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连翘叶改善肥胖大鼠炎症因子水平及肠道菌群结构的作用 被引量:5
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作者 田真 王紫玉 +2 位作者 渠鹏霞 马晶鑫 李元宾 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第13期970-981,共12页
目的:观察连翘叶改善肥胖大鼠的作用,并结合炎症因子水平、肠道菌群结构分析其作用机制。方法:40只SPF级SD雄性大鼠,按体重随机分成空白组(8只)和造模组(32只),空白组给予普通饲料喂养,造模组给予高脂饲料喂养。喂养9周后,淘汰造模未成... 目的:观察连翘叶改善肥胖大鼠的作用,并结合炎症因子水平、肠道菌群结构分析其作用机制。方法:40只SPF级SD雄性大鼠,按体重随机分成空白组(8只)和造模组(32只),空白组给予普通饲料喂养,造模组给予高脂饲料喂养。喂养9周后,淘汰造模未成功的大鼠,最终确定模型组及连翘叶治疗组,每组各8只。连翘叶治疗组给予连翘叶冻干粉0.067 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,空白组、模型组给予同等剂量生理盐水灌胃,持续10周。干预结束后,称量大鼠体重、肝脏重量、内脏脂肪重量并测量体长,计算肥胖指数、脂肪系数、肝脏系数;酶联免疫吸附法检测血清TNF‑α、IL‑6、LPS水平;苏木素‑伊红染色观察肝脏和结肠病理变化;油红O染色观察肝脏脂质沉积情况;免疫组化检测结肠claudin‑1、occludin、ZO‑1蛋白表达;宏基因组测序技术分析肠道菌群结构及功能。结果:与肥胖模型组比较,连翘叶治疗组大鼠体重及给药前后体重增加均降低(P<0.05),肥胖指数、脂肪系数、肝脏系数均降低(P<0.05),血清TNF‑α、IL‑6、LPS水平均降低(P<0.05),肝脏内脂滴空泡及脂质沉积减少,结肠绒毛结构紊乱得到改善,结肠紧密连接蛋白claudin‑1、ZO‑1表达增加(P<0.05),肠道菌群丰富度及多样性均增加(P<0.05),门水平上,梭菌门相对丰度增加(P<0.05),属水平上,普雷沃氏菌属、Pseudoflavonifractor相对丰度增加(P<0.05),萨特氏菌属、布劳特氏菌属、真杆菌属相对丰度降低(P<0.05),肠道菌群功能在DNA损伤修复中表达增加、氨基酸代谢紊乱得到改善。结论:连翘叶可能通过改善肠道菌群结构,减少肠道屏障通透性,进而减少血清炎症水平起到改善肥胖症的作用。 展开更多
关键词 肥胖 连翘叶 肠道菌群 炎症因子 宏基因组测序技术
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Vaspin通过Nrf2/ARE信号通路对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响 被引量:3
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作者 吴亚茹 刘师伟 +5 位作者 段瑞雪 汪湄湄 张佳新 郭胜慧 卫莹 李欣 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期324-330,共7页
目的:探讨Vaspin对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响。方法:培养INS-1细胞,分为正常对照组(NC组)、高糖高脂组(HG+PA组)、高糖高脂+80 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V1组)、高糖高脂+160 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V2组)、高糖高脂+320 ng/mL... 目的:探讨Vaspin对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响。方法:培养INS-1细胞,分为正常对照组(NC组)、高糖高脂组(HG+PA组)、高糖高脂+80 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V1组)、高糖高脂+160 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V2组)、高糖高脂+320 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V3组)、高糖高脂+640 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V4组)。通过DCFH-DA荧光探针染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;比色法、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测氧化应激相关指标;葡萄糖(3.3 mmol/L和16.7 mmol/L)刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Western blot检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)蛋白表达水平。结果:①与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中低糖和高糖刺激后的胰岛素分泌水平均有明显升高(均P<0.05);②与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中高糖高脂诱导INS-1细胞中ROS、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷水平明显降低,总抗氧化能力、超氧化物歧化酶水平、谷胱甘肽过氧化物酶水平明显升高(均P<0.05);③流式细胞实验发现,与HG+PA组相比,随着Vaspin浓度增加,高糖高脂干预后INS-1细胞的凋亡水平明显下降(均P<0.05);④Western blot结果表明,胞浆中Nrf2表达水平随着Vaspin浓度的增加呈上升趋势,胞核Nrf2表达水平仅在HG+PA+V4组较HG+PA组升高(0.798±0.080 vs.0.579±0.065,P=0.039)。结论:Vaspin可以通过激活Nrf2/抗氧化反应原件(antioxidant response element,ARE)信号通路,改善高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,增加胰岛素分泌水平。 展开更多
关键词 VASPIN 氧化应激 胰岛细胞功能 Nrf2/ARE信号通路
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Irisin水平变化在T2DM患者二甲双胍治疗中与动脉粥样硬化指标的关系研究 被引量:6
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作者 张佳新 刘师伟 李欣 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期372-377,共6页
目的:探索二甲双胍干预对初诊2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清Irisin水平的影响及其延缓动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用。方法:将120例初诊T2DM患者随机分为2组,每组60例,2组均予二甲双胍治疗6个月,低剂量... 目的:探索二甲双胍干预对初诊2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清Irisin水平的影响及其延缓动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的作用。方法:将120例初诊T2DM患者随机分为2组,每组60例,2组均予二甲双胍治疗6个月,低剂量组二甲双胍(250 mg,tid),高剂量组二甲双胍(500 mg,tid),超声检测治疗前后患者颈动脉内中膜厚度(carotid intima-media thickness,CIMT),检测治疗前后血清基质金属蛋白酶9(matrix metallo protein 9,MMP9)水平,并比较2组治疗前后血清Irisin、空腹血糖(fast blood glucose,FBG)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)及体质指数(body mass index,BMI)等其他生化指标水平。结果:治疗前,2组患者基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前相比,低剂量组治疗后血清Irisin水平明显升高(215.17±89.96 vs.356.66±102.32,P<0.05),高剂量组治疗后CIMT明显改善(1.43±0.89 vs.1.10±1.21,P<0.05),血清Irisin水平明显升高(238.17±67.96 vs.389.43±93.43,P<0.05),2组MMP9及氧化应激水平均明显降低(P<0.05)。与低剂量组相比,高剂量组治疗前后MMP9及丙二醛(malondialdehyde,MDA)减少更明显,血清Irisin水平升高更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,6个月后高剂量组ΔCIMT与血清ΔIrisin水平呈负相关,与ΔBMI、ΔFPG、ΔTG及氧化应激水平变化呈正相关。ΔMMP9与血清ΔIrisin水平呈负相关,与ΔFBG及氧化应激水平变化呈正相关。ΔIrisin水平与氧化应激水平变化呈负相关。进一步分别以高剂量组ΔCIMT及ΔMMP9为因变量,以其他相关因素为自变量进行多元线性逐步回归分析。结果显示ΔIrisin与氧化应激水平变化是ΔCIMT及ΔMMP9的独立影响因素。结论:初诊T2DM患者使用二甲双胍在降糖治疗同时能延缓颈动脉粥样硬化进展,部分原因可能与升高Irisin水平及改善氧化应激有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 二甲双胍 Irisin 动脉粥样硬化 氧化应激
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Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响 被引量:1
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作者 段瑞雪 刘师伟 +6 位作者 常冰梅 吴亚茹 汪湄湄 张佳新 郭胜慧 李欣 张琦 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期331-337,共7页
目的:研究脂肪细胞因子Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响。方法:培养INS-1细胞,分为正常组:用普通培养基培养24 h;棕榈酸(palmitic acid,PA)组:以0.5 mmol/L PA培养24 h;PA+Vaspin组:先加入320 ng/mL Vaspin预培养2 h,再以0... 目的:研究脂肪细胞因子Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响。方法:培养INS-1细胞,分为正常组:用普通培养基培养24 h;棕榈酸(palmitic acid,PA)组:以0.5 mmol/L PA培养24 h;PA+Vaspin组:先加入320 ng/mL Vaspin预培养2 h,再以0.5 mmol/L PA+320 ng/mL Vaspin共培养24 h;PA+Vaspin+雷帕霉素(rapamycin)组:先以50 nmol/L Rapamycin预培养2 h,再以0.5 mmol/L PA+320 ng/mL Vaspin共培养24 h;PA+Vaspin+3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组:先以1 mmol/L 3-MA预培养2 h,再以0.5 mmol/L PA+320 ng/mL Vaspin共培养24 h。葡萄糖(3.3 mmol/L和16.7 mmol/L)刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平,Western blot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、pmTOR、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及P62蛋白水平,mRFP-GFP-LC3检测自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果:与正常组相比,PA组INS-1细胞上清液中胰岛素分泌水平在3.3 mmol/L葡萄糖和16.7 mmol/L葡萄糖刺激下均降低[(1.02±0.08)ng/mL vs.(0.54±0.06)ng/mL,P=0.000;(1.15±0.13)ng/mL vs.(0.71±0.05)ng/mL,P=0.000],PA+Vaspin组较PA组升高[(0.76±0.03)ng/mL vs.(0.54±0.06)ng/mL,P=0.001;(0.91±0.04)ng/mL vs.(0.71±0.05)ng/mL,P=0.011];与正常组相比,PA组INS-1细胞p-mTOR与mTOR蛋白比值低(2.04±0.14 vs.1.19±0.09,P=0.000),PA+Vaspin组p-mTOR与mTOR蛋白比值较PA组高(1.51±0.05 vs.1.19±0.09,P=0.005);同时,PA组自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与正常组相比明显增加(0.81±0.07 vs.0.65±0.04,P=0.005;2.35±0.25 vs.1.16±0.11,P=0.000),P62蛋白水平降低(1.04±0.19 vs.0.60±0.08,P=0.000);PA+Vaspin组Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平较PA组低(0.58±0.04 vs.0.81±0.07,P=0.001;1.95±0.08 vs.2.35±0.25,P=0.007),P62蛋白增加(0.82±0.03 vs.0.60±0.08,P=0.032);PA组自噬溶酶体数量较正常组多(8.33±1.53 vs.0.33±0.58,P=0.000),Vaspin干预后降低(3.67±1.53 vs.8.33±1.53,P=0.001);同时,PA干预INS-1细胞24 h后细胞凋亡明显增加(7.91±0.50 vs.22.15±2.05,P=0.000),PA+Vaspin组较PA组细胞凋亡减少(13.23±1.97 vs.22.15±2.05,P=0.000)。结论:Vaspin能够改善棕榈酸诱导的INS-1细胞过度自噬和细胞凋亡,改善胰岛β细胞分泌功能。 展开更多
关键词 VASPIN 棕榈酸 自噬 胰岛Β细胞功能
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青春期佝偻病18例临床分析 被引量:2
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作者 冯希云 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 1998年第1期58-59,81,共3页
本文报道了18例青春期佝偻病,男8例,女10例;年龄11~17岁。主要原因为长期偏食及生长发育需要量增加导致维生素D(VitD)缺乏。本组患者均有骨痛及不同程度的活动障碍;血生化及X线片有典型佝偻病改变。用VitD及... 本文报道了18例青春期佝偻病,男8例,女10例;年龄11~17岁。主要原因为长期偏食及生长发育需要量增加导致维生素D(VitD)缺乏。本组患者均有骨痛及不同程度的活动障碍;血生化及X线片有典型佝偻病改变。用VitD及钙剂治疗,疗效满意。 展开更多
关键词 青春期 佝偻病 主要原因 骨痛 活动障碍
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2型糖尿病患者血清Asprosin水平及其与代谢指标的相关性研究 被引量:12
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作者 刘师伟 吴亚茹 +5 位作者 段瑞雪 张琦 李欣 张佳新 郭胜慧 汪湄湄 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1613-1618,共6页
目的:研究2型糖尿病患者血清Asprosin水平变化及其与代谢指标的相关性。方法:收集初诊2型糖尿病患者(type 2diabetes mellitus,T2DM)98例和正常糖耐量人群(normal glucose tolerance,NGT)93例。进一步根据中国超重/肥胖医学营养治疗专... 目的:研究2型糖尿病患者血清Asprosin水平变化及其与代谢指标的相关性。方法:收集初诊2型糖尿病患者(type 2diabetes mellitus,T2DM)98例和正常糖耐量人群(normal glucose tolerance,NGT)93例。进一步根据中国超重/肥胖医学营养治疗专家共识(2016年版),以体质量指数(body mass index,BMI)≥28 kg/m2为切点,将上述2组组内分别再分为非肥胖(non-obesity,NOB)和肥胖(obesity,OB)两亚组。测量人体指标、检测相关代谢血生化指标,采用ELISA检测血清Asprosin水平,并通过直线相关性分析、多元线性回归分析对Asprosin水平及其与其他代谢指标的相关性进行统计分析。结果:T2DM组Asprosin水平明显高于NGT组[(352.579±40.742)pg/mL vs.(189.411±32.635)pg/mL,P=0.002]。单因素相关分析显示,T2DM患者血清Asprosin水平与高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)呈负相关(r=-0.447,P=0.000),与空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model of assessment for insulin resistance index,HOMA-IR)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)呈正相关(r=0.187,r=0.198,r=0.202,r=0.159,均P<0.05)。多元逐步回归分析发现,FBG(β=0.333,P=0.000)、HOMA-IR(β=-0.176,P=0.047)为血清Asprosin的独立影响因素。结论:T2DM组血清Asprosin水平明显高于NGT组,且与FBG、FINS、HOMA-IR、HbA1c呈正相关,与HDL-C呈负相关,其中FBG与HOMA-IR是血清Asprosin水平的独立危险因素。 展开更多
关键词 Asprosin 2型糖尿病 肥胖 胰岛素抵抗
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脂联素对2型糖尿病大鼠骨髓微环境氧化应激水平及骨吸收的影响 被引量:7
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作者 郭耀文 渠鹏霞 +2 位作者 胡希鉴 赵倩 朱亦堃 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期369-376,共8页
目的 探讨脂联素(adiponectin,APN)对2型糖尿病大鼠骨髓微环境氧化应激水平及骨吸收指标的影响及其可能的作用机制。方法 将6周龄雄性SD大鼠60只随机分为正常对照组、糖尿病模型组。将建模成功大鼠36只随机分为糖尿病组(DM组)和APN干预... 目的 探讨脂联素(adiponectin,APN)对2型糖尿病大鼠骨髓微环境氧化应激水平及骨吸收指标的影响及其可能的作用机制。方法 将6周龄雄性SD大鼠60只随机分为正常对照组、糖尿病模型组。将建模成功大鼠36只随机分为糖尿病组(DM组)和APN干预组(APN组),APN组予腹腔注射球形APN 10 μg/(kg·d)。干预后分别于4、8、12周检测骨髓糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)、晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化素配体(receptor activator of nuclear fator-κB ligand,RANKL)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)水平,骨组织HE染色观察骨小梁结构。结果 正常对照组大鼠骨组织AGEs、骨髓上清液AOPP水平随饲养时间延长无明显变化,TRAP水平逐渐升高,DM组及APN组上述指标水平逐渐升高,各组骨髓细胞中OPG /RANKL及骨密度(bone mineral density,BMD)均降低。组间比较,12周时,DM组AGEs(1 041.44±82.20)、AOPP(1 260.86±263.71)pg/mL及TRAP(65.12± 4.44)pg/mL 水平较正常组AGEs(276.48±54.97)、AOPP(279.69±54.57)pg/mL及TRAP(57.60±6.55)pg/mL水平明显升高( P <0.05),DM组OPG/RANKL(5.91±1.69)、BMD(0.19± 0.03)g/m 2 水平较正常组OPG/RANKL(29.62±9.78)、BMD(0.25±0.01)g/m 2水平显著降低( P <0.05);APN组AGEs(691.44±106.76)、AOPP(936.90±89.58)pg/mL及TRAP(55.63±2.73)pg/mL水平较DM组明显减低( P <0.05),OPG /RANKL(29.70±6.26)、BMD(0.24±0.01)g/m 2水平较DM组明显升高( P <0.05)。骨组织形态学观察可见4周时三组间骨小梁结构尚无明显差异;12周时DM组与对照组相比骨小梁稀疏变细,破坏严重,而APN组与DM组相比骨小梁结构有所改善。结论 2型糖尿病大鼠骨髓微环境中氧化应激程度加重,可能诱导破骨细胞生成增多而导致骨吸收增强,外源性APN可能通过降低骨髓微环境氧化应激水平,降低骨吸收,从而对骨代谢起正向调节作用。 展开更多
关键词 糖尿病 骨质疏松症 氧化应激 脂联素
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人脐带间充质干细胞通过调控OPG/RANKL比值对骨质疏松大鼠的影响及机制研究 被引量:2
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作者 卫莹 刘师伟 +3 位作者 段瑞雪 赵宇翔 李楠 吴亚茹 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期503-510,共8页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)对骨质疏松大鼠的影响及机制。方法:将30只SPF级6月龄雌性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除+HUC-MSCs干预组(4... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)对骨质疏松大鼠的影响及机制。方法:将30只SPF级6月龄雌性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除+HUC-MSCs干预组(4×10^(6)/3 d,HUC-MSCs干预组),每组各10只,Sham组切除大鼠腹腔少量脂肪,其余各组均去除双侧卵巢建立骨质疏松大鼠模型。建模成功后,HUC-MSCs组用干细胞干预12周,其余2组用等剂量生理盐水干预。干预结束后,通过骨代谢血清指标血钙(calcium,Ca)、血磷(phosphorus,P)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原C端肽(c-terminal peptide of typeⅠcollagen,CTX)、骨组织形态计量学参数测量、骨密度检测、成骨细胞表面积/骨表面积比(osteoblast surface/bone surface,ObS/BS)和破骨细胞表面积/骨表面积比(osteoclast surface area/bone surface,OcS/BS),评估大鼠骨质疏松改善情况,同时通过Western blot探究各组大鼠骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)、β-连环蛋白(β-catenin)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达情况。结果:HUC-MSCs组大鼠血清Ca、ALP含量明显高于OVX组(2.320±0.188 vs.1.822±0.139;79.584±8.349 vs.43.644±5.369;均P=0.000),P、CTX含量明显低于OVX组(1.651±0.068 vs.1.864±0.076,P=0.000;119.832±18.180 vs.144.272±15.629,P=0.039);HUC-MSCs组骨小梁结构得到明显改善,骨密度、骨小梁数目、骨小梁面积比、ObS/BS均明显高于OVX组(161.114±16.726 vs.126.558±7.100,P=0.009;1.702±0.220 vs.1.051±0.323,P=0.020;33.111±6.101 vs.19.575±5.629,P=0.022;45.279±3.947 vs.33.948±7.339,P=0.041),骨小梁分离度、OcS/BS明显低于OVX组(0.592±0.066 vs.0.845±0.165,P=0.018;37.532±3.910 vs.44.891±3.615,P=0.026);Western blot结果显示HUC-MSCs组OPG/RANKL比值、β-catenin、Runx2的蛋白表达量明显高于OVX组(0.776±0.045 vs.0.097±0.063,P=0.000;0.590±0.057 vs.0.202±0.088,P=0.000;0.595±0.078 vs.0.239±0.071,P=0.001)。结论:HUC-MSCs可以通过Wnt/β-catenin/Runx2通路调节OPG/RANKL比值,促进骨形成,抑制骨吸收,改善骨质疏松。 展开更多
关键词 骨质疏松 人脐带间充质干细胞 骨代谢 骨保护素/核因子-κB受体活化因子配体
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