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细粒棘球蚴铁蛋白基因的克隆重组高效表达及免疫学初步研究
被引量：
9
1
作者
王娅娜
丁淑琴
+4 位作者
王健
张焱
王洁
王淑静
赵巍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期399-402,406,共5页
目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus Eg)铁蛋白(ferritin)基因的原核表达重组质粒并表达、纯化该重组蛋白,初步研究其免疫反应。方法将细粒棘球蚴铁蛋白基因亚克隆于表达载体pGEX-6p-1,转化重组体到大肠杆菌Bl21中,在异丙基-β...
目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus Eg)铁蛋白(ferritin)基因的原核表达重组质粒并表达、纯化该重组蛋白,初步研究其免疫反应。方法将细粒棘球蚴铁蛋白基因亚克隆于表达载体pGEX-6p-1,转化重组体到大肠杆菌Bl21中,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达;用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行初步鉴定,用切胶纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,通过Western-blot对该蛋白的免疫学特性进行初步研究。结果重组铁蛋白与GST以融合表达的形式在细菌中高效表达,表达产物为不可溶性的包涵体,蛋白分子量约为42 kD。融合蛋白Egferritin/GST能被细粒棘球蚴免疫的家兔血清和特异性小鼠抗血清所识别,同时特异性小鼠抗血清可识别天然抗原囊液、原头蚴可溶性蛋白中约19 kD的蛋白条带。结论成功地表达细粒棘球蚴重组铁蛋白,并且该蛋白有一定的免疫原性及抗原性。
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关键词
细粒棘球蚴
铁蛋白
基因克隆
表达
免疫原性
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职称材料
细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究
被引量：
6
2
作者
李宗吉
黄瑾
+5 位作者
张静
张焱
王洁
王淑静
高岭
赵巍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期76-79,共4页
目的构建细粒棘球蚴重组蛋白谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)的表达载体,获得纯化的重组蛋白,并对其免疫学特性进行初步鉴定,为重组疫苗研制的后续工作提供依据。方法从本室已构建的重组质粒GST/pGEM-T中酶切下GST目的片段,亚克隆入表达载体pET...
目的构建细粒棘球蚴重组蛋白谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)的表达载体,获得纯化的重组蛋白,并对其免疫学特性进行初步鉴定,为重组疫苗研制的后续工作提供依据。方法从本室已构建的重组质粒GST/pGEM-T中酶切下GST目的片段,亚克隆入表达载体pET28a,转化入大肠杆菌BL21plys进行融合表达,经His-bind树脂纯化系统小量纯化,得到纯化的重组融合蛋白作为抗原。免疫ICR小鼠,获得抗血清。通过蛋白免疫印迹试验(Western blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组抗原的免疫学特性。结果成功构建具有高效表达能力的基因工程菌株,并纯化了重组蛋白,纯化的重组抗原免疫小鼠的抗血清可识别天然与重组抗原,实验组血清与对照组血清抗体含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组蛋白具有良好的抗原性和免疫原性。
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关键词
细粒棘球蚴
谷胱甘肽S-转移酶
免疫原性
免疫印记
酶联免疫吸附试验
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职称材料
题名
细粒棘球蚴铁蛋白基因的克隆重组高效表达及免疫学初步研究
被引量：
9
1
作者
王娅娜
丁淑琴
王健
张焱
王洁
王淑静
赵巍
机构
宁夏
医学院
医学
遗传学与细胞生物学教研室
宁夏医学院中心实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期399-402,406,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No:30260105)
宁夏自然科学基金(NZ0540)
文摘
目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus Eg)铁蛋白(ferritin)基因的原核表达重组质粒并表达、纯化该重组蛋白,初步研究其免疫反应。方法将细粒棘球蚴铁蛋白基因亚克隆于表达载体pGEX-6p-1,转化重组体到大肠杆菌Bl21中,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达;用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行初步鉴定,用切胶纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,通过Western-blot对该蛋白的免疫学特性进行初步研究。结果重组铁蛋白与GST以融合表达的形式在细菌中高效表达,表达产物为不可溶性的包涵体,蛋白分子量约为42 kD。融合蛋白Egferritin/GST能被细粒棘球蚴免疫的家兔血清和特异性小鼠抗血清所识别,同时特异性小鼠抗血清可识别天然抗原囊液、原头蚴可溶性蛋白中约19 kD的蛋白条带。结论成功地表达细粒棘球蚴重组铁蛋白,并且该蛋白有一定的免疫原性及抗原性。
关键词
细粒棘球蚴
铁蛋白
基因克隆
表达
免疫原性
Keywords
Echinococcus granulosus
ferritin
gene cloning
expression
immunogenicity
分类号
R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究
被引量：
6
2
作者
李宗吉
黄瑾
张静
张焱
王洁
王淑静
高岭
赵巍
机构
宁夏
医学院
医学
遗传学与细胞生物学教研室
宁夏医学院中心实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期76-79,共4页
基金
国家自然科学基金(30260105)
宁夏自然科学基金(NZ0540)
文摘
目的构建细粒棘球蚴重组蛋白谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)的表达载体,获得纯化的重组蛋白,并对其免疫学特性进行初步鉴定,为重组疫苗研制的后续工作提供依据。方法从本室已构建的重组质粒GST/pGEM-T中酶切下GST目的片段,亚克隆入表达载体pET28a,转化入大肠杆菌BL21plys进行融合表达,经His-bind树脂纯化系统小量纯化,得到纯化的重组融合蛋白作为抗原。免疫ICR小鼠,获得抗血清。通过蛋白免疫印迹试验(Western blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组抗原的免疫学特性。结果成功构建具有高效表达能力的基因工程菌株,并纯化了重组蛋白,纯化的重组抗原免疫小鼠的抗血清可识别天然与重组抗原,实验组血清与对照组血清抗体含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组蛋白具有良好的抗原性和免疫原性。
关键词
细粒棘球蚴
谷胱甘肽S-转移酶
免疫原性
免疫印记
酶联免疫吸附试验
Keywords
Echinococcus granulosas
GST
immunogenicity
Western blot
ELISA
分类号
R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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1
细粒棘球蚴铁蛋白基因的克隆重组高效表达及免疫学初步研究
王娅娜
丁淑琴
王健
张焱
王洁
王淑静
赵巍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
9
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2
细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究
李宗吉
黄瑾
张静
张焱
王洁
王淑静
高岭
赵巍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
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