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hREV3基因对细胞增殖周期的影响被引量：3: 1; 作者徐方李元杰《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1003-1007,共5页; 应用反义阻断REV3基因表达的人胚肾上皮细胞（HEK-293-M-REV3-）来研究人类REV3基因对细胞增殖周期的影响，评价该基因在哺乳类细胞突变形成中的作用，探讨其与肿瘤形成的关系。文章应用流式细胞技术分别对在自发或不同理化诱发条件[（... 展开更多; 关键词 hREV3基因流式细胞技术细胞增殖周期 DNA含量; 在线阅读下载PDF 职称材料

MafA逆转录病毒表达载体的构建及其在肝原始细胞中的稳定表达被引量：1: 2; 作者金彩霞李文林 +1 位作者徐方胡以平《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期465-468,共4页; 目的:构建表达MafA(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A)的逆转录病毒表达载体,并建立稳定表达MafA的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)。方法:通过PCR方法克隆MafA基因全长.将其构建到p... 展开更多; 关键词 MAFA 逆转录病毒载体肝原始细胞系; 在线阅读下载PDF 职称材料

细粒棘球蚴铁蛋白基因的克隆重组高效表达及免疫学初步研究被引量：9: 3; 作者王娅娜丁淑琴 +4 位作者王健张焱王洁王淑静赵巍《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期399-402,406,共5页; 目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus Eg)铁蛋白(ferritin)基因的原核表达重组质粒并表达、纯化该重组蛋白,初步研究其免疫反应。方法将细粒棘球蚴铁蛋白基因亚克隆于表达载体pGEX-6p-1,转化重组体到大肠杆菌Bl21中,在异丙基-β... 展开更多; 关键词细粒棘球蚴铁蛋白基因克隆表达免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究被引量：6: 4; 作者李宗吉黄瑾 +5 位作者张静张焱王洁王淑静高岭赵巍《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期76-79,共4页; 目的构建细粒棘球蚴重组蛋白谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)的表达载体,获得纯化的重组蛋白,并对其免疫学特性进行初步鉴定,为重组疫苗研制的后续工作提供依据。方法从本室已构建的重组质粒GST/pGEM-T中酶切下GST目的片段,亚克隆入表达载体pET... 展开更多; 关键词细粒棘球蚴谷胱甘肽S-转移酶免疫原性免疫印记酶联免疫吸附试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hREV3基因对细胞增殖周期的影响被引量：3: 1; 作者徐方李元杰; 机构宁夏医学院医学遗传学与细胞生物学教研室; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1003-1007,共5页; 基金国家自然科学基金(编号:30560132) 教育部"春晖计划"项目(编号:Z2006-1-75002) +1 种基金宁夏医学院特殊人才启动项目(编号:2005)资助~~; 文摘应用反义阻断REV3基因表达的人胚肾上皮细胞（HEK-293-M-REV3-）来研究人类REV3基因对细胞增殖周期的影响，评价该基因在哺乳类细胞突变形成中的作用，探讨其与肿瘤形成的关系。文章应用流式细胞技术分别对在自发或不同理化诱发条件[（紫外线，UVB）和（甲基甲烷磺酸酯，MMS）]下，对体外培养的HEK-293-M—REV3-细胞进行细胞增殖周期和DNA含量的影响进行检测，并计算细胞的增殖指数。结果显示：自发状态下，HEK-293-M—REV3-细胞与对照组细胞相比S期延长；而UVB和MMS不同理化因素诱导时，HEK-293-M—REV3-细胞的G2-M期或S期比例明显比对照组增加，PI值也相应增加。因此可以推测，当REV3基因低表达时，细胞无论在自发还是诱发情况下突变频率均降低，原因可能与细胞周期的改变有关，进而再引起DNA复制叉阻滞、合成减少，导致细胞死亡或凋亡。; 关键词 hREV3基因流式细胞技术细胞增殖周期 DNA含量; Keywords human REV3 gene flow cytometer cell cycle DNA content; 分类号 R730.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名MafA逆转录病毒表达载体的构建及其在肝原始细胞中的稳定表达被引量：1: 2; 作者金彩霞李文林徐方胡以平; 机构第二军医大学基础部细胞生物学教研室宁夏医学院医学遗传学与细胞生物学教研室; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期465-468,共4页; 基金国家自然科学基金(30600326) 宁夏自然科学基金(NZ0775) 宁夏医学院特殊人才启动基金~~; 文摘目的:构建表达MafA(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A)的逆转录病毒表达载体,并建立稳定表达MafA的肝原始细胞系(liver epithelial progenitor cells,LEPCs)。方法:通过PCR方法克隆MafA基因全长.将其构建到pBMN—Z—IRES-Neo逆转录病毒载体中获得pBMN—MafA—Neo载体;将该载体导入Phoenix包装细胞系,收集病毒上清并感染LEPCs,筛选稳定表达MafA的LEPCs;RT-PCR方法检测MafA表达对LEPCs分子表型的影响。结杲:成功构建pBMN—MafA-Neo载体,并获得稳定表达MafA基因的肝原始细胞系(LEPCs—MafA)。LEPCs-MafA细胞GK和GLUT2基因表达高于LEPCs。结论:成功获得稳定表达MafA的肝原始细胞系,为研究MafA诱导肝干细胞向胰腺细胞转分化奠定了基础。; 关键词 MAFA 逆转录病毒载体肝原始细胞系; Keywords MafA retroviral vector liver progenitor cells; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细粒棘球蚴铁蛋白基因的克隆重组高效表达及免疫学初步研究被引量：9: 3; 作者王娅娜丁淑琴王健张焱王洁王淑静赵巍; 机构宁夏医学院医学遗传学与细胞生物学教研室宁夏医学院中心实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期399-402,406,共5页; 基金国家自然科学基金项目(No:30260105) 宁夏自然科学基金(NZ0540); 文摘目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus Eg)铁蛋白(ferritin)基因的原核表达重组质粒并表达、纯化该重组蛋白,初步研究其免疫反应。方法将细粒棘球蚴铁蛋白基因亚克隆于表达载体pGEX-6p-1,转化重组体到大肠杆菌Bl21中,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达;用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行初步鉴定,用切胶纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,通过Western-blot对该蛋白的免疫学特性进行初步研究。结果重组铁蛋白与GST以融合表达的形式在细菌中高效表达,表达产物为不可溶性的包涵体,蛋白分子量约为42 kD。融合蛋白Egferritin/GST能被细粒棘球蚴免疫的家兔血清和特异性小鼠抗血清所识别,同时特异性小鼠抗血清可识别天然抗原囊液、原头蚴可溶性蛋白中约19 kD的蛋白条带。结论成功地表达细粒棘球蚴重组铁蛋白,并且该蛋白有一定的免疫原性及抗原性。; 关键词细粒棘球蚴铁蛋白基因克隆表达免疫原性; Keywords Echinococcus granulosus ferritin gene cloning expression immunogenicity; 分类号 R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究被引量：6: 4; 作者李宗吉黄瑾张静张焱王洁王淑静高岭赵巍; 机构宁夏医学院医学遗传学与细胞生物学教研室宁夏医学院中心实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期76-79,共4页; 基金国家自然科学基金(30260105) 宁夏自然科学基金(NZ0540); 文摘目的构建细粒棘球蚴重组蛋白谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)的表达载体,获得纯化的重组蛋白,并对其免疫学特性进行初步鉴定,为重组疫苗研制的后续工作提供依据。方法从本室已构建的重组质粒GST/pGEM-T中酶切下GST目的片段,亚克隆入表达载体pET28a,转化入大肠杆菌BL21plys进行融合表达,经His-bind树脂纯化系统小量纯化,得到纯化的重组融合蛋白作为抗原。免疫ICR小鼠,获得抗血清。通过蛋白免疫印迹试验(Western blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组抗原的免疫学特性。结果成功构建具有高效表达能力的基因工程菌株,并纯化了重组蛋白,纯化的重组抗原免疫小鼠的抗血清可识别天然与重组抗原,实验组血清与对照组血清抗体含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组蛋白具有良好的抗原性和免疫原性。; 关键词细粒棘球蚴谷胱甘肽S-转移酶免疫原性免疫印记酶联免疫吸附试验; Keywords Echinococcus granulosas GST immunogenicity Western blot ELISA; 分类号 R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	hREV3基因对细胞增殖周期的影响	徐方李元杰	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	MafA逆转录病毒表达载体的构建及其在肝原始细胞中的稳定表达	金彩霞李文林徐方胡以平	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	细粒棘球蚴铁蛋白基因的克隆重组高效表达及免疫学初步研究	王娅娜丁淑琴王健张焱王洁王淑静赵巍	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	9	在线阅读下载PDF 职称材料
4	细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究	李宗吉黄瑾张静张焱王洁王淑静高岭赵巍	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	6	在线阅读下载PDF 职称材料