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花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子的克隆及功能分析
被引量：
10
1
作者
王合春
陈新利
+3 位作者
隋炯明
毕英娜
王晶珊
乔利仙
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期864-870,共7页
植物β-1,3-葡聚糖酶属于一种重要的植物病程相关蛋白(PR蛋白),容易受到激发子的诱导而积累。用1.5 mmol/L水杨酸(SA)对花生品种花育20号幼苗进行诱导处理0.5、12、24、36、48和72 h后,提取RNA进行荧光定量检测β-1,3-葡聚糖酶基因(Ah-G...
植物β-1,3-葡聚糖酶属于一种重要的植物病程相关蛋白(PR蛋白),容易受到激发子的诱导而积累。用1.5 mmol/L水杨酸(SA)对花生品种花育20号幼苗进行诱导处理0.5、12、24、36、48和72 h后,提取RNA进行荧光定量检测β-1,3-葡聚糖酶基因(Ah-Glu)的表达量。结果表明,经诱导24 h后β-1,3-葡聚糖酶基因的表达量达到最高,是未经SA诱导的1.8倍。根据前期已克隆的花生β-1,3-葡聚糖酶基因序列(GenBank JQ801335),在其5'端设计3个嵌套的特异性引物扩增其上游启动子序列。以花育20号基因组DNA为模板,利用TAIL-PCR方法,扩增得到973 bp的花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子片段,在NCBI网站注册序列号为GenBank KC290400,并命名为Ah-Glu-Pro。PLACE和PlantCARE在线预测分析表明,Ah-Glu-Pro序列中含有TATA-box和CAAT-box等核心元件,还含有病原菌及水杨酸响应的顺式调控元件。根据Ah-Glu-Pro序列设计上下游引物,采用普通PCR法从花育20号扩增得到931 bp的启动子序列,命名为Ah-Glu-P。将Ah-Glu-P取代pCAMBIA1301质粒中的CaMV35S启动子,构建植物表达载体pCAMBIA1301-Ah-Glu-P。通过农杆菌介导法将pCAMBIA1301-Ah-Glu-P转化洋葱表皮细胞,经5 mmol/L SA诱导处理48 h后进行GUS染色。结果表明:经SA诱导后的洋葱表皮细胞GUS组织化学染色显示为蓝色,未经SA诱导的洋葱表皮细胞GUS组织化学染色未显示蓝色,说明Ah-Glu-P是一个可被诱导的启动子,可能含有对SA响应的顺式调控元件。
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关键词
花生
β-1
3-葡聚糖酶基因(Ah-Glu)
诱导型启动子
染色体步移
表达载体
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职称材料
甘薯Ran基因的克隆和表达分析
被引量：
3
2
作者
范乾程
王亚
+3 位作者
隋炯明
毕英娜
刘媛
王晶珊
《农学学报》
2013年第3期4-9,共6页
Ran蛋白是小GTP结合蛋白家族成员之一,控制着蛋白和RNA分子的运输过程。研究发现有些Ran基因受多种逆境胁迫的诱导表达。为了获得甘薯Ran基因,本试验通过RT-PCR克隆了1个甘薯Ran基因。测序结果显示其含有长666bp的完整开放阅读框,编码...
Ran蛋白是小GTP结合蛋白家族成员之一,控制着蛋白和RNA分子的运输过程。研究发现有些Ran基因受多种逆境胁迫的诱导表达。为了获得甘薯Ran基因,本试验通过RT-PCR克隆了1个甘薯Ran基因。测序结果显示其含有长666bp的完整开放阅读框,编码的蛋白含221个氨基酸,推测分子量为25.15kDa。比对分析发现甘薯与多种生物的Ran蛋白的氨基酸序列同源性都超过90%,荧光定量PCR研究表明IbRan基因受低温、PEG、盐和植物激素ABA的诱导表达。这为利用基因工程手段调控甘薯的抗逆性奠定了基础。
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关键词
甘薯
Ran基因
进化树
表达分析
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职称材料
甘薯ASR基因的扩增及同源性分析
被引量：
3
3
作者
隋炯明
赵丽兰
+2 位作者
毕英娜
孙世孟
王晶珊
《青岛农业大学学报（自然科学版）》
2012年第4期278-281,共4页
ASR蛋白(脱落酸、胁迫、成熟诱导蛋白)属于LEA蛋白家族中的成员之一,参与植物对低温、干旱、渗透压、脱落酸的胁迫应答。为了获得甘薯ASR基因,本试验根据拼接的cDNA序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR克隆了甘薯ASR基因。测序结果显示其c...
ASR蛋白(脱落酸、胁迫、成熟诱导蛋白)属于LEA蛋白家族中的成员之一,参与植物对低温、干旱、渗透压、脱落酸的胁迫应答。为了获得甘薯ASR基因,本试验根据拼接的cDNA序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR克隆了甘薯ASR基因。测序结果显示其cDNA含有长324 bp的完整开放阅读框,编码的蛋白有107个氨基酸,推测分子量为12.4 kDa。比对分析发现甘薯ASR蛋白与其它物种的氨基酸序列同源性为50.0%～77.0%。
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关键词
甘薯
ASR基因
逆境胁迫
进化树
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职称材料
题名
花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子的克隆及功能分析
被引量：
10
1
作者
王合春
陈新利
隋炯明
毕英娜
王晶珊
乔利仙
机构
青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室
威海恩特花木有限公司
出处
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期864-870,共7页
基金
国家自然科学基金(31101178)
山东省中青年科学家奖励基金(BS2009NY028)
+1 种基金
山东省自然基金(ZR2012CM014)
山东省自然基金青年基金(ZR2011CQ026)
文摘
植物β-1,3-葡聚糖酶属于一种重要的植物病程相关蛋白(PR蛋白),容易受到激发子的诱导而积累。用1.5 mmol/L水杨酸(SA)对花生品种花育20号幼苗进行诱导处理0.5、12、24、36、48和72 h后,提取RNA进行荧光定量检测β-1,3-葡聚糖酶基因(Ah-Glu)的表达量。结果表明,经诱导24 h后β-1,3-葡聚糖酶基因的表达量达到最高,是未经SA诱导的1.8倍。根据前期已克隆的花生β-1,3-葡聚糖酶基因序列(GenBank JQ801335),在其5'端设计3个嵌套的特异性引物扩增其上游启动子序列。以花育20号基因组DNA为模板,利用TAIL-PCR方法,扩增得到973 bp的花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子片段,在NCBI网站注册序列号为GenBank KC290400,并命名为Ah-Glu-Pro。PLACE和PlantCARE在线预测分析表明,Ah-Glu-Pro序列中含有TATA-box和CAAT-box等核心元件,还含有病原菌及水杨酸响应的顺式调控元件。根据Ah-Glu-Pro序列设计上下游引物,采用普通PCR法从花育20号扩增得到931 bp的启动子序列,命名为Ah-Glu-P。将Ah-Glu-P取代pCAMBIA1301质粒中的CaMV35S启动子,构建植物表达载体pCAMBIA1301-Ah-Glu-P。通过农杆菌介导法将pCAMBIA1301-Ah-Glu-P转化洋葱表皮细胞,经5 mmol/L SA诱导处理48 h后进行GUS染色。结果表明:经SA诱导后的洋葱表皮细胞GUS组织化学染色显示为蓝色,未经SA诱导的洋葱表皮细胞GUS组织化学染色未显示蓝色,说明Ah-Glu-P是一个可被诱导的启动子,可能含有对SA响应的顺式调控元件。
关键词
花生
β-1
3-葡聚糖酶基因(Ah-Glu)
诱导型启动子
染色体步移
表达载体
Keywords
Peanut
β-1,3-glucanase gene （Ah-Glu）
inducible promoter
genome walking
expression vector
分类号
S565.2 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
甘薯Ran基因的克隆和表达分析
被引量：
3
2
作者
范乾程
王亚
隋炯明
毕英娜
刘媛
王晶珊
机构
青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室
威海恩特花木有限公司
莱西市农业局
出处
《农学学报》
2013年第3期4-9,共6页
基金
青岛农业大学大学生创新项目"条斑紫菜抗逆基因Rab的克隆及其功能验证"(631121)
文摘
Ran蛋白是小GTP结合蛋白家族成员之一,控制着蛋白和RNA分子的运输过程。研究发现有些Ran基因受多种逆境胁迫的诱导表达。为了获得甘薯Ran基因,本试验通过RT-PCR克隆了1个甘薯Ran基因。测序结果显示其含有长666bp的完整开放阅读框,编码的蛋白含221个氨基酸,推测分子量为25.15kDa。比对分析发现甘薯与多种生物的Ran蛋白的氨基酸序列同源性都超过90%,荧光定量PCR研究表明IbRan基因受低温、PEG、盐和植物激素ABA的诱导表达。这为利用基因工程手段调控甘薯的抗逆性奠定了基础。
关键词
甘薯
Ran基因
进化树
表达分析
Keywords
Sweet Potato （Ipomoea batatas L.）
Ran Gene
Phylogenetic Tree
Expression Analysis
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
甘薯ASR基因的扩增及同源性分析
被引量：
3
3
作者
隋炯明
赵丽兰
毕英娜
孙世孟
王晶珊
机构
青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室
山东省农业广播电视学校蓬莱分校
威海恩特花木有限公司
出处
《青岛农业大学学报（自然科学版）》
2012年第4期278-281,共4页
文摘
ASR蛋白(脱落酸、胁迫、成熟诱导蛋白)属于LEA蛋白家族中的成员之一,参与植物对低温、干旱、渗透压、脱落酸的胁迫应答。为了获得甘薯ASR基因,本试验根据拼接的cDNA序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR克隆了甘薯ASR基因。测序结果显示其cDNA含有长324 bp的完整开放阅读框,编码的蛋白有107个氨基酸,推测分子量为12.4 kDa。比对分析发现甘薯ASR蛋白与其它物种的氨基酸序列同源性为50.0%～77.0%。
关键词
甘薯
ASR基因
逆境胁迫
进化树
Keywords
Sweet potato（ Ipomoea batatas L ）
ASR gene Stress
Phylogenetic tree
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子的克隆及功能分析
王合春
陈新利
隋炯明
毕英娜
王晶珊
乔利仙
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
甘薯Ran基因的克隆和表达分析
范乾程
王亚
隋炯明
毕英娜
刘媛
王晶珊
《农学学报》
2013
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
甘薯ASR基因的扩增及同源性分析
隋炯明
赵丽兰
毕英娜
孙世孟
王晶珊
《青岛农业大学学报（自然科学版）》
2012
3
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