miR-21通过调节骨髓基质细胞分化促进大鼠坐骨神经的损伤修复

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作者 魏财鸿 刘玉梅 +2 位作者 王贺颖 李军平 贾桦 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第4期477-485,共9页

目的:探讨转染miR-21的骨髓基质细胞(BMSCs)对大鼠坐骨神经损伤的修复机制。方法:体外采用miR-21激动剂(agomir-21)或阻断剂(antagomir-21)及各自的空载体分别转染大鼠BMSCs,将其分为Control组、agomir-21组、agomir-NC组、antagomir-2... 目的:探讨转染miR-21的骨髓基质细胞(BMSCs)对大鼠坐骨神经损伤的修复机制。方法:体外采用miR-21激动剂(agomir-21)或阻断剂(antagomir-21)及各自的空载体分别转染大鼠BMSCs,将其分为Control组、agomir-21组、agomir-NC组、antagomir-21组和antagomir-NC组。制备12 mm含脱细胞神经区域的大鼠坐骨神经损伤模型,将各组细胞用Hoechst33342标记后植入脱细胞神经区域。术后14 d,采用足迹实验、腓肠肌湿重比率测定评价神经运动功能恢复情况;应用免疫荧光染色检测再生神经内神经丝蛋白200(NF200)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、S100钙结合蛋白β(S100β)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:与Control组相比,agomir-21组坐骨神经功能指数(SFI)、腓肠肌湿重比显著增加(P<0.05);再生神经纤维密度增高、髓鞘标志蛋白表达增加,且BMSCs分化为施万细胞样细胞(SCLCs)的比率显著增加(P<0.05)。结论:miR-21通过提高BMSCs体内向SCLCs分化,显著促进周围神经再生。 展开更多

关键词 MIR-21 骨髓基质细胞 周围神经损伤 施万细胞样细胞 分化 大鼠

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S100β基因修饰的大鼠嗅鞘细胞与脱细胞异种神经桥接体共培养体系的生物学特性研究 被引量：1

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作者 梁雪云 段昉 +3 位作者 王贺颖 贾桦 牛建国 何仲义 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期127-133,共7页

目的:通过观察S100β基因修饰的SD乳鼠嗅鞘细胞(OECs)在脱细胞异种神经桥接体(ANX)的黏附情况及分泌功能,研究S100β修饰的OECs与ANX共培养体系的生物学特性。方法:用表达S100β的重组慢病毒感染SD乳鼠的OECs (S100β-OECs),利用流式细... 目的:通过观察S100β基因修饰的SD乳鼠嗅鞘细胞(OECs)在脱细胞异种神经桥接体(ANX)的黏附情况及分泌功能,研究S100β修饰的OECs与ANX共培养体系的生物学特性。方法:用表达S100β的重组慢病毒感染SD乳鼠的OECs (S100β-OECs),利用流式细胞术检测细胞的感染效率;将感染成功的细胞注入通过化学萃取法制作的ANX内,通过扫描电镜及免疫荧光染色法观察各组OECs的黏附情况及分泌功能。结果:GFPOECs及S100β-OECs的感染效率分别为(73. 10±2. 69)%和(73. 50±4. 59)%;通过扫描电镜观察到ANX内原有细胞主要结构基本完全去除,仅保留了细胞的的基膜结构,GFP-OECs及S100β-OECs在ANX内沿基膜纵轴方向聚集生长;免疫荧光染色结果发现,生长在ANX上的OECs、GFP-OECs、S100β-OECs均表达NGF、BDNF等神经营养因子,且S100β-OECs组S100β蛋白表达高于其他两组(P <0. 05)。结论:S100β-OECs可稳定的过表达S100β蛋白,在S100β-OECs与ANX共培养体系中,S100β-OECs与ANX的生物相容性良好。 展开更多

关键词 S100Β 嗅鞘细胞 脱细胞异种神经桥接体 共培养

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慢病毒感染稳定过表达A2bAR基因的大鼠少突胶质前体细胞系的建立

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作者 陈小江 孙金萍 +5 位作者 刘娟 贺育青 尚彤 邵钰 秦毅 马全瑞 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期549-554,共6页

目的:旨在构建稳定高表达腺苷受体A2b(adenosine recepbor A2b,A2b AR)的SD大鼠少突胶质前体细胞体系(oligodendrocyte precursor cells,OPC),用于进一步探讨OPC上A2b AR的相关功能。方法:取对数生长期的大鼠OPC,用携带A2b AR基因的慢... 目的:旨在构建稳定高表达腺苷受体A2b(adenosine recepbor A2b,A2b AR)的SD大鼠少突胶质前体细胞体系(oligodendrocyte precursor cells,OPC),用于进一步探讨OPC上A2b AR的相关功能。方法:取对数生长期的大鼠OPC,用携带A2b AR基因的慢病毒进行感染,嘌呤霉素进行筛选纯化,依照慢病毒载体中的荧光标签蛋白,通过荧光显微镜和Western Blot检测OPC上A2b AR的表达。结果:慢病毒感染后,具有绿色荧光的OPC细胞比例不足5%,在给予嘌呤霉素连续处理6 d后,具有荧光标记的OPC比例趋于稳定,去除嘌呤霉素的干预后,细胞增殖明显,经传代培养,具有荧光标记的OPC比例高于80%,Western Blot结果显示A2b AR的表达明显上调。获得较高纯度的携带A2b AR高表达基因的OPC,可以冻存、复苏以及传代。结论:采用携带A2b AR基因的慢病毒载体,可以成功感染SD大鼠OPC,构建高表达A2b AR的OPC体系,为A2b AR在髓鞘发育与修复等方面的研究奠定基础。 展开更多

关键词 腺苷受体A2b 少突胶质前体细胞 慢病毒 大鼠

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枸杞多糖通过增强自噬抑制饥饿诱导的施万细胞凋亡

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作者 刘玉梅 王贺颖 +3 位作者 魏财鸿 王进娟 李军平 贾桦 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期16-24,共9页

目的:探讨枸杞多糖(LBP)抑制施万细胞(SCs)凋亡的作用及相关机制。方法:RSC96细胞饥饿处理12 h制备自噬模型,Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、p62的表达;采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒筛选出LBP作用的最佳浓度。将RSC96细胞... 目的:探讨枸杞多糖(LBP)抑制施万细胞(SCs)凋亡的作用及相关机制。方法:RSC96细胞饥饿处理12 h制备自噬模型,Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、p62的表达;采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒筛选出LBP作用的最佳浓度。将RSC96细胞随机分为正常组(Control)、饥饿组(Starvation)、Starvation+LBP组,Western Blot或免疫荧光染色检测细胞自噬相关蛋白(LC3、p62)以及髓鞘相关蛋白(p75NTR、PMP22、S100β)的表达;采用Annexin V/PI荧光染色检测细胞的凋亡情况;应用流式细胞术分析细胞周期;Western Blot分析通路蛋白Erk1/2、Akt的磷酸化水平。结果:CCK8结果显示,LBP为300μg/ml时受损RSC96细胞活力最佳。与Control组相比,Starvation组LC3-II/LC3-I水平显著增高(P<0.05)。与Starvation组相比,Starvation+LBP组的凋亡和坏死细胞比例显著降低,处于S期和G2/M期的细胞比例升高;LC3-II、p75NTR、PMP22、S100β蛋白表达量增高,自噬底物蛋白p62的表达量降低;通路蛋白p-Erk1/2表达量增高(P<0.05),而p-Akt蛋白表达量略有下降。结论:LBP可通过增强细胞自噬抑制SCs凋亡,促进髓鞘相关蛋白的表达,其机制与Erk1/2激活和/或Akt抑制有关。 展开更多

关键词 枸杞多糖 施万细胞 自噬 凋亡 大鼠

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肌苷通过调节星形胶质细胞改善孕期感染导致的子代大鼠白质损伤

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作者 韩勇 李鑫 +2 位作者 陈瑾 孙金萍 马全瑞 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期421-428,共8页

目的:探讨肌苷预处理妊娠期大鼠对母体炎症介导子代脑室周围白质软化(PVL)模型星形胶质细胞(Ast)反应的作用。方法:将妊娠期大鼠随机分为Control组、PVL组、IN-PVL组。PVL组:孕17 d(E17)大鼠腹腔注射细菌脂多糖(350μg/kg)2 d;IN-PVL组... 目的:探讨肌苷预处理妊娠期大鼠对母体炎症介导子代脑室周围白质软化(PVL)模型星形胶质细胞(Ast)反应的作用。方法:将妊娠期大鼠随机分为Control组、PVL组、IN-PVL组。PVL组:孕17 d(E17)大鼠腹腔注射细菌脂多糖(350μg/kg)2 d;IN-PVL组:E1大鼠饮用肌苷溶液(1 mg/ml,25 ml/d)16 d后腹腔注射细菌脂多糖2 d。取各组妊娠大鼠的新生7 d仔鼠脑组织,免疫荧光染色或Western Blot检测髓鞘碱性蛋白(MBP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、补体C3(C3)、S100钙结合蛋白A10(S100A10)、血小板源性生长因子(PDGF)、趋化因子配体1(CXCL1)和连接蛋白43(Cx43)的蛋白表达。结果:PVL组仔鼠较Control组髓鞘蛋白MBP着色面积减少、胞体肥大的Ast明显增多。而且,与Control组相比较,PVL组的促炎因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)、GFAP、A1型Ast标记物C3及Ast连接蛋白Cx43的蛋白表达明显升高(P<0.05),抑炎因子(IL-4、IL-10)、MBP、A2型Ast标记物S100A10、Ast分泌产物(PDGF、CXCL1)的蛋白表达反而显著降低(P<0.05)。肌苷预处理可明显反转上述蛋白的表达(P<0.05)。结论:肌苷预处理妊娠大鼠可通过调控Ast反应性和促髓鞘形成物质的分泌改善子代PVL新生大鼠脑低髓鞘化。 展开更多

关键词 肌苷 脑室周围白质软化 髓鞘 星形胶质细胞 大鼠

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大鼠侧脑室置管装置和置管固定方法的改良

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作者 何龙 吴花果 +3 位作者 刘澍玮 李则龙 朱颖 张莲香 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期739-746,共8页

目的:改良一种对大鼠脑损伤小、应激期短、可延时给药或采集脑脊液的侧脑室置管装置和固定方法。方法:健康成年雄性SD大鼠分为常规方法组、改良方法组和对照组。常规方法组用市售带内芯的套管针置管,用牙科水泥将套管针和固定螺钉固定... 目的:改良一种对大鼠脑损伤小、应激期短、可延时给药或采集脑脊液的侧脑室置管装置和固定方法。方法:健康成年雄性SD大鼠分为常规方法组、改良方法组和对照组。常规方法组用市售带内芯的套管针置管,用牙科水泥将套管针和固定螺钉固定于颅骨;改良方法组用改良的置管装置和固定方法;对照组不做任何处理。在置管装置置入第4和7 d分别用热刺痛实验和足迹实验检测大鼠的感觉和运动功能;置管第7 d取材,用HE染色观察针道周围组织损伤和炎症反应;用免疫荧光染色检测置管针道附近Iba-1表达的变化。结果:改良方法组大鼠的感觉和运动功能损伤均轻于常规方法组(P<0.01);HE染色结果显示改良方法组的针道明显较常规方法组窄;免疫荧光染色结果显示常规方法组针道附近组织Iba-1免疫荧光染色阳性细胞明显多于改良方法组(P<0.05)。结论:本文改良的侧脑室置管装置和固定方法对大鼠脑损伤小、应激期短,可用于延时性侧脑室给药或采集脑脊液。 展开更多

关键词 侧脑室 置管装置 置管固定方法 大鼠

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卵巢移植对去势大鼠海马神经元形态及BDNF表达的影响 被引量：8

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作者 孔斌 刘芳 +4 位作者 张文华 黑常春 张焱 王燕蓉 赵承军 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期273-277,共5页

目的:观察卵巢移植后大鼠海马神经元形态变化及BDNF的表达,评价卵巢移植对海马神经元的保护效果。方法:制作去势SD大鼠模型,卵巢移植干预组在其肾被膜下移植出生3 d内的SD乳鼠卵巢,外源性激素干预组隔天给予腹腔注射乙烯雌酚1 mg/kg。... 目的:观察卵巢移植后大鼠海马神经元形态变化及BDNF的表达,评价卵巢移植对海马神经元的保护效果。方法:制作去势SD大鼠模型,卵巢移植干预组在其肾被膜下移植出生3 d内的SD乳鼠卵巢,外源性激素干预组隔天给予腹腔注射乙烯雌酚1 mg/kg。分别于干预后的4、7、14和28 d,电镜观察海马神经元形态及免疫组化观察BDNF的表达情况。结果:卵巢移植后随着移植时间的延长血清雌激素和孕酮水平都逐步升高,乙烯雌酚组仅雌激素水平升高;各组海马神经元形态逐渐好转,移植14 d和28 d组海马神经元的形态改善优于同期给药组。卵巢移植组和乙烯雌酚组BDNF的表达在各区均有所升高,卵巢移植14 d和28 d组CA3区尤为明显(P<0.05)。结论:卵巢移植可以恢复卵巢内分泌功能,对海马神经元形态有改善作用及促进BDNF的表达,其神经元保护作用优于单纯乙烯雌酚干预组。 展开更多

关键词 卵巢移植 去势 BDNF 海马神经元 大鼠

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缓释血管内皮生长因子的透明质酸水凝胶对大鼠脑损伤的修复作用 被引量：2

8

作者 文玉军 金鹏飞 +2 位作者 王登科 刘娟 秦毅 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期591-596,共6页

目的:探讨缓释血管内皮生长因子(VEGF)的透明质酸(HA)水凝胶对脑损伤大鼠的修复效果。方法:制备HA水凝胶并在其中添加包封VEGF的聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,形成可缓释VEGF的HA水凝胶复合支架。选用成年SD大鼠制备脑损伤模型,随机... 目的:探讨缓释血管内皮生长因子(VEGF)的透明质酸(HA)水凝胶对脑损伤大鼠的修复效果。方法:制备HA水凝胶并在其中添加包封VEGF的聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,形成可缓释VEGF的HA水凝胶复合支架。选用成年SD大鼠制备脑损伤模型,随机分为3组:将HA复合支架植入大鼠脑损伤区作为实验组(HA+PLGA组);单纯模型组;不添加PLGA微球的HA水凝胶植入作为HA对照组(HA组)。结果:HA水凝胶复合支架呈疏松多孔网状结构,可缓慢释放VEGF至少2周;术后8周大体观察可见HA水凝胶和脑组织整合良好,表面光滑; Nissl染色显示支架材料内有大量神经细胞;免疫荧光染色显示单纯HA支架可减轻脑损伤区胶质瘢痕的形成,缓释VEGF的HA复合支架对胶质瘢痕有更强的抑制作用;半薄切片组织学染色可见复合支架植入区有大量新生的血管,有大量细胞,血管周围可见神经纤维,而在单纯HA移植区血管和细胞较少。结论:缓释VEGF的HA水凝胶可与脑组织较好的整合,抑制胶质瘢痕的形成,诱导血管再生,进而促进大鼠脑损伤后的组织修复。 展开更多

关键词 脑损伤 透明质酸水凝胶 血管内皮生长因子 大鼠

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大鼠中脑导水管周围灰质向下丘脑orexin神经元的纤维投射 被引量：1

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作者 韩怀钦 张博闻 +5 位作者 顾金海 赵奇 和祯泉 任双来 何仲义 牛建国 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期321-327,共7页

目的:明确中脑导水管周围灰质(PAG)神经元调节下丘脑orexin神经元的解剖学基础。方法:首先采用逆行示踪技术,将霍乱毒素B亚单位(CTb)作为逆行示踪剂注射到下丘脑orexin神经元胞体分布的区域,免疫组织化学方法染色观察PAG内CTb逆行标记... 目的:明确中脑导水管周围灰质(PAG)神经元调节下丘脑orexin神经元的解剖学基础。方法:首先采用逆行示踪技术,将霍乱毒素B亚单位(CTb)作为逆行示踪剂注射到下丘脑orexin神经元胞体分布的区域,免疫组织化学方法染色观察PAG内CTb逆行标记细胞的分布特点;接着采用顺行示踪技术和免疫组化相结合的方法,将生物素化葡聚糖胺(BDA)作为顺行示踪剂注射到PAG,观察下丘脑内BDA标记的神经纤维与orexin神经元的重叠分布特点;最后运用免疫电镜技术观察BDA标记轴突终末与orexin神经元之间的突触联系。结果:CTb注射到单侧下丘脑orexin神经元区域后,在PAG观察到大量CTb标记神经元,注射点同侧标记细胞数明显占优,其中PAG外侧区(lPAG)和腹外侧区(vlPAG)可见大量CTb逆标神经元,背外侧区(dlPAG)和背内侧区(dm PAG)可见少量标记神经元;注射点对侧lPAG及vlPAG区域也观察到少量CTb标记神经元。BDA注射到单侧lPAG后,下丘脑内双侧均可观察到BDA标记的神经纤维,但注射点同侧标记神经纤维数量明显占优。BDA标记纤维与orexin神经元胞体在穹窿背侧接近不定带(ZI)的区域(本文中将此区域称作"穹窿上区")形成显著的重叠分布。透射电镜下观察到BDA标记的轴突终末与orexin神经元之间形成突触联系,且多为非对称性类型。结论:lPAG投射到下丘脑的神经纤维在穹窿上区与orexin神经元形成优势重叠分布、并与orexin神经元的胞体或树突形成以非对称性为主的突触联系,提示orexin神经元可能在lPAG的直接支配下发挥其调节觉醒状态、摄食行为等功能。 展开更多

关键词 OREXIN 中脑水管周围灰质 下丘脑 突触联系 大鼠

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黄芪甲苷对氧糖剥夺复氧后星形胶质细胞上TNF-α与AQP-4表达的影响 被引量：1

10

作者 李盟 万志远 +6 位作者 赵剑 陈小江 马全瑞 刘广天 黄辰 文玉军 秦毅 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期732-738,共7页

目的:探索黄芪甲苷(astragaloside IV,ASIV)对氧糖剥夺复氧(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后星形胶质细胞上肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facror-alpha,TNF-α)与水通道蛋-4(aquaporin-4,AQP-4)表达的影响。方法:... 目的:探索黄芪甲苷(astragaloside IV,ASIV)对氧糖剥夺复氧(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后星形胶质细胞上肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facror-alpha,TNF-α)与水通道蛋-4(aquaporin-4,AQP-4)表达的影响。方法:选用第二代第1 d的星形胶质细胞。将星形胶质细胞放入缺氧培养箱(1%O_2、94%N2、5%CO_2),分别干预1、2、3、4 h,复氧24 h后用RT-PCR和Western Blot检测AQP-4和TNF-α的表达情况。将星形胶质细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R+0.001μmol/ml ASIV组、OGD/R+0.01μmol/ml ASIV组,用RT-PCR和免疫荧光检测AQP-4和TNF-α的表达情况。结果:RT-PCR和Western Blot结果显示:氧糖剥夺复氧后AQP-4和TNF-α的表达均增加,且AQP-4在OGD3 h时表达达到高峰,TNF-α在OGD1 h时表达达到高峰(P<0.05);OGD3h+0.001μmol/ml ASIV组和OGD3 h+0.01μmol/ml ASIV组的AQP-4基因表达水平较OGD3 h组相比均明显降低(P<0.05);与OGD3 h组相比,OGD3 h+0.001μmol/ml ASIV组的AQP-4蛋白表达水平明显降低(P<0.05);OGD1 h+0.001μmol/ml ASIV组和OGD1 h+0.01μmol/ml ASIV组的TNF-α基因表达水平与OGD1 h组相比均明显降低(P<0.05);与OGD1 h组相比,OGD1 h+0.001μmol/ml ASIV组的TNF-α蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:氧糖剥夺复氧模型可以诱导星形胶质细胞上TNF-α和AQP-4的表达,且TNF-α的表达先于AQP-4;黄芪甲苷可能是通过下调TNF-α的表达来影响AQP-4的表达,进而影响细胞水肿。 展开更多

关键词 水通道蛋-4 肿瘤坏死因子-α 氧糖剥夺复氧 黄芪甲苷 星形胶质细胞 大鼠

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肌苷对原代培养的少突胶质前体细胞化学性缺氧损伤后存活的作用 被引量：1

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作者 孙金萍 马全瑞 邝芳 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期729-733,共5页

目的:探讨肌苷对化学性缺氧损伤后少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPC)存活的影响。方法:原代培养新生SD大鼠脑皮层OPC,随机分为四个组,即空白对照组、肌苷对照组、鱼藤酮损伤组和肌苷治疗组。肌苷治疗组是在添加肌... 目的:探讨肌苷对化学性缺氧损伤后少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPC)存活的影响。方法:原代培养新生SD大鼠脑皮层OPC,随机分为四个组,即空白对照组、肌苷对照组、鱼藤酮损伤组和肌苷治疗组。肌苷治疗组是在添加肌苷30 min后再用鱼藤酮损伤,24 h后用MTT、PI染色和免疫荧光组织化学染色检测各组细胞吸光值的差异、细胞死亡比率的差异和细胞凋亡比率的差异。结果:与对照组比较,鱼藤酮损伤组的吸光值明显下降(P<0.001)、细胞死亡比率明显增加(P<0.001)但细胞凋亡比率没有差异;与空白对照组比较,10 mmol/L肌苷对照组的的吸光值明显下降(P<0.01);与鱼藤酮损伤组比较不同剂量肌苷治疗组的吸光值、细胞死亡比率和细胞凋亡比率均没有差异。结论:在鱼藤酮介导的化学性缺氧损伤条件下,肌苷对OPC的存活没有明显的保护作用,而且大剂量肌苷还可损伤正常的OPC,提示大剂量肌苷在中枢神经系统损伤后髓鞘的修复过程中可能具有负面作用。 展开更多

关键词 肌苷 少突胶质前体细胞 存活 化学性缺氧损伤 细胞培养 大鼠

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间充质干细胞-透明质酸水凝胶促进脑缺血小鼠的神经修复

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作者 马琳 杨观旭 +5 位作者 袁博 马文倩 李尚宗 兰泽鹏 杜雅琳 文玉军 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第5期556-562,共7页

目的:探讨携带骨髓源间充质干细胞(MSCs)的透明质酸(HA)水凝胶对小鼠脑缺血损伤的修复作用。方法:制备HA水凝胶,培养骨髓源MSCs,将MSCs接种于HA水凝胶上共培养,形成HA-MSCs复合水凝胶;制备小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,2周后分别将HA... 目的:探讨携带骨髓源间充质干细胞(MSCs)的透明质酸(HA)水凝胶对小鼠脑缺血损伤的修复作用。方法:制备HA水凝胶,培养骨髓源MSCs,将MSCs接种于HA水凝胶上共培养,形成HA-MSCs复合水凝胶;制备小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,2周后分别将HA水凝胶、HA-MSCs复合水凝胶植入小鼠脑缺血损伤区,观察MCAO组、HA组、HA-MSCs组小鼠运动功能恢复情况;材料植入8周后将小鼠灌注取脑,观察材料与脑组织整合情况,尼氏染色观察细胞向材料植入区迁移情况,电镜下观察材料植入区神经再生情况。结果:HA水凝胶电镜下呈蜂窝状结构,MSCs形态多样,可在HA水凝胶上粘附生长、增殖;HA-MSCs复合水凝胶植入小鼠脑缺血损伤区4周后可见小鼠前肢运动功能明显恢复(P<0.05);材料植入8周后取材发现植入的材料与脑组织整合良好,尼氏染色显示植入的材料部分降解,有大量细胞向材料植入区迁移、浸润,电镜下可见HA-MSCs植入区有细胞形成连接,有新生的血管和丰富的神经纤维存在。结论:携带MSCs的HA水凝胶可促进小鼠脑缺血后组织修复和运动功能恢复。 展开更多

关键词 脑缺血 透明质酸水凝胶 间充质干细胞 小鼠

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阻断GABAa受体对精神分裂症小鼠认知能力和胼胝体髓鞘超微结构的影响 被引量：5

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作者 尚彤 刘娟 +4 位作者 陈小江 郭丽 邵钰 马全瑞 孙金萍 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期722-726,共5页

目的:探究GABAa受体阻断剂荷包牡丹碱(BIC)对精神分裂症(SP)模型小鼠认知能力和胼胝体髓鞘超微结构的作用。方法:雄性ICR小鼠21只,随机分为对照组、SP组和BIC处理组。连续腹腔注射MK-80114d制备精神分裂症小鼠模型,选取成功制备的小鼠... 目的:探究GABAa受体阻断剂荷包牡丹碱(BIC)对精神分裂症(SP)模型小鼠认知能力和胼胝体髓鞘超微结构的作用。方法:雄性ICR小鼠21只,随机分为对照组、SP组和BIC处理组。连续腹腔注射MK-80114d制备精神分裂症小鼠模型,选取成功制备的小鼠模型并腹腔注射BIC(1mg/kg/d)或者等量的生理盐水7d。利用Morris水迷宫检测小鼠认知能力变化,利用透射电子显微镜技术观察其胼胝体内髓鞘超微结构的改变。结果:小鼠腹腔注射MK-80114d后,定位航行实验结果显示:与对照组相比较,SP组逃避潜伏期时间明显延长(P<0.01),游泳总路程明显增加(P<0.01)。空间探索实验结果显示:与对照组相比较,SP组小鼠经过平台所在位置的次数明显减少(P<0.05)。精神分裂症模型小鼠腹腔注射BIC或生理盐水7d后,定位航行实验和空间探索实验结果显示:对照组与SP组相比较,各参数均无显著性差异(P>0.05);与SP组比较,BIC处理组在平台象限停留时间明显减少(P<0.05)。电镜实验结果显示:对照组小鼠胼胝体髓鞘结构致密、完整、规则,SP组胼胝体髓鞘呈现不同程度的松散、板层分离、崩解等病理改变;与SP组相比较,BIC处理组内髓鞘厚度不均匀、髓鞘轴索分离现象明显增多。结论:腹腔注射MK-801可诱导小鼠的学习记忆能力下降;阻断GABAa受体有增加精神分裂症小鼠记忆力损伤和胼胝体髓鞘超微结构损伤的趋势。 展开更多

关键词 GABAA受体 精神分裂症 荷包牡丹碱 髓鞘 小鼠

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G-CSF对帕金森病小鼠运动能力和黑质纹状体神经元的影响 被引量：3

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作者 张丹丹 张宇新 +3 位作者 张乘云 郭森 崔海鹏 贾桦 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-7,共7页

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中脑黑质致密部(SNpc)及纹状体(STR)多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:正常健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、MPTP组及MPTP+G-CS... 目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中脑黑质致密部(SNpc)及纹状体(STR)多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:正常健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、MPTP组及MPTP+G-CSF组,采用腹腔注射MPTP法制作小鼠PD模型,MPTP+G-CSF组于最后一次MPTP注射后再腹腔注射G-CSF。爬杆实验观察小鼠的行为学改变;尼氏染色技术观察各组小鼠黑质致密部神经元数量及形态学变化;免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)在各组小鼠中脑黑质致密部及纹状体的表达; Western Blot法检测各组小鼠中脑TH蛋白的表达量。结果:与对照组相比,MPTP组小鼠较对照组爬杆用时显著延长(P <0. 05),尼氏染色显示黑质致密部神经元数量显著减少(P <0. 05),黑质致密部、纹状体TH表达量显著减少(P <0. 05); MPTP+G-CSF组较MPTP组爬杆用时显著缩短(P <0. 05),神经元丢失减少(P <0. 05),神经元形态较完整;与MPTP组比较,MPTP+G-CSF组黑质致密部、纹状体TH表达水平显著增高(P <0. 05)。结论:G-CSF能够改善PD小鼠运动功能,减少黑质致密部多巴胺能神经元丢失,增加TH表达水平。 展开更多

关键词 帕金森病 1-甲基4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶 粒细胞集落刺激因子 酪氨酸羟化酶 小鼠

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短暂性脑缺血对C57BL/6小鼠海马区神经发生的影响 被引量：1

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作者 孙文青 姚子昂 +4 位作者 金毅然 马海滨 牛建国 何仲义 梁雪云 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期175-183,共9页

目的:利用小鼠急性全脑缺血模型观察急性脑缺血对海马神经发生的影响。方法:将C57BL/6雄性小鼠(6~8周)随机分为脑缺血组和假手术组。采用双侧颈动脉结扎法建立短暂性全脑缺血模型;利用HE染色观察脑缺血后不同时间(1周,2周)海马区形态学... 目的:利用小鼠急性全脑缺血模型观察急性脑缺血对海马神经发生的影响。方法:将C57BL/6雄性小鼠(6~8周)随机分为脑缺血组和假手术组。采用双侧颈动脉结扎法建立短暂性全脑缺血模型;利用HE染色观察脑缺血后不同时间(1周,2周)海马区形态学变化;采用免疫组织荧光染色观察缺血后海马区caspase-3表达变化;利用Ed U染色观察缺血3 d、7 d、14 d和28 d后,海马区神经干细胞增殖变化;利用免疫组织荧光染色观察缺血3 d、7 d、14 d和28 d后,海马区nestin、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞特异蛋白(OSP)等蛋白表达变化,判断脑缺血对海马区神经干细胞分化的影响。结果:脑缺血7 d后,小鼠海马CA1区神经元数目减少,caspase-3阳性细胞增加(P<0.05)。海马DG区Ed U阳性细胞数量在第3 d开始增加(P<0.05),第1周达到峰值(P<0.05);海马CA1区Ed U阳性细胞数量在缺血后1周开始增加(P<0.05),缺血2周后逐渐降低。海马DG区nestin、GFAP及OSP阳性细胞数量均在缺血3 d后开始增加(P<0.05),缺血1周后达到峰值(P<0.05),2周后逐渐降低。海马CA1区GFAP及OSP阳性细胞数量在缺血3 d后开始增加(P<0.05),缺血1周后达到峰值(P<0.05),2周后逐渐降低。结论:脑缺血激活了海马DG区神经干细胞,使干细胞增殖,并向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化,同时逐渐向CA1区迁移。 展开更多

关键词 脑缺血 神经干细胞 神经发生 海马 神经干细胞分化

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瞬时受体电位M2抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧细胞的保护作用 被引量：1

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作者 黄卓群 余夏飞 +5 位作者 刘星宇 马康 黄敏华 李芳芳 杨巍 牛建国 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期106-112,共7页

目的:探讨瞬时受体电位M2(TRPM2)抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧(OGD/R)细胞模型的保护作用。方法:采用SH-SY5Y细胞系制备OGD/R损伤模型。将细胞随机分为空白对照组、模型对照组和A10组。细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;活性氧检测试剂... 目的:探讨瞬时受体电位M2(TRPM2)抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧(OGD/R)细胞模型的保护作用。方法:采用SH-SY5Y细胞系制备OGD/R损伤模型。将细胞随机分为空白对照组、模型对照组和A10组。细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;活性氧检测试剂盒检测细胞活性氧水平;四甲基罗丹明甲酯法检测线粒体膜电位;一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测凋亡细胞数量;蛋白质印迹法测定cleaved caspase 3蛋白表达。结果:相对于3、20、30、50和100μmol/L,10μmol/L浓度的A10具有较低的细胞毒性及较好的通道活性抑制作用。与模型对照组比较,A10组活性氧水平降低(P<0.05),线粒体膜电位降低程度改善(P<0.05),凋亡细胞数减少(P<0.05),凋亡相关蛋白cleaved caspase 3表达减少(P<0.05)。结论:A10可以通过抑制TRPM2通道功能、减少细胞外钙离子内流、降低细胞活性氧水平、稳定线粒体膜电位水平和减少细胞凋亡缓解OGD/R后细胞的损伤。 展开更多

关键词 瞬时受体电位M2通道 缺糖缺氧/复糖复氧 活性氧 线粒体膜电位 细胞凋亡 Cleaved caspase 3 SH-SY5Y细胞

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CT和MRI诊断儿童先天性耳聋的对比 被引量：3

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作者 海录 孟海霞 +3 位作者 张小羽 彭嘉丽 王峰 张莲香 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2018年第8期1178-1181,共4页

目的对比先天性耳聋患儿的宝石CT和MRI特点。方法回顾性分析60例临床诊断的先天性耳聋患儿的宝石CT及MRI资料,将原始数据传至配套工作站,采用MIP、MRP、VR进行重建,分析两种检查的一致性。结果 CT显示耳部骨性结构具有优势,MRI显示耳部... 目的对比先天性耳聋患儿的宝石CT和MRI特点。方法回顾性分析60例临床诊断的先天性耳聋患儿的宝石CT及MRI资料,将原始数据传至配套工作站,采用MIP、MRP、VR进行重建,分析两种检查的一致性。结果 CT显示耳部骨性结构具有优势,MRI显示耳部神经具有优势。2种检查对于显示乳突炎并大前庭导水管综合征、大前庭导水管综合征及耳蜗半规管畸形的一致性较好(Kappa>0.75),显示半规管狭窄的一致性尚可(Kappa=0.485)。结论CT、MR检查诊断儿童先天性耳聋各有优势,可优势互补,具有重要的临床应用价值。 展开更多

关键词 先天性耳聋 体层摄影术 X线计算机 磁共振成像

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化学遗传学激活乳头体上核神经元增强大鼠学习记忆能力 被引量：1

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作者 孙佳 齐争艳 +4 位作者 马琳 马文倩 牛建国 张莲香 文玉军 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第2期135-141,共7页

目的:探讨乳头体上核(SuM)在大鼠记忆巩固中的作用。方法:将rAAV2/9-CaMKIIa-EGFP注射到大鼠SuM核团,示踪其与海马之间的纤维联系,通过化学遗传学的方法激活SuM核团,即将rAAV2/9-hSyn-hM3D(Gq)-EGFP注射到大鼠SuM,3周后大鼠腹腔注射氯氮... 目的:探讨乳头体上核(SuM)在大鼠记忆巩固中的作用。方法:将rAAV2/9-CaMKIIa-EGFP注射到大鼠SuM核团,示踪其与海马之间的纤维联系,通过化学遗传学的方法激活SuM核团,即将rAAV2/9-hSyn-hM3D(Gq)-EGFP注射到大鼠SuM,3周后大鼠腹腔注射氯氮平-N-氧化物(CNO)激活SuM并检测大鼠在新物体识别实验和水迷宫实验中的表现,最后用免疫荧光染色验证SuM的激活情况。结果:SuM有顺行纤维投射到海马的齿状回(DG)、CA2区、CA3区。激活SuM,大鼠探究新物体的时间增加,更偏爱新物体;实验组大鼠平均逃避潜伏期、找到平台所用时间均低于对照组,实验组大鼠在原平台所在象限探索时间明显多于对照组。结论:SuM与海马存在广泛的纤维联系,激活SuM可以增强大鼠记忆巩固。 展开更多

关键词 乳头体上核 记忆巩固 海马 化学遗传 大鼠

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携带PLGA微球的透明质酸水凝胶对大鼠脊髓损伤的修复作用 被引量：1

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作者 文玉军 马文倩 +4 位作者 牛建国 张莲香 王登科 顾金海 杨勇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2022年第5期530-536,共7页

目的:探讨携带聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)缓释微球的透明质酸(HA)水凝胶对大鼠脊髓损伤(SCI)的修复作用。方法:制备具有纵向多通道结构的HA水凝胶并携带包载血管内皮生长因子(VEGF)的PLGA缓释微球,形成HA复合水凝胶;手术制备大鼠脊髓... 目的:探讨携带聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)缓释微球的透明质酸(HA)水凝胶对大鼠脊髓损伤(SCI)的修复作用。方法:制备具有纵向多通道结构的HA水凝胶并携带包载血管内皮生长因子(VEGF)的PLGA缓释微球,形成HA复合水凝胶;手术制备大鼠脊髓背侧半切模型,将HA复合水凝胶植入大鼠SCI区作为实验组,不植入材料的SCI大鼠模型和单纯HA水凝胶植入作为对照组。应用CatWalk步态分析系统评估大鼠运动功能的恢复情况,应用尼氏染色观察材料植入区神经元迁移浸润情况,天青-美兰染色观察血管及神经纤维再生情况。结果:制备的HA复合水凝胶呈纵向多通道结构,可持续释放VEGF;与模型组、HA组比较,HA复合水凝胶组大鼠后肢运动功能明显恢复;术后8周可见水凝胶材料与脊髓组织整合良好,尼氏染色显示材料内有大量神经元浸润,天青-美兰染色可见HA复合水凝胶植入区有大量新生的血管和神经纤维。结论:携带PLGA缓释微球的HA复合水凝胶与脊髓组织整合良好,可诱导血管和神经纤维再生,并能够促进大鼠脊髓损伤后运动功能恢复。 展开更多

关键词 脊髓损伤 透明质酸水凝胶 聚乳酸聚乙醇酸共聚物 血管内皮生长因子 大鼠

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颞叶癫痫模型大鼠行为及海马突触蛋白的表达变化 被引量：1

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作者 李则龙 刘澍玮 +4 位作者 杨洋 李绿梅 文玉军 牛建国 张莲香 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第4期384-392,共9页

目的:研究颞叶癫痫(TLE)模型大鼠行为及海马突触蛋白的表达变化。方法:将SD大鼠分为对照组(control)和颞叶癫痫组(TLE),用腹腔注射氯化锂和匹罗卡品的方法制备TLE模型,高架十字迷宫和三箱交互实验检测大鼠情绪和社交行为,免疫组织化学... 目的:研究颞叶癫痫(TLE)模型大鼠行为及海马突触蛋白的表达变化。方法:将SD大鼠分为对照组(control)和颞叶癫痫组(TLE),用腹腔注射氯化锂和匹罗卡品的方法制备TLE模型,高架十字迷宫和三箱交互实验检测大鼠情绪和社交行为,免疫组织化学染色和Western Blot检测神经突触素I(Syn1)、突触后致密蛋白95(PSD95)和桥蛋白(gephyrin)的表达特征。结果:与Control组比,TLE组大鼠焦虑样行为增加(P<0.01),社交新颖性下降(P<0.01)。各组大鼠海马区均可见Syn1、PSD95和gephyrin免疫阳性染色,以CA3区的始层和透明层为主。在TLE 1 d~3 d,CA3区三种分子阳性染色较control组略减少(P<0.05,P<0.01),透明层染色渐呈颗粒状。在7 d和14 d三种蛋白免疫阳性染色逐渐升高,28 d再次下降,但均低于control组(P<0.05,P<0.01);透明层PSD95染色呈条带状,Syn1和gephyrin染色呈小片状。Western Blot结果显示:在TLE 1 d~3 d,Syn1、PSD95和gephyrin表达下降(P<0.05,P<0.01);在7 d和14 d表达略升高,28 d表达再次下降,但低于control组(P<0.05)。结论:TLE大鼠社交新颖性下降和焦虑样行为的增加,与海马Syn1、PSD95和gephyrin的表达降低有关。 展开更多

关键词 颞叶癫痫 海马 社交能力 焦虑样行为 突触蛋白 大鼠

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