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基于转录组分析挖掘兽疫链球菌透明质酸分子量调控元件: 1; 作者裴旭娟狄靖宜 +1 位作者刘浩高伟霞《生物技术通报》北大核心 2025年第1期347-356,共10页; 【目的】挖掘透明质酸分子量的影响元件,构建生产不同分子量大小的透明质酸兽疫链球菌工程菌。【方法】在利用不同碳源培养兽疫链球菌S12生产透明质酸时,发现10 g/L果糖为碳源发酵的透明质酸分子量为1.48×10^(6) Da,比原始发酵培养... 展开更多; 关键词兽疫链球菌透明质酸转录组分子量精氨酸代谢; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于转录组学挖掘兽疫链球菌内源表达元件及高产透明质酸应用: 2; 作者赵锐狄靖宜 +2 位作者张广通刘浩高伟霞《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期296-304,共9页; 【目的】构建兽疫链球菌内源性表达元件文库,并探究其在提高透明质酸产量中的应用。【方法】通过对兽疫链球菌发酵指数期和平台期进行转录组测序分析,初步筛选32种高、中、低3种强度的启动子与RBS组合(表达元件PR);进一步利用绿色荧光... 展开更多; 关键词兽疫链球菌转录组测序启动子核糖体结合位点透明质酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

粗糙脉孢菌蛋白表达系统构建研究被引量：1: 3; 作者高染染刘倩 +3 位作者孙文良孙志勇刘浩田朝光《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期160-169,共10页; 旨在将模式丝状真菌粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)构建为蛋白质表达系统。通过真菌杂交技术构建出粗糙脉孢菌六突变缺失菌株LQ-1(Δ3βG∷Δ2cbh∷Δhis3)作为蛋白表达宿主菌株。该宿主菌株可以用纤维二糖作为诱导物诱导纤维素酶启动... 展开更多; 关键词丝状真菌粗糙脉孢菌蛋白表达系统纤维二糖强启动子; 在线阅读下载PDF 职称材料

兽疫链球菌ATCC39920可控诱导表达系统的构建及其应用被引量：2: 4; 作者郑小娥王震刘浩《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期130-136,共7页; 旨在构建一种在兽疫链球菌(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)中可用的基因诱导表达系统,并探究其在两步发酵中的应用。分别构建蔗糖、乳糖、木糖和乳酸链球菌素(nisin)诱导表达载体,以编码透明质酸合成酶的has A基因作为报告基... 展开更多; 关键词兽疫链球菌可控诱导表达系统可控两步发酵透明质酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于转录组分析挖掘兽疫链球菌透明质酸分子量调控元件: 1; 作者裴旭娟狄靖宜刘浩高伟霞; 机构天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物重点实验室; 出处《生物技术通报》北大核心 2025年第1期347-356,共10页; 基金国家重点研发计划(2021YFC2103200)。; 文摘【目的】挖掘透明质酸分子量的影响元件,构建生产不同分子量大小的透明质酸兽疫链球菌工程菌。【方法】在利用不同碳源培养兽疫链球菌S12生产透明质酸时,发现10 g/L果糖为碳源发酵的透明质酸分子量为1.48×10^(6) Da,比原始发酵培养基(50 g/L蔗糖为碳源)获得的透明质酸分子量2.10×10^(6) Da降低了29.52%。随后将50 g/L的蔗糖和10 g/L的果糖为碳源的S12发酵液进行转录组学分析,发现除果糖代谢相关基因外,精氨酸脱亚胺酶途径的两个关键基因arcA(编码精氨酸脱亚胺酶)和argF(编码鸟氨酸氨基甲酰转移酶)转录水平分别提升了16.29倍和11.27倍。为了探究这两个基因对HA合成的影响,在S12中分别敲除和过表达基因arcA、argF。【结果】arcA过表达菌株在CDM培养基中合成HA分子量2.96×10^(6) Da,比出发菌1.97×10^(6)Da提高50.25%,另外3个菌株HA分子量变化不大。进一步通过RT-qPCR发现arcA过表达菌株中谷氨酰胺(HA合成中的氨基供体)合成酶编码基因glnA转录水平上调2.0倍,这可能是导致arcA基因过表达HA分子量上升的原因之一。【结论】挖掘到精氨酸代谢相关两个基因对HA分子量具有调控作用,为其他菌株调控HA分子量提供了新靶标。; 关键词兽疫链球菌透明质酸转录组分子量精氨酸代谢; Keywords Streptococcus zooepidemicus hyaluronic acid transcriptome molecular weight arginine metabolism; 分类号 TQ281 [化学工程—有机化工] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于转录组学挖掘兽疫链球菌内源表达元件及高产透明质酸应用: 2; 作者赵锐狄靖宜张广通刘浩高伟霞; 机构天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期296-304,共9页; 基金重要医用多糖绿色生物制造关键技术及产业化示范(2021YFC2103200)。; 文摘【目的】构建兽疫链球菌内源性表达元件文库,并探究其在提高透明质酸产量中的应用。【方法】通过对兽疫链球菌发酵指数期和平台期进行转录组测序分析,初步筛选32种高、中、低3种强度的启动子与RBS组合(表达元件PR);进一步利用绿色荧光蛋白基因转录水平及荧光强度来验证PR元件的强度;最后,利用筛选到的较强元件PR31过表达透明质酸合成关键基因hasA,hasB,hasC,hasD,hasE,并采用2 L发酵罐评价强表达元件在提高透明质酸产量的效果。【结果】上述基因的相对转录水平分别提高至原来的8.17、7.32、3.72、39.48、9倍。其中,过表达hasA及hasD后,透明质酸产量相对于野生型分别提高了43%和31%,达到5.654 g/L和5.283 g/L。【结论】成功构建了兽疫链球菌内源表达元件文库,可用于透明质酸合成途径强化及竞争途径弱化等代谢工程改造。; 关键词兽疫链球菌转录组测序启动子核糖体结合位点透明质酸; Keywords Streptococcus zooepidemicus transcriptomics analysis promoter ribosome binding site hyaluronic acid; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名粗糙脉孢菌蛋白表达系统构建研究被引量：1: 3; 作者高染染刘倩孙文良孙志勇刘浩田朝光; 机构天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物重点实验室中国科学院天津工业生物技术研究所系统微生物工程重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期160-169,共10页; 基金国家高技术研究发展计划("863"计划)(SS2012AA023303); 文摘旨在将模式丝状真菌粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)构建为蛋白质表达系统。通过真菌杂交技术构建出粗糙脉孢菌六突变缺失菌株LQ-1(Δ3βG∷Δ2cbh∷Δhis3)作为蛋白表达宿主菌株。该宿主菌株可以用纤维二糖作为诱导物诱导纤维素酶启动子表达,同时又消除了葡萄糖苷酶蛋白的背景条带,有利于目标蛋白表达纯化。构建了分别含有粗糙脉孢菌自身强启动子(Pcbh-1、Pcbh-2和Ptef-1)的3个新的高效表达载体,该载体带有融合标签蛋白tev-6×his-gfp,能高效方便的筛选阳性转化子,有利于后续目标蛋白纯化。以纤维素酶GH3-4和CBH-1为例,通过重组表达菌株纤维二糖诱导发酵液进行酶活测定、SDS-PAGE电泳分析和Western blotting检测显示,重组蛋白GH3-4-GFP和CBH-1-GFP成功进行了表达和分泌,分泌水平分别为2.77和2.83 mg/L。Pcbh-1启动子重组蛋白表达水平最高,说明在纤维二糖诱导体系中启动子Pcbh-1的启动效率最高,初步建立了粗糙脉孢菌纤维二糖诱导的蛋白质表达体系。; 关键词丝状真菌粗糙脉孢菌蛋白表达系统纤维二糖强启动子; Keywords filamentous fungi Neurospora crassa recombinant protein expression system cellobiose strong inducible promoters; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兽疫链球菌ATCC39920可控诱导表达系统的构建及其应用被引量：2: 4; 作者郑小娥王震刘浩; 机构天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物重点实验室中国科学院天津工业生物技术研究所系统微生物工程重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期130-136,共7页; 基金天津市国际科技合作项目(13RCGFSY19400) 天津市高等学校科技发展基金项目(20130602); 文摘旨在构建一种在兽疫链球菌(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)中可用的基因诱导表达系统,并探究其在两步发酵中的应用。分别构建蔗糖、乳糖、木糖和乳酸链球菌素(nisin)诱导表达载体,以编码透明质酸合成酶的has A基因作为报告基因,以has A基因功能缺失导致荚膜缺陷的?has A作为宿主菌,观察诱导后荚膜生成情况验证系统的可行性。结果显示,木糖和nisin系统不能诱导has A表达,乳糖系统诱导表达效率低,蔗糖系统可严谨且高效诱导基因表达。以?has A/p LH201菌株实施两步发酵,葡萄糖为唯一糖源时仅用于菌体生长,添加蔗糖诱导产生透明质酸,终产量达到3.4 g/L。成功构建了一种以蔗糖为诱导物的可控-诱导基因表达系统,可用于兽疫链球菌两步发酵。; 关键词兽疫链球菌可控诱导表达系统可控两步发酵透明质酸; Keywords Streptococcus zooepidemicus controlled inducible expression system controllable two-stage fermentation hyaluronic acid; 分类号 TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于转录组分析挖掘兽疫链球菌透明质酸分子量调控元件	裴旭娟狄靖宜刘浩高伟霞	《生物技术通报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于转录组学挖掘兽疫链球菌内源表达元件及高产透明质酸应用	赵锐狄靖宜张广通刘浩高伟霞	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	粗糙脉孢菌蛋白表达系统构建研究	高染染刘倩孙文良孙志勇刘浩田朝光	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	兽疫链球菌ATCC39920可控诱导表达系统的构建及其应用	郑小娥王震刘浩	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料