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宁夏回族代谢综合征与脂联素水平及基因多态性的相关性研究 被引量:4
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作者 沈佳 武海亮 +4 位作者 刘雅娟 曹相原 马晓薇 荆忻 杨锐英 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期7-10,共4页
目的探讨脂联素水平及其单核苷酸多态性(SNP+45T/G和SNP+276G/T)2个位点与宁夏回族代谢综合征(MS)的关系。方法选择祖居宁夏、无亲缘关系、3代内无异族通婚史的回族个体共305例,分为MS组207例和对照组98例;应用ELISA及PCR-RFLP技术检测... 目的探讨脂联素水平及其单核苷酸多态性(SNP+45T/G和SNP+276G/T)2个位点与宁夏回族代谢综合征(MS)的关系。方法选择祖居宁夏、无亲缘关系、3代内无异族通婚史的回族个体共305例,分为MS组207例和对照组98例;应用ELISA及PCR-RFLP技术检测血浆脂联素水平及其2个位点的SNP。结果与对照组比较,MS组体重指数、腰臀比、收缩压、舒张压、空腹血糖、空腹胰岛素、TG、LDL-C、胰岛素抵抗指数明显升高,TC、HDL-C、脂联素水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,MS组SNP+45位点TG+GG基因型和G等位基因频率明显升高,TT基因型及T等位基因频率明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。多因素逐步logistic回归分析显示,SNP+45T/G基因多态性是回族MS的危险因素。结论回族MS患者脂联素水平下降,回族人群中携带SNP+45G等位基因者患MS的风险增加。 展开更多
关键词 代谢疾病 脂联素 多态性 单核苷酸 胆固醇 LDL 血糖 基因型 等位基因
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脂多糖诱导人肺血管内皮细胞骨架重构及相关miRNA谱分析
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作者 吕玉珍 喻文琴 +3 位作者 杨宇璐 薛小兰 马海滨 马晓薇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期592-598,共7页
目的 探讨脂多糖(LPS)对人肺血管内皮细胞(HPVEC)骨架的影响及相关差异表达微小RNA(miRNA)谱的生物学分析。方法 通过显微镜观察HPVEC形态,异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-phalloidin)染色实验观察细胞骨架、免疫荧光细胞化学染色... 目的 探讨脂多糖(LPS)对人肺血管内皮细胞(HPVEC)骨架的影响及相关差异表达微小RNA(miRNA)谱的生物学分析。方法 通过显微镜观察HPVEC形态,异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-phalloidin)染色实验观察细胞骨架、免疫荧光细胞化学染色检测血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)表达,小管生成实验检测血管生成能力,细胞迁移实验检测细胞迁移能力,JC-1线粒体膜电位检测确定细胞凋亡情况。采用高通量测序检测miRNA表达的变化,筛选出差异表达显著的miRNA,利用预测miRNA靶标基因的软件miRanda和预测miRNA结合位点的软件TargetScan进行靶基因预测,用基因本体论(GO)数据库和京都基因和基因组百科全书(KEGG)数据库对靶基因进行功能富集,进一步对与HPVEC损伤明显相关的miRNA进行生物学分析。结果 LPS诱导HPVEC损伤后形态变圆,细胞骨架完整性破坏,VE-cadherin表达下降,血管形成及迁移能力下降,凋亡增加,测序结果发现差异miRNA共229个,其中上调表达84个,下调表达145个,对这些差异miRNA进行靶基因预测及功能富集分析发现其主要富集于细胞连接及骨架调节、细胞黏附过程、炎症相关通路等通路。结论 在ALI体外模型中,多个miRNA协同参与HPVEC骨架重构、屏障功能降低、血管生成、迁移及凋亡等过程。 展开更多
关键词 人肺血管内皮细胞(HPVEC) 脂多糖(LPS) 屏障功能 微小RNA(miRNA)
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人胎盘间充质干细胞来源的外泌体通过增强细胞自噬减轻脂多糖诱导的肺血管内皮细胞损伤 被引量:3
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作者 李晓国 徐明均 +3 位作者 马晨 吕玉珍 马晓娜 马晓薇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期225-232,共8页
目的探讨人胎盘间充质干细胞来源的外泌体(hPMSC-exs)对脂多糖(LPS)诱导的人肺微血管内皮细胞(HPMEC)损伤的影响及可能的机制。方法体外扩增培养hPMSC,收集细胞培养上清,ExoQuick外泌体提取和纯化试剂盒分离、纯化上清液中hPMSC-exs。... 目的探讨人胎盘间充质干细胞来源的外泌体(hPMSC-exs)对脂多糖(LPS)诱导的人肺微血管内皮细胞(HPMEC)损伤的影响及可能的机制。方法体外扩增培养hPMSC,收集细胞培养上清,ExoQuick外泌体提取和纯化试剂盒分离、纯化上清液中hPMSC-exs。透射电镜观察外泌体形态特征,Western blot法检测外泌体表面特异性标志物CD9、CD63的表达。构建hPMSC与HPMEC非接触共培养体系,实验分为对照组、LPS损伤组、hPMSC组和hPMSC-exs组。共培养12 h后,检测各组上室渗透到下室中的异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)荧光强度以确定单层肺血管内皮的通透性;1,1′-十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚羰花青高氯酸酯(DiI)标记hPMSC-exs并在荧光显微镜下观察对损伤内皮的迁移作用;CCK-8法检测各组上室细胞增殖水平;线粒体膜电位检测试剂盒检测各组上室内皮细胞线粒体膜电位;Western blot法检测下室HPMEC自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、beclin-1的蛋白表达。结果获得的hPMSC-exs直径在30~120 nm,CD9、CD63表达阳性,符合hPMSC-exs表型特征;与LPS损伤组相比,hPMSC组及hPMSC-exs组FITC-dextran荧光强度值降低,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值增加、beclin-1蛋白表达上调,细胞增殖率提高。与hPMSC组相比,hPMSC-exs组荧光显微镜下内皮细胞间连接大致完整、FITC-dextran荧光强度值、内皮细胞增殖率、线粒体膜电位、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及beclin-1表达水平均无明显变化。结论hPMSC-exs可减轻LPS诱导的HPMEC损伤,改善细胞内线粒体功能,其作用机制可能与增加HPMEC自噬有关。 展开更多
关键词 人胎盘间充质干细胞(hPMSC) 外泌体 人肺微血管内皮细胞(HPMEC) 线粒体 自噬
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人参皂苷Rg1对脓毒症所致心肌损伤大鼠NF-κB磷酸化水平及炎症相关通路的影响 被引量:10
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作者 荆忻 胡文 +3 位作者 沈佳 罗彩琴 杨波 荆忱 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2318-2325,共8页
目的:探究人参皂苷Rg1对脓毒症所致心肌损伤大鼠核因子-κB(NF-κB)磷酸化水平及炎症相关通路的影响。方法:盲肠结扎穿孔法(CLP)构建大鼠脓毒症心肌损伤模型,60只大鼠随机分为假手术(sham)组、CLP组、人参皂苷Rg1低剂量(CLP+Rg1_(L))组... 目的:探究人参皂苷Rg1对脓毒症所致心肌损伤大鼠核因子-κB(NF-κB)磷酸化水平及炎症相关通路的影响。方法:盲肠结扎穿孔法(CLP)构建大鼠脓毒症心肌损伤模型,60只大鼠随机分为假手术(sham)组、CLP组、人参皂苷Rg1低剂量(CLP+Rg1_(L))组、人参皂苷Rg1中剂量(CLP+Rg1_(M))组、人参皂苷Rg1高剂量(CLP+Rg1_(H))组、瑞沙托维(CLP+TAK-242)组,每组10只。LPS构建体外脓毒症心肌细胞模型,H9C2细胞分为对照(control)组、LPS组、LPS+Rg1_(L)组、LPS+Rg1_(M)组、LPS+Rg1_(H)组、LPS+TAK-242组。右颈总动脉插管法检测各组大鼠平均动脉压(MABP)、心率×左心室发展压(LVDP×HR)、左心室压力最大上升/下降速率(±dp/dt_(max))水平;HE染色观察心肌组织病理学改变;Annexin V-FITC/PI双染法检测心肌组织和H9C2细胞凋亡;ELISA检测大鼠血清和H9C2细胞肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-1β含量;CCK-8及EdU染色检测H9C2细胞增殖能力;RT-qPCR检测心肌组织Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)mRNA表达;Western blot检测心肌组织TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65、p38MAPK、p-p38MAPK、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达。结果:人参皂苷Rg1能够提高MABP、LVDP×HR、±dp/dt_(max)水平,降低CK、LDH、AST活力,降低cTnⅠ、TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4、NF-κB p65、p38MAPK mRNA与TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38MAPK/p38MAPK、NLRP3蛋白水平(P<0.05),促进心肌细胞增殖,抑制细胞凋亡与炎症水平,改善心肌损伤。结论:人参皂苷Rg1能够抑制心肌组织细胞凋亡及炎症水平,提高心功能,从而减轻脓毒症所致心肌损伤,其机制可能与TLR4/NF-κB、p38MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 脓毒症 心肌损伤 核因子-κB P38丝裂原活化蛋白激酶 炎症
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