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京尼平的微生物转化及其交联特性的测定分析
被引量：
2
1
作者
赵东
荆玮
+2 位作者
姚盟成
董逸楠
李玉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第7期146-151,共6页
从土壤中富集筛选获得一株产β-葡萄糖苷酶的菌株,经菌落的形态和18S rDNA鉴定确定为黑曲霉。将筛选出的黑曲霉菌株接种于发酵培养基,利用含有京尼平苷的栀子粉作为底物发酵,通过对发酵条件优化,得到在装液量50/250 mL,栀子粉浓度为10%...
从土壤中富集筛选获得一株产β-葡萄糖苷酶的菌株,经菌落的形态和18S rDNA鉴定确定为黑曲霉。将筛选出的黑曲霉菌株接种于发酵培养基,利用含有京尼平苷的栀子粉作为底物发酵,通过对发酵条件优化,得到在装液量50/250 mL,栀子粉浓度为10%,转速为180 r/min,发酵时间为96 h时,京尼平的微生物转化率达到最大22%。这种微生物转化法简化了京尼平的生产工艺,大大降低了生产成本。利用微生物转化获得的京尼平交联胶原蛋白材料,研究表明其具有较好的交联特性,是一种在食品、医药等领域都具有应用前景的生物交联剂。
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关键词
Β-葡萄糖苷酶
黑曲霉
京尼平
微生物转化
交联
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职称材料
碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究
被引量：
7
2
作者
郑宏臣
刘逸寒
+3 位作者
刘晓光
韩杨
王建玲
路福平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期106-113,共8页
从造纸厂周边碱性土壤中分离、筛选到一株产碱性木聚糖酶的细菌G1-3,根据形态和生理、生化特性并结合16SrDNA序列分析,鉴定菌株G1-3为短小芽孢杆菌,命名为Bacillus pumilusG1-3。利用克隆表达载体pET-22b(+),实现了Bacillus pumilusG1-...
从造纸厂周边碱性土壤中分离、筛选到一株产碱性木聚糖酶的细菌G1-3,根据形态和生理、生化特性并结合16SrDNA序列分析,鉴定菌株G1-3为短小芽孢杆菌,命名为Bacillus pumilusG1-3。利用克隆表达载体pET-22b(+),实现了Bacillus pumilusG1-3碱性木聚糖酶基因XynG1-3在E.coliBL21中的表达。经氨基酸序列分析,木聚糖酶XynG1-3属于GH11家族的小分子木聚糖酶。重组木聚糖酶XynG1-3经镍离子亲和层析一步纯化后,获得凝胶电泳条带单一的蛋白样品,经SDS-PAGE检测其分子量为24 kD。对酶学性质进行分析,重组酶XynG1-3最适作用温度为55℃,最适作用pH为8.0;该酶在60℃保温1 h,残余酶活保持为原来的56%,pH作用范围较广,在pH10.0下保存1 h,残余酶活仍能保持75%,为耐碱性木聚糖酶。
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关键词
短小芽孢杆菌
碱性木聚糖酶
筛选
鉴定
克隆
表达
酶学性质
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职称材料
赖氨酸-尸胺反向转运蛋白cadB基因谷氨酸棒杆菌表达载体的构建及转化
3
作者
黄云雁
黎明
+3 位作者
刘萌
孙昕
周丽颖
路福平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期94-100,共7页
旨在提高谷氨酸棒杆菌合成尸胺的能力,将CadB克隆至谷氨酸棒杆菌中,与LDC共表达,在谷氨酸棒杆菌合成尸胺的同时,帮助尸胺转运至细胞外,解除尸胺的反馈抑制作用。谷氨酸棒杆菌能够高产赖氨酸脱羧酶的底物L-赖氨酸,但不含ldc和cadB基因,...
旨在提高谷氨酸棒杆菌合成尸胺的能力,将CadB克隆至谷氨酸棒杆菌中,与LDC共表达,在谷氨酸棒杆菌合成尸胺的同时,帮助尸胺转运至细胞外,解除尸胺的反馈抑制作用。谷氨酸棒杆菌能够高产赖氨酸脱羧酶的底物L-赖氨酸,但不含ldc和cadB基因,因而不能够直接合成尸胺。从E.coliK12中克隆出赖氨酸-尸胺反向转运蛋白基因,与绿色荧光蛋白基因gfp融合构建成融合表达载体pXBG,并转化至谷氨酸棒杆菌进行诱导表达,结果表明表达的CadB蛋白可以正确的定位于谷氨酸棒杆菌的细胞膜上。将基因cadB连接到含有赖氨酸脱羧酶基因的pXMJ19-ldc上,构建成能够共表达赖氨酸脱羧酶和赖氨酸-尸胺反向转运蛋白的重组质粒pXLB,并转化到谷氨酸棒杆菌中。
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关键词
尸胺
赖氨酸-尸胺反向转运蛋白CadB
谷氨酸棒杆菌
赖氨酸脱羧酶
共表达
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职称材料
题名
京尼平的微生物转化及其交联特性的测定分析
被引量：
2
1
作者
赵东
荆玮
姚盟成
董逸楠
李玉
机构
天津科技大学生物工程学院、工业发酵微生物教育部重点实验室、工业酶国家工程实验室
海军
工程
大学
天津
校区
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第7期146-151,共6页
基金
天津市科技计划项目(10ZCKFNC01700)
文摘
从土壤中富集筛选获得一株产β-葡萄糖苷酶的菌株,经菌落的形态和18S rDNA鉴定确定为黑曲霉。将筛选出的黑曲霉菌株接种于发酵培养基,利用含有京尼平苷的栀子粉作为底物发酵,通过对发酵条件优化,得到在装液量50/250 mL,栀子粉浓度为10%,转速为180 r/min,发酵时间为96 h时,京尼平的微生物转化率达到最大22%。这种微生物转化法简化了京尼平的生产工艺,大大降低了生产成本。利用微生物转化获得的京尼平交联胶原蛋白材料,研究表明其具有较好的交联特性,是一种在食品、医药等领域都具有应用前景的生物交联剂。
关键词
Β-葡萄糖苷酶
黑曲霉
京尼平
微生物转化
交联
Keywords
β-glucosidase Aspergillus niger Genipin Microbial transformation Cross-linking
分类号
TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究
被引量：
7
2
作者
郑宏臣
刘逸寒
刘晓光
韩杨
王建玲
路福平
机构
天津科技大学生物工程学院、工业发酵微生物教育部重点实验室、工业酶国家工程实验室
、
天津
市
工业
微生物
重点
实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期106-113,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31101219)
文摘
从造纸厂周边碱性土壤中分离、筛选到一株产碱性木聚糖酶的细菌G1-3,根据形态和生理、生化特性并结合16SrDNA序列分析,鉴定菌株G1-3为短小芽孢杆菌,命名为Bacillus pumilusG1-3。利用克隆表达载体pET-22b(+),实现了Bacillus pumilusG1-3碱性木聚糖酶基因XynG1-3在E.coliBL21中的表达。经氨基酸序列分析,木聚糖酶XynG1-3属于GH11家族的小分子木聚糖酶。重组木聚糖酶XynG1-3经镍离子亲和层析一步纯化后,获得凝胶电泳条带单一的蛋白样品,经SDS-PAGE检测其分子量为24 kD。对酶学性质进行分析,重组酶XynG1-3最适作用温度为55℃,最适作用pH为8.0;该酶在60℃保温1 h,残余酶活保持为原来的56%,pH作用范围较广,在pH10.0下保存1 h,残余酶活仍能保持75%,为耐碱性木聚糖酶。
关键词
短小芽孢杆菌
碱性木聚糖酶
筛选
鉴定
克隆
表达
酶学性质
Keywords
Bacillus pumilus Alkaline xylanase Screening Identification Cloning Expression Enzymic properties
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
赖氨酸-尸胺反向转运蛋白cadB基因谷氨酸棒杆菌表达载体的构建及转化
3
作者
黄云雁
黎明
刘萌
孙昕
周丽颖
路福平
机构
天津科技大学生物工程学院、工业发酵微生物教育部重点实验室、工业酶国家工程实验室
、
天津
市
工业
微生物
重点
实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期94-100,共7页
基金
国家自然科学基金项目(21176910)
天津市科技支撑计划项目(11ZCKFSY00900)
+1 种基金
天津市应用基础及前沿技术研究计划项目(11JCYBJC 09600)
国家"863"项目(2007AA02Z212)
文摘
旨在提高谷氨酸棒杆菌合成尸胺的能力,将CadB克隆至谷氨酸棒杆菌中,与LDC共表达,在谷氨酸棒杆菌合成尸胺的同时,帮助尸胺转运至细胞外,解除尸胺的反馈抑制作用。谷氨酸棒杆菌能够高产赖氨酸脱羧酶的底物L-赖氨酸,但不含ldc和cadB基因,因而不能够直接合成尸胺。从E.coliK12中克隆出赖氨酸-尸胺反向转运蛋白基因,与绿色荧光蛋白基因gfp融合构建成融合表达载体pXBG,并转化至谷氨酸棒杆菌进行诱导表达,结果表明表达的CadB蛋白可以正确的定位于谷氨酸棒杆菌的细胞膜上。将基因cadB连接到含有赖氨酸脱羧酶基因的pXMJ19-ldc上,构建成能够共表达赖氨酸脱羧酶和赖氨酸-尸胺反向转运蛋白的重组质粒pXLB,并转化到谷氨酸棒杆菌中。
关键词
尸胺
赖氨酸-尸胺反向转运蛋白CadB
谷氨酸棒杆菌
赖氨酸脱羧酶
共表达
Keywords
Cadaverine
Cadaverine-lysine antiporter CadB
Corynebacterium glutamicum
Lysine decarboxylase
Co-expression
分类号
Q78 [生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
京尼平的微生物转化及其交联特性的测定分析
赵东
荆玮
姚盟成
董逸楠
李玉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究
郑宏臣
刘逸寒
刘晓光
韩杨
王建玲
路福平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
赖氨酸-尸胺反向转运蛋白cadB基因谷氨酸棒杆菌表达载体的构建及转化
黄云雁
黎明
刘萌
孙昕
周丽颖
路福平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
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