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重组酶辅助扩增结合CRISPR/Cas13a检测禽腺病毒4型方法的建立
被引量:
1
1
作者
殷冬冬
郭浩
+5 位作者
兰梦蝶
尹磊
王洁茹
沈学怀
戴银
潘孝成
《云南农业大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2023年第5期803-807,共5页
【目的】建立高效、灵敏、特异的禽腺病毒4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)检测方法。【方法】将重组酶辅助扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)与规律间隔性成簇短回文重复序列相关Cas13a蛋白(clustered regularly i...
【目的】建立高效、灵敏、特异的禽腺病毒4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)检测方法。【方法】将重组酶辅助扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)与规律间隔性成簇短回文重复序列相关Cas13a蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats associated protein 13a,CRISPR-Cas13a)技术相结合,针对FAdV-4 Hexon基因保守区设计RAA引物及CRISPR RNA(crRNA),利用RAA技术扩增样本核酸,并进行CRISPR-Cas13a荧光检测,以qPCR为对照方法,评价所建立方法的灵敏度、特异性以及与qPCR法的一致性。【结果】本研究所建立的方法反应过程均在37℃恒温条件下完成,反应体系可检测的最低扩增拷贝数为101 copies/μL,灵敏度高,且与FAdV-1、FAdV-7、FAdV-8b、FAdV-9、FAdV-10、鸡传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、禽流感H9亚型疫苗和新城疫病毒等禽病原核酸检测无交叉反应。该方法检测30份临床样本与qPCR检测的阳性检出率一致。【结论】建立的RAA-Cas13a方法检测FAdV-4具有简便、灵敏、特异等特点,可用于FAdV-4的快速检测和流行病学监测。
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关键词
禽腺病毒4型
CRISPR/Cas13a
重组酶辅助扩增
检测
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职称材料
鸡传染性鼻炎的临床表现及防控方法
被引量:
2
2
作者
赵朋
王培
《中国动物保健》
2023年第5期66-67,共2页
鸡传染性鼻炎由鸡副嗜血杆菌感染所引起,流行广泛,病鸡、隐性感染鸡和康复后的带菌鸡是主要传染源,通过呼吸道和黏膜接触进行传播,病鸡以呼吸道症状表现为主,同时表现头部肿大,呼吸困难,产蛋率下降等,临床危害较大。对此,本文从尽早发...
鸡传染性鼻炎由鸡副嗜血杆菌感染所引起,流行广泛,病鸡、隐性感染鸡和康复后的带菌鸡是主要传染源,通过呼吸道和黏膜接触进行传播,病鸡以呼吸道症状表现为主,同时表现头部肿大,呼吸困难,产蛋率下降等,临床危害较大。对此,本文从尽早发现并隔离传染源,加强养殖场的消毒工作,科学对健康鸡群接种疫苗等方面详述了本病的预防措施,也阐述了病鸡的多种治疗方法,以期将本病造成的损失降至最低。
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关键词
鸡
传染性鼻炎
副嗜血杆菌
防控
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职称材料
规模化养鸡生产常见用药问题及危害
被引量:
1
3
作者
王培
赵朋
《中国动物保健》
2023年第5期79-80,共2页
随着养鸡业进入规模化模式发展阶段,人们在用药方法、理念、习惯方面都发生了改变,有些药物对剂型和工艺技术的要求更高,如果不能快速适应就容易出现诸多问题,常见的有盲目用药,使用方法不当,药物间配伍不合理,随意加大剂量和延长疗程,...
随着养鸡业进入规模化模式发展阶段,人们在用药方法、理念、习惯方面都发生了改变,有些药物对剂型和工艺技术的要求更高,如果不能快速适应就容易出现诸多问题,常见的有盲目用药,使用方法不当,药物间配伍不合理,随意加大剂量和延长疗程,采购不合格兽药产品等,从而给鸡场带来诸多潜在危害;为了能帮助大家更加科学地用药,本文就此为话题进行了详述,以期为大家带来帮助。
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关键词
鸡场
用药问题
危害
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职称材料
题名
重组酶辅助扩增结合CRISPR/Cas13a检测禽腺病毒4型方法的建立
被引量:
1
1
作者
殷冬冬
郭浩
兰梦蝶
尹磊
王洁茹
沈学怀
戴银
潘孝成
机构
安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
畜禽产品安全工程安徽省重点实验室
肥西县农业农村局
动物
卫生监督所
宁国市动物卫生监督所
出处
《云南农业大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2023年第5期803-807,共5页
基金
安徽省科技重大专项(202003a06020012)
安徽省重点研究与开发计划(202204c06020039)
财政部和农业农村部现代农业产业技术体系(CARS-40)。
文摘
【目的】建立高效、灵敏、特异的禽腺病毒4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)检测方法。【方法】将重组酶辅助扩增技术(recombinase aided amplification,RAA)与规律间隔性成簇短回文重复序列相关Cas13a蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats associated protein 13a,CRISPR-Cas13a)技术相结合,针对FAdV-4 Hexon基因保守区设计RAA引物及CRISPR RNA(crRNA),利用RAA技术扩增样本核酸,并进行CRISPR-Cas13a荧光检测,以qPCR为对照方法,评价所建立方法的灵敏度、特异性以及与qPCR法的一致性。【结果】本研究所建立的方法反应过程均在37℃恒温条件下完成,反应体系可检测的最低扩增拷贝数为101 copies/μL,灵敏度高,且与FAdV-1、FAdV-7、FAdV-8b、FAdV-9、FAdV-10、鸡传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、禽流感H9亚型疫苗和新城疫病毒等禽病原核酸检测无交叉反应。该方法检测30份临床样本与qPCR检测的阳性检出率一致。【结论】建立的RAA-Cas13a方法检测FAdV-4具有简便、灵敏、特异等特点,可用于FAdV-4的快速检测和流行病学监测。
关键词
禽腺病毒4型
CRISPR/Cas13a
重组酶辅助扩增
检测
Keywords
fowl adenovirus serotype 4
CRISPR/Cas13a
recombinase aided amplification
detection
分类号
S852.657 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鸡传染性鼻炎的临床表现及防控方法
被引量:
2
2
作者
赵朋
王培
机构
安徽省宣城市宣州区孙埠镇人民政府
安徽省
宁国市动物卫生监督所
出处
《中国动物保健》
2023年第5期66-67,共2页
文摘
鸡传染性鼻炎由鸡副嗜血杆菌感染所引起,流行广泛,病鸡、隐性感染鸡和康复后的带菌鸡是主要传染源,通过呼吸道和黏膜接触进行传播,病鸡以呼吸道症状表现为主,同时表现头部肿大,呼吸困难,产蛋率下降等,临床危害较大。对此,本文从尽早发现并隔离传染源,加强养殖场的消毒工作,科学对健康鸡群接种疫苗等方面详述了本病的预防措施,也阐述了病鸡的多种治疗方法,以期将本病造成的损失降至最低。
关键词
鸡
传染性鼻炎
副嗜血杆菌
防控
分类号
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
规模化养鸡生产常见用药问题及危害
被引量:
1
3
作者
王培
赵朋
机构
安徽省
宁国市动物卫生监督所
安徽省宣城市宣州区孙埠镇人民政府
出处
《中国动物保健》
2023年第5期79-80,共2页
文摘
随着养鸡业进入规模化模式发展阶段,人们在用药方法、理念、习惯方面都发生了改变,有些药物对剂型和工艺技术的要求更高,如果不能快速适应就容易出现诸多问题,常见的有盲目用药,使用方法不当,药物间配伍不合理,随意加大剂量和延长疗程,采购不合格兽药产品等,从而给鸡场带来诸多潜在危害;为了能帮助大家更加科学地用药,本文就此为话题进行了详述,以期为大家带来帮助。
关键词
鸡场
用药问题
危害
分类号
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组酶辅助扩增结合CRISPR/Cas13a检测禽腺病毒4型方法的建立
殷冬冬
郭浩
兰梦蝶
尹磊
王洁茹
沈学怀
戴银
潘孝成
《云南农业大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2023
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
鸡传染性鼻炎的临床表现及防控方法
赵朋
王培
《中国动物保健》
2023
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
规模化养鸡生产常见用药问题及危害
王培
赵朋
《中国动物保健》
2023
1
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