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LncRNA PXN-AS1对胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响 被引量:1
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作者 刘刚 刘东涛 +2 位作者 赵伟 何涛 张媛 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第3期430-439,共10页
目的 探讨LncRNA PXN-AS1(简称PXN-AS1)在胃癌组织中的表达水平及其对胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并阐述其可能的调控机制。方法 收集43例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织,采用qRT-PCR法检测胃癌组织中PXN-AS1和miR-125a-5p表达水平... 目的 探讨LncRNA PXN-AS1(简称PXN-AS1)在胃癌组织中的表达水平及其对胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,并阐述其可能的调控机制。方法 收集43例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织,采用qRT-PCR法检测胃癌组织中PXN-AS1和miR-125a-5p表达水平,并分析PXN-AS1表达水平与胃癌患者临床病理参数的关系;采用Pearson法分析胃癌组织PXN-AS1和miR-125a-5p的相关性。将PXN-AS1 siRNA质粒(si-PXN-AS1)及阴性对照质粒(si-NC)与miR-125a-5p inhibitor(inhibitor)及阴性对照miRNA抑制剂(inhibitor NC)分别或同时共转染至HGC-27细胞中,分为si-NC组、si-PXN-AS1组、si-PXN-AS1+inhibitor NC组、si-PXN-AS1+inhibitor组,另设立空白对照组(blank组)。采用qRT-PCR法检测各组细胞中PXN-AS1和miR-125a-5p表达水平;CCK-8法检测各组细胞的增殖水平;EdU实验检测各组细胞增殖情况;Transwell实验检测各组细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测各组细胞的凋亡水平;双荧光素酶报告基因系统验证PXN-AS1海绵吸附miR-125a-5p并调控其表达水平。应用生物信息学筛选miR-125a-5p下游靶基因,并进行GO和KEGG富集分析。结果 与癌旁组织比较,胃癌组织中PXN-AS1表达水平明显升高,而miR-125a-5p表达水平明显降低(均P<0.05),PXN-AS1和miR-125a-5p呈负相关(r=-0.452,P=0.002)。此外,PXN-AS1高表达的胃癌患者淋巴结转移阳性和低分化比例明显增高(均P<0.05)。与blank组和si-NC组比较,si-PXN-AS1组HGC-27细胞中PXN-AS1表达水平、细胞增殖能力、细胞迁移和侵袭数量明显降低(均P<0.05),而细胞凋亡水平明显升高(P<0.05)。双荧光素酶报告系统结果显示,在HGC-27细胞中PXN-AS1特异性吸附miR-125a-5p。敲低miR-125a-5p可逆转沉默PXN-AS1对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,对细胞凋亡的促进作用。生信分析结果显示,miR-125a-5p的下游靶基因可以参与多种生物过程,包括DNA损伤、T细胞凋亡和分化、RNA代谢合成过程及信号转导。此外,其还参与HIF-1信号通路、JAK-STAT信号通路以及细胞凋亡等信号通路。结论 PXN-AS1在胃癌中表达上调,并且作为miR-125a-5p的竞争性海绵,促进胃癌细胞HGC-27的增殖、迁移和侵袭能力,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 LncRNA PXN-AS1 胃癌 增殖 迁移和侵袭 PXN-AS1/miR-125a-5p轴
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表达CD40配体的溶瘤痘苗病毒(CD40L-VV)抑制结直肠癌细胞生长并增强荷瘤小鼠T细胞抗肿瘤活性 被引量:5
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作者 刘东涛 马俊文 +1 位作者 丁波 周海宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期602-607,共6页
目的探索表达CD40配体的溶瘤痘苗病毒(CD40L-VV)对结直肠癌的抗肿瘤活性。方法通过将CD40L的基因序列整合至VV的DNA骨架中,获得CD40L-VV。通过体外感染肿瘤细胞,验证其溶瘤活性及检测CD40L的表达情况。利用CD40L-VV和单纯VV对结直肠癌... 目的探索表达CD40配体的溶瘤痘苗病毒(CD40L-VV)对结直肠癌的抗肿瘤活性。方法通过将CD40L的基因序列整合至VV的DNA骨架中,获得CD40L-VV。通过体外感染肿瘤细胞,验证其溶瘤活性及检测CD40L的表达情况。利用CD40L-VV和单纯VV对结直肠癌移植瘤模型进行治疗后,监测肿瘤生长状况,并通过流式细胞术分析肿瘤浸润T细胞的表型,细胞因子分泌水平及增殖活性来反映CD40L-VV的抗肿瘤活性。结果 CD40L-VV可有效感染肿瘤细胞并表达CD40L,细胞存活实验表明VV及CD40L-VV对肿瘤细胞存在剂量依赖的裂解能力。体内移植瘤实验结果显示,CD40L-VV较VV抑制肿瘤生长的能力更强,与VV治疗组相比,CD40L-VV治疗组肿瘤浸润T细胞具有更强的细胞因子分泌能力,更强的增殖活性及更多的记忆细胞表型。结论工程化CD40L-VV可以显著抑制结直肠癌细胞生长,增强体内T细胞的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 结直肠癌 溶瘤痘苗病毒(VV) 免疫疗法 CD40配体(CD40L)
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miR-153-3p通过靶向FZD3调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭与迁移 被引量:5
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作者 张曹 何亚琴 +1 位作者 钱海权 叶晶晶 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期885-892,共8页
目的:探讨miR-153-3p对胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制。方法:收集2018年5月至2020年6月宁夏医科大学总医院收治的60例胃癌患者的癌和配对癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系NCI-N87、AGS、SNU-5、SGC7901和胃上皮细胞GES-1... 目的:探讨miR-153-3p对胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制。方法:收集2018年5月至2020年6月宁夏医科大学总医院收治的60例胃癌患者的癌和配对癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系NCI-N87、AGS、SNU-5、SGC7901和胃上皮细胞GES-1,qPCR法检测miR-153-3p在胃癌组织与细胞中的表达水平。将miR-153-3p mimic及mimic对照序列转染至SGC7901细胞,用CCK-8、克隆形成、流式细胞术、TUNEL、Transwell和划痕愈合实验分别检测上调miR-153-3p对SGC7901细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。构建裸鼠SGC7901细胞移植瘤模型,观察miR-153-3p对肿瘤生长的影响。通过生物信息学数据库和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-153-3p与FZD3靶向关系,WB法检测miR-153-3p对FZD3蛋白及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达的影响。结果:miR-153-3p在胃癌组织和细胞中表达水平分别显著低于癌旁组织和GES-1细胞(均P<0.01),以SGC7901细胞中表达水平最低。上调miR-153-3p显著抑制SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并提高细胞凋亡率(均P<0.01),同时上调细胞中E-cadherin表达而下调N-cadherin、MMP2和MMP9表达(均P<0.01)。在体内实验表明,静脉注射miR-153-3p mimic显著降低移植瘤体积和瘤组织中Ki-67表达而上调P57表达(均P<0.01)。机制分析表明,miR-153-3p靶向结合FZD3基因的3′UTR区域,上调miR-153-3p会抑制FZD3表达并上调β-catenin、TCF-4和cyclin D1水平(均P<0.01)。结论:miR-153-3p靶向FZD3并通过Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 miR-153-3p FZD3基因 胃癌 SGC7901细胞 增殖 侵袭 迁移 WNT/Β-CATENIN信号通路
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雪貂食管的形态学及其分子标记物的表达谱 被引量:1
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作者 李博 王磊 +1 位作者 赵伟 范玉涵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期428-435,共8页
目的分析雪貂食管形态学及分子表达,探讨其作为人食管疾病动物模型的可行性。方法取生长期为6~8月成年雪貂食管和出生1 d、3 d、5 d、1周和2周幼年雪貂食管各5只于宁夏医科大学总医院病理科制成冷冻切片、包埋石蜡组织。通过苏木精-伊... 目的分析雪貂食管形态学及分子表达,探讨其作为人食管疾病动物模型的可行性。方法取生长期为6~8月成年雪貂食管和出生1 d、3 d、5 d、1周和2周幼年雪貂食管各5只于宁夏医科大学总医院病理科制成冷冻切片、包埋石蜡组织。通过苏木精-伊红染色法(HE)染色、过碘酸雪夫染色(PAS)对成年雪貂食管粘膜下腺体(SMG)进行形态学分析;Mucin染色检测MUC5B和MUC5AC的表达情况;免疫组化、免疫荧光技术检测细胞角蛋白(CK):CK4、CK5、CK7、CK8、CK14、CK17、CK18、CK19、CK20等相关蛋白在成年雪貂食管上皮细胞中的表达情况;免疫荧光检测LEF1在雪貂食管上皮和食管粘膜下腺中表达情况。结果HE、PAS结果显示,成年雪貂食管粘膜下腺体为食管粘膜肌层下方结缔组织,具有分泌含有粘蛋白粘液的功能;细胞角蛋白在成年雪貂食管不同类型的细胞中呈差异性表达,粘液细胞主要表达CK4,导管细胞表达CK8,上皮细胞表达CK20,其中粘液细胞中细胞角蛋白类型表达最多;Mucin染色结果显示MUC5B、MUC5AC在成年雪貂食管腺体的粘液细胞胞质及腺体管腔内呈阳性表达;粘膜细胞中特异性结合双花扁豆凝集素(DBA)、鸡冠珊瑚树凝集素(ECL)、非偶联西非单叶豆凝集素Ⅰ(GSL Ⅰ)、非偶联西非单叶豆凝集素Ⅱ(GSL Ⅱ)、大豆凝集素(SBA)、他卡林生物化合物凝集素、荆豆凝集素(ULEX)、麦胚凝集素(WGA);导管细胞细胞膜上特异性结合凝集素GSL Ⅰ、GSL Ⅱ,上皮细胞细胞膜凝集素ECL、花生凝集素(PNA)和WGA呈阳性表达;凝集素伴刀豆凝集素(ConA)、红腰果E型凝集素(PHA-E)和红腰果L型凝集素(PHA-L)在浆液细胞胞膜呈阳性表达。免疫荧光结果提示,随着腺体的发育,在雪貂出生后3 d至1周可见到发育腺体中LEF1的表达,当腺体分化成熟时LEF1表达消失。将第1天至第7天龄雪貂食管腺体中LEF1表达强度与两周龄的雪貂食管腺体中荧光强度相比,差异有统计学意义(P<0.001)。结论雪貂食管与人类食管组织具有相似的结构和部分共同标记物,尤其是与人类相似的食管粘膜下腺体,未来可将雪貂作为人食管疾病动物模型的选择之一。 展开更多
关键词 动物模型 雪貂 粘膜下腺体 形态学分析 分子表达
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