD/p53-。结果结果显示p53 RNAi慢病毒载体构建成功,成功包装四种不同靶点的p53基因RNA干扰慢病毒,病毒滴度均达到1×109TU/ml。四种干扰载体慢病毒均具有较好的干扰效果,选用沉默效果最好的p GMLV-p53A1为最优靶点,成功建立p53 RNAi慢病毒载体稳定感染细胞系WRD/p53-。结论成功构建p53 RNAi慢病毒载体,并有效干扰WRD细胞中p53 mRNA和蛋白表达,同时成功筛选并建立p53RNAi慢病毒稳定感染WRD/p53-细胞系。; 关键词 P53 RNA干扰慢病毒载体 WRD细胞 P53; Keywords RNA interference lentivirus vector WRD cells; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1表达并降低MMP-9及HIF-1α表达被引量：7: 2; 作者朱燕妮孙玉宁关文霞闫琰张薇白鲁根孔海涛李芳; 机构宁夏医科大学临床医学院宁夏医科大学总医院呼吸与危重学科宁夏医科大学生物化学与分子生物学系; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期906-910,916,共6页; 基金国家自然科学基金(81160007); 文摘目的监测在缺氧条件下进行枸杞多糖处理后肺血管平滑肌细胞中沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达。方法血管平滑肌细胞分为常氧(200 m L/L O2)培养的正常细胞、2μmol/m L枸杞多糖处理的常氧细胞、DMSO处理的常氧细胞、DMSO处理的缺氧(100 m L/L O2)细胞、(0.5、1、2)μmol/m L枸杞多糖处理的缺氧细胞、SIRT1的特异性激动剂10μmol/L白芦藜醇处理的缺氧细胞、非特异性激动剂1μmol/L SRT-1720处理的缺氧细胞、SIRT1抑制剂0.5μmol/L EX-527处理的缺氧细胞,培养于6、12、24 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测SIRT1、MMP-9及HIF-1α的mRNA和蛋白表达;在缺氧的血管平滑肌细胞中加入枸杞多糖处理12 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测血管平滑肌细胞中SIRT1、MMP-9及HIF-1α的表达。结果缺氧条件下血管平滑肌细胞SIRT1mRNA和蛋白水平降低,MMP-9及HIF-1αmRNA和蛋白水平升高。缺氧条件下用枸杞多糖处理后,SIRT1的含量随枸杞多糖剂量的增加而增加,同时MMP-9、HIF-1α的含量降低。SIRT1的特异性激动剂白藜芦醇可抑制MMP-9的表达。结论枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1水平、降低MMP-9及HIF-1α的水平。; 关键词枸杞多糖沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1) 缺氧诱导因子1α(HIF-1α) 基质金属蛋白酶(MMP-9) 肺动脉平滑肌细胞肺动脉高压; Keywords Lycium barbarum polysaccharide （LBP） silent mating type information regulation 2 homolog-1 （ SIRT1 ）hypoxia-inducibl factor 1α （HIF-1α） matrix metalloproteinase-9 （ MMP-9 ） ~ pulmonary vascular smoothmuscle cells pulmonary arterial hypertension; 分类号 R285.5 [医药卫生—中药学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Sirt-1和Hif-1α在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中的表达及其意义被引量：11: 3; 作者李芳关文霞任飞仝雪霞孙玉宁; 机构宁夏医科大学总医院呼吸与危重医学科宁夏医科大学研究生院宁夏医科大学生物化学与分子生物学系; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期356-361,共6页; 基金国家自然科学基金资助课题(81160007) 宁夏回族自治区科技厅自然科学基金资助课题(NZ11204); 文摘目的:检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中沉默信息调节子(Sirt-1)和缺氧诱导因子1α(Hif-1α)的表达,探讨Sirt-1和Hif-1α的表达在COPD发生发展中的作用。方法:应用肺功能仪对COPD急性加重期组(n=20)、COPD稳定期组(n=22)和对照组(n=20)的研究对象进行肺功能指标测定,采用Real-time PCR和Western blotting法检测3组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1αmRNA和蛋白表达,并分析Sirt-1和Hif-1α表达水平与肺功能的关系。结果:与对照组比较,COPD急性加重期组、COPD稳定期组患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV1/FVC%)均降低(P<0.05);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期组患者FEV1%和FEV1/FVC%降低(P<0.05)。COPD急性加重期组、COPD稳定期组患者PBMCs中Sirt-1mRNA和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05或P<0.01);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期患者PBMCs中Sirt-1mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01);与对照组比较,COPD患者Hif-1αmRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),COPD急性加重期患者其表达水平升高更明显(P<0.01);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期组患者PBMSCs中Hif-1αmRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。Pearson直线相关法分析,Sirt-1mRNA(蛋白)表达水平与患者FEV1%(rmRNA=0.61,r蛋白=0.545)和FEV1/FVC%(rmRNA=0.513,r蛋白=0.491)呈正相关关系,Hif-1αmRNA(蛋白)表达水平与FEV1%(rmRNA=-0.812,r蛋白=-0.781)和FEV1/FVC%(rmRNA=-0.661,r蛋白=-0.674)呈负相关关系(P<0.05)。结论:COPD患者PBMCs中Sirt-1基因表达水平下降,Hif-1α基因表达水平上调,二者的表达变化可能与COPD的发生发展密切相关。; 关键词沉默信息调节子缺氧诱导因子1 慢性阻塞性肺疾病外周血单个核细胞; Keywords silent information regulator 1 hypoxia-inducible factor 1α chronic obstructive pulmonary disease peripheral blood mononuclear cells; 分类号 R563 [医药卫生—呼吸系统]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名X射线辐照引起GC1小鼠精原细胞凋亡诱导因子核转位并诱导其凋亡被引量：1: 4; 作者杨慧莹丁敬宾王志军丁娟夏新舍赵薇; 机构宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室宁夏医科大学生物化学与分子生物学系宁夏医科大学总医院肿瘤医院宁夏医科大学生理学系; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期357-361,共5页; 基金国家自然科学基金(81460478) 宁夏教育厅优青项目(NGY2015095); 文摘目的研究X射线辐照后GC1小鼠精原细胞凋亡诱导因子(AIF)细胞定位的变化。方法 GC1细胞分别给予0、3、6、9 Gy X射线辐照,溴脱氧尿苷(Brd U)掺入实验检测辐照对细胞增殖速率的影响;辐照后48 h,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核凝集情况,免疫荧光细胞化学染色检测胞质及胞核中AIF蛋白定位的变化,Western blot法分析细胞总蛋白、胞质蛋白及核提取物中AIF蛋白的水平。结果随着辐照剂量的增加,GC1细胞增殖速率显著减慢,细胞活性降低。6 Gy X射线辐照后全细胞提取物中AIF蛋白总量变化不大,但细胞核提取物中AIF显著增多,即AIF出现核转位的现象。结论 X射线辐照能够诱导小鼠精原细胞发生凋亡,该过程中伴有AIF入核的现象。; 关键词凋亡诱导因子细胞凋亡 GC1小鼠精原细胞株 X射线; Keywords apoptosis inducing factor（AIF） apoptosis GC1 mouse sperm cells X-ray; 分类号 R392.33 [医药卫生—免疫学] R965 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	慢病毒介导的犬WRD细胞p53基因沉默及稳定感染细胞系的建立	李芳闫琰张茜李建宁姚青高玉婧杨怡孙玉宁	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1表达并降低MMP-9及HIF-1α表达	朱燕妮孙玉宁关文霞闫琰张薇白鲁根孔海涛李芳	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Sirt-1和Hif-1α在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中的表达及其意义	李芳关文霞任飞仝雪霞孙玉宁	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2015	11	在线阅读下载PDF 职称材料
4	X射线辐照引起GC1小鼠精原细胞凋亡诱导因子核转位并诱导其凋亡	杨慧莹丁敬宾王志军丁娟夏新舍赵薇	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料