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甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法的建立 被引量:1
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作者 汪涵 吴伟怀 +7 位作者 杨旭光 杨先锋 李锐 郑金龙 黄兴 梁艳琼 贺春萍 易克贤 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期2334-2339,共6页
为建立甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法,本研究利用真菌DNA内源转录间隔区通用引物ITS1/ITS4扩增甘蔗黑顶柄锈菌DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,获得序列于NCBI网站进行比对分析,并于该序列多态性丰富区域设计了2对引物PM2F/R、PM3F/... 为建立甘蔗褐锈病菌巢式PCR分子检测方法,本研究利用真菌DNA内源转录间隔区通用引物ITS1/ITS4扩增甘蔗黑顶柄锈菌DNA,并对其扩增产物进行克隆测序,获得序列于NCBI网站进行比对分析,并于该序列多态性丰富区域设计了2对引物PM2F/R、PM3F/R。通过对同寄主不同病原菌、以及不同属的锈菌DNA进行PCR检测以验证引物的特异性。结果表明,在优化的单一PCR反应体系与程序条件下,2对引物均仅能从甘蔗黑顶柄锈菌中扩增出约474 bp和363 bp的特异条带,而从其它真菌DNA中均扩增不出任何条带。进一步将引物PM2F/R作为第一轮扩增引物、PM3F/R作为第二轮扩增引物进行巢式PCR扩增后,其检测灵敏度在DNA水平上可达0.001 ng/μL,较常规PCR提高100倍。由此表明,依据本研究所设计的2对引物而建立的快速、灵敏、准确的甘蔗黑顶柄锈菌的检测技术,对病原菌的早期诊断、快速检测及病害流行学研究具有重要意义。 展开更多
关键词 甘蔗褐锈病 黑顶柄锈菌 巢式PCR分子检测
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葡萄开荒种植对贺兰山荒漠草原土壤温湿度的影响 被引量:1
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作者 左忠 李龙 +1 位作者 李婧 王东清 《贵州农业科学》 CAS 2020年第6期18-22,共5页
为宁夏贺兰山及类似荒漠草原区域开荒种植葡萄制定科学合理的田间管理措施提供参考,利用贺兰山东麓葡萄基地和荒漠草原区(对照)土壤温湿度观测资料,采用方差分析及线性趋势分析法,研究宁夏贺兰山葡萄基地开荒种植对荒漠草原土壤温湿度... 为宁夏贺兰山及类似荒漠草原区域开荒种植葡萄制定科学合理的田间管理措施提供参考,利用贺兰山东麓葡萄基地和荒漠草原区(对照)土壤温湿度观测资料,采用方差分析及线性趋势分析法,研究宁夏贺兰山葡萄基地开荒种植对荒漠草原土壤温湿度的影响。结果表明:葡萄开荒种植区和荒漠草原区不同土层土壤的温度趋于正弦分布;3—8月,葡萄开荒种植区土壤温度均高于荒漠草原区;8月后,荒漠草原区土壤温度高于葡萄开荒种植区,其变化明显滞后;不同土层深度的土壤湿度随时间变化呈波浪形分布,各月葡萄开荒种植60 cm处土壤湿度较高,荒漠草原区以40 cm处土壤湿度较高。 展开更多
关键词 葡萄基地 开荒种植 土壤温度 土壤湿度 荒漠草原 贺兰山 宁夏
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串联双柱固相萃取-高效液相色谱-电喷雾多级质谱法测定盐酸二甲双胍制剂中的盐酸二甲双胍及残留物三聚氰胺和双氰胺 被引量:5
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作者 周艳芬 王芳焕 +3 位作者 王泽岚 詹海鹃 刘万毅 孟哲 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期159-166,共8页
建立了串联双柱固相萃取-高效液相色谱-电喷雾多级质谱(HPLC-ESI-MSn)确认及测定盐酸二甲双胍制剂中的盐酸二甲双胍及残留物三聚氰胺和双氰胺的方法。盐酸二甲双胍制剂样品在超声辅助下,采用含0.1%(v/v)乙酸的无水乙醇溶液提取,选择Clea... 建立了串联双柱固相萃取-高效液相色谱-电喷雾多级质谱(HPLC-ESI-MSn)确认及测定盐酸二甲双胍制剂中的盐酸二甲双胍及残留物三聚氰胺和双氰胺的方法。盐酸二甲双胍制剂样品在超声辅助下,采用含0.1%(v/v)乙酸的无水乙醇溶液提取,选择Cleanert PCX-C18串联固相萃取双柱净化富集,以5%(v/v)氨水甲醇溶液为洗脱剂进行洗脱。采用Kromasil-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm)分离,梯度洗脱,在电喷雾多级质谱、选择离子模式下检测,外标法定量。通过比较制剂残留物在不同萃取溶剂、固相萃取柱及洗脱液等条件下的回收率,优化了前处理方法。结果表明,在各自的线性范围内,3种目标物的峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数(r^2)≥0.999 2;方法的检出限为1.48~13.61μg/kg,定量限为5.96~45.67μg/kg。3种目标物在低、中、高加标水平下的平均回收率为65.02%~118.33%,相对标准偏差(RSD)≤13.41%(n=5)。该法操作简单,净化效果好,准确度高,重现性好,适用于检测和分析不同盐酸二甲双胍制剂中盐酸二甲双胍及残留物三聚氰胺和双氰胺。 展开更多
关键词 高效液相色谱-电喷雾多级质谱 串联双柱固相萃取 盐酸二甲双胍制剂 三聚氰胺 双氰胺
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贺兰山东麓酿酒葡萄质量安全及营养成分分析 被引量:4
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作者 开建荣 李婧 +2 位作者 牛艳 王彩艳 王晓菁 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第12期102-106,共5页
以宁夏贺兰山东麓葡萄产区的酿酒葡萄为研究对象,对酿酒葡萄中重金属含量及微量元素、糖、酸等营养成分进行检测分析。结果表明,连续2年采集的酿酒葡萄中重金属的综合污染指数分别为0.092和0.430,其质量等级划分属一级,污染等级为安全,... 以宁夏贺兰山东麓葡萄产区的酿酒葡萄为研究对象,对酿酒葡萄中重金属含量及微量元素、糖、酸等营养成分进行检测分析。结果表明,连续2年采集的酿酒葡萄中重金属的综合污染指数分别为0.092和0.430,其质量等级划分属一级,污染等级为安全,污染水平为清洁;酿酒葡萄中糖、酸、铁、锌、锰、铜平均含量依次为17.95 g/kg、0.71 g/kg、8.12 mg/kg、0.92 mg/kg、1.27 mg/kg、1.27 mg/kg,糖、酸含量和糖酸比在不同年份间存在显著性差异(P<0.05);葡萄中多个变量之间具有显著相关性(P<0.05),其中锌、锰、铜、铁相互间、酸和锌、锰和铜呈显著正相关(P<0.05);糖和酸呈显著负相关(P<0.05)。通过主成分分析(PCA)筛选出Fe、Zn、糖和酸作为酿酒葡萄的特征指标。 展开更多
关键词 贺兰山东麓 酿酒葡萄 重金属 营养成分
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朝鲜辣白菜中抗扩展青霉乳酸菌的筛选与鉴定 被引量:2
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作者 孙悦 刘佳伊 +4 位作者 杜宏 李婧 白凤翎 王君勇 励建荣 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第6期64-68,共5页
该研究采用菌饼法从朝鲜辣白菜中筛选抗扩展青霉(Penicillium expansum)的乳酸菌,采用形态观察、生理生化试验及分子生物学技术进行菌种鉴定,并对乳酸菌抗扩展青霉的机理进行初步研究。结果表明,经过筛选和鉴定,获得1株对扩展青霉抑制... 该研究采用菌饼法从朝鲜辣白菜中筛选抗扩展青霉(Penicillium expansum)的乳酸菌,采用形态观察、生理生化试验及分子生物学技术进行菌种鉴定,并对乳酸菌抗扩展青霉的机理进行初步研究。结果表明,经过筛选和鉴定,获得1株对扩展青霉抑制效果最佳的清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)PC-3,抑菌率为68.62%。菌株PC-3无细胞上清液(CFS)的抗真菌活性随pH的升高呈现先升高后降低的趋势;随温度的升高逐渐下降。初步判定菌株PC-3 CFS中抗扩展青霉的有效成分是乳酸和乙酸,其对扩展青霉抑菌率分别为67.58%和66.73%。经扫描电镜观察发现,菌株PC-3 CFS抗扩展青霉的机制为破坏其细胞结构,导致胞内物质泄漏。 展开更多
关键词 朝鲜辣白菜 乳酸菌 扩展青霉 抗真菌活性 筛选与鉴定
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