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常压室温等离子体快速诱变选育丙酮酸高产菌株被引量：8: 1; 作者司晓光郭刚 +2 位作者王小霞郑春阳高强《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期241-243,256,共4页; 本研究以产丙酮酸的光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)Tp19为出发菌株,采用常压室温等离子诱变系统(ARTP)进行诱变,根据CaCO3筛选平板透明圈与菌落直径比以及100孔板产酸量快速筛选丙酮酸高产突变株。最后通过摇瓶发酵复筛,选育出一株... 展开更多; 关键词常压室温等离子诱变系统光滑球拟酵母Tp19 丙酮酸筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组角质细胞生长因子(KGF)的原核表达及优化被引量：4: 2; 作者田顺立郑春阳《安徽农业科学》 CAS 2018年第33期71-74,共4页; [目的]在原核表达系统中进行重组人角质细胞生长因子(KGF)的表达及优化。[方法]选取缺失N端23个氨基酸残基的KGF片段作为目的基因,按照大肠杆菌的密码子偏好性,将其进行密码子优化。使用BL21(DE3)菌株表达KGF(ΔN23)、SUMO融合的SUMOKGF... 展开更多; 关键词角质细胞生长因子(KGF) 原核表达系统密码子优化融合表达标签蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源磷脂酶PLA2异源可溶表达纯化及酶学分析被引量：1: 3; 作者马文君滕琳 +4 位作者田顺利郭校燕王培培郑春阳卫宏远《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第2期70-75,82,共7页; 为实现人源磷脂酶A2的原核异源可溶表达,并对其进行纯化和初步的酶学性质分析。通过检索NCBI确定人源PLA2(PLA2G10),并将其构建于载体pET28a+上,并以麦芽糖结合蛋白(MBP)为促溶标签,成功构建载体pET28a-MBP-PLA2,转化E.coli BL21(DE3)后... 展开更多; 关键词人磷脂酶A2 载体构建异源可溶表达蛋白纯化活性测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

基因共表达对人源LysoPLD异源可溶性表达、纯化及酶学性质的影响被引量：1: 4; 作者马文君滕琳 +2 位作者王培培卫宏远郑春阳《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第7期102-109,共8页; 目的:为实现人源溶血磷脂酶D(LysoPLD)的原核异源可溶性表达。方法:通过NCBI检索,确定人源LysoPLD基因序列(GenBank:L46720.1)。采用密码子优化后的序列,克隆至pET-28a表达载体中,采用共表达麦芽糖结合蛋白融合标签(MBP)和共表达促蛋白... 展开更多; 关键词人源溶血磷脂酶D 异源可溶性表达麦芽糖结合蛋白融合标签触发因子酶学性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人汗腺抗菌素蛋白的异源可溶表达、发酵优化及分离纯化研究被引量：1: 5; 作者马文君郭校燕 +3 位作者滕琳王培培卫宏远郑春阳《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第9期114-121,共8页; 目的:实现人汗腺抗菌素(Dermcidins,DCD-1L)的原核异源可溶表达,并进行纯化及活性分析。方法:首先检索NCBI确定人DCD-1L的序列,构建载体并转化E.coli ER2566,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达后,进行SDS-PAGE电泳进行鉴定。其次,通... 展开更多; 关键词人汗腺抗菌素载体构建异源可溶表达发酵条件优化蛋白纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

乙酰基四肽-11防脱发作用的研究被引量：2: 6; 作者石莲莲马文君 +2 位作者孙亚萍王培培郑春阳《日用化学工业（中英文）》 CAS 北大核心 2023年第11期1293-1298,共6页; 将乙酰基四肽-11应用于小鼠进行脱发研究。通过对C57BL/6雌性小鼠背部进行脱毛处理,实验组连续涂抹3个质量浓度梯度(10,20和30μg/mL)的乙酰基四肽-11水溶液18天,对照组涂抹生理盐水,观察小鼠背部毛发生长情况,HE染色进行组织学分析,并... 展开更多; 关键词乙酰基四肽-11 ⅩⅤⅡ型胶原脱发毛囊干细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质被引量：2: 7; 作者郑春阳刘珺 +1 位作者魏国祥王磊《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1333-1337,共5页; 首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后,将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过转化导入... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌表达系统分泌表达耐高温嗜热内切-1 4-β-木聚糖酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

AIMP1衍生肽的护肤功效研究: 8; 作者杨秀芬马文君 +2 位作者李磊王培培郑春阳《日用化学工业（中英文）》 CAS 北大核心 2023年第2期171-179,共9页; 皮肤糖化反应是导致肤色暗黄、色斑、老化的一个重要因素,针对皮肤糖化问题,开发了一种生物活性多肽并进行护肤功效验证。AIMP1衍生肽(AdP)是由氨基酰tRNA合成酶相互作用多功能蛋白质1(AIMP1)衍生而来的寡肽,具有类AIMP1的多种生物活性... 展开更多; 关键词 AIMP1衍生肽抗糖化功效研究; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名常压室温等离子体快速诱变选育丙酮酸高产菌株被引量：8: 1; 作者司晓光郭刚王小霞郑春阳高强; 机构工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院天津强微特生物科技有限公司; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期241-243,256,共4页; 基金国家863计划项目(2012AA021302) 国家973计划项目(2013CB734004) +2 种基金国家自然科学基金(31370075 31101275) 天津市滨海新区自主创新重大项目(2011-BK120014); 文摘本研究以产丙酮酸的光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)Tp19为出发菌株,采用常压室温等离子诱变系统(ARTP)进行诱变,根据CaCO3筛选平板透明圈与菌落直径比以及100孔板产酸量快速筛选丙酮酸高产突变株。最后通过摇瓶发酵复筛,选育出一株遗传稳定的突变株A214,丙酮酸产量达到37.43g/L,比出发菌株提高了13.69%。; 关键词常压室温等离子诱变系统光滑球拟酵母Tp19 丙酮酸筛选; Keywords ARTP Torulopsis glabrata Tp19 pyruvate breeding; 分类号 Q921 [生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组角质细胞生长因子(KGF)的原核表达及优化被引量：4: 2; 作者田顺立郑春阳; 机构天津医科大学总医院保健医疗部华北理工大学基础医学院天津强微特生物科技有限公司; 出处《安徽农业科学》 CAS 2018年第33期71-74,共4页; 基金天津市创新平台与人才专项(15PTSYJC00090) 天津市科技支撑计划项目(15ZCZDSY00530) 天津市科委应用基础与前沿技术研究计划青年项目(15JCQNJC12500); 文摘 [目的]在原核表达系统中进行重组人角质细胞生长因子(KGF)的表达及优化。[方法]选取缺失N端23个氨基酸残基的KGF片段作为目的基因,按照大肠杆菌的密码子偏好性,将其进行密码子优化。使用BL21(DE3)菌株表达KGF(ΔN23)、SUMO融合的SUMOKGF(ΔN23)和Fh8-SUMO融合的Fh8-SUMO-KGF(ΔN23),并测试不同表达温度(37、23℃)对KGF(ΔN23)表达结果的影响。[结果]在BL21(DE3)菌株中,37℃表达时KGF(ΔN23),SUMO-KGF(ΔN23)和Fh8-SUMO-KGF(ΔN23)的表达量都较高,其中可溶性蛋白表达量KGF(ΔN23)<SUMO-KGF(ΔN23)<Fh8-SUMO-KGF(ΔN23)。降低诱导温度为23℃后,3种KGF的表达量都显著降低,但是可溶性蛋白的占比显著提高,均接近100%。[结论]降低诱导温度能够促进KGF的可溶性表达,但是总蛋白的表达水平显著下降;与可溶性标签蛋白融合表达能够提高KGF在37℃表达时可溶性蛋白占比,其中融合Fh8-SUMO标签的KGF表达量和可溶性蛋白占比较高。; 关键词角质细胞生长因子(KGF) 原核表达系统密码子优化融合表达标签蛋白; Keywords Keratinocyte growth factor(KGF) Prokaryotic expression system Codon optimization Fusion expression Tag protein; 分类号 Q813 [生物学—生物工程] Q816 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源磷脂酶PLA2异源可溶表达纯化及酶学分析被引量：1: 3; 作者马文君滕琳田顺利郭校燕王培培郑春阳卫宏远; 机构天津大学天津强微特生物科技有限公司天津医科大学总医院保健医疗部; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第2期70-75,82,共7页; 文摘为实现人源磷脂酶A2的原核异源可溶表达,并对其进行纯化和初步的酶学性质分析。通过检索NCBI确定人源PLA2(PLA2G10),并将其构建于载体pET28a+上,并以麦芽糖结合蛋白(MBP)为促溶标签,成功构建载体pET28a-MBP-PLA2,转化E.coli BL21(DE3)后,经PTG低温诱导表达,SDS-PAGE鉴定后,确认其在上清中大量表达。根据蛋白的性质建立了一整套蛋白纯化工艺,包括Q柱洗脱,硫酸铵盐析,Phenyl柱纯化,Amylose柱纯化,分离纯化获得重组酶,SDS-PAGE测定该酶纯度大于90%。以卵磷脂为底物,酸碱滴定法测定其比活为127.04 U/mg,纯化得率48.8%,纯化倍数为10.3倍。酶学性质研究表明,该酶的分子量为56.5 kDa,最适反应温度为40℃,最适反应pH为8.0,是钙离子依赖酶,对PC亲和能力最强,Km值为12.2 mmol/L,V(max)为0.19 mmol/L/min。本试验建立的磷脂酶A2的异源表达、纯化体系,为其进一步的理论和工业研究奠定了基础。; 关键词人磷脂酶A2 载体构建异源可溶表达蛋白纯化活性测定; Keywords human phospholipase A 2 vector construction soluble expression protein purification activity determination; 分类号 TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因共表达对人源LysoPLD异源可溶性表达、纯化及酶学性质的影响被引量：1: 4; 作者马文君滕琳王培培卫宏远郑春阳; 机构天津大学天津强微特生物科技有限公司守正创新生物科技(天津)有限公司; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第7期102-109,共8页; 文摘目的:为实现人源溶血磷脂酶D(LysoPLD)的原核异源可溶性表达。方法:通过NCBI检索,确定人源LysoPLD基因序列(GenBank:L46720.1)。采用密码子优化后的序列,克隆至pET-28a表达载体中,采用共表达麦芽糖结合蛋白融合标签(MBP)和共表达促蛋白正确折叠分子伴侣触发因子Trigger factor(tig)两种方式提高LysoPLD蛋白在大肠杆菌中的异源可溶性表达,建立对应蛋白的纯化工艺包括离子柱纯化,硫酸铵盐析,疏水柱纯化,淀粉树脂柱(Amylose Resin)纯化,分离纯化获得的重组酶,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定蛋白纯度,以对羟基棕榈酸酯为底物对比两种蛋白的酶学性质。结果:成功构建载体pET28a-MBP-LysoPLD和pET28a-pTF16-LysoPLD,并获得工程菌BL21(DE3)-pET28a-MBP-LysoPLD和BL21(DE3)-pET28a-pTf16-LysoPLD。BL21(DE3)-pET28a-MBP-LysoPLD经0.6 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导过夜可获得上清表达的MBP-LysoPLD蛋白;BL21(DE3)-pET28a-pTf16-LysoPLD在含有0.5μg/mL L-Arabinose的LB培养基中培养,经0.1 mmol/L IPTG低温诱导表达,可获得可溶性表达的LysoPLD蛋白,经纯化,酶纯度可大于80%。以对羟基棕榈酸酯为底物,对比两种方法得到的蛋白的酶学性质,发现二者催化反应的最适温度、最适pH、最适Ca2+浓度、比酶活基本一致。结论:两种基因共表达方式都可实现人源LysoPLD的在大肠杆菌中的可溶性表达,且酶学性质基本相同。; 关键词人源溶血磷脂酶D 异源可溶性表达麦芽糖结合蛋白融合标签触发因子酶学性质; Keywords human LysoPLD prokaryotic soluble expression maltose binding protein trigger factor enzymatic properties; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人汗腺抗菌素蛋白的异源可溶表达、发酵优化及分离纯化研究被引量：1: 5; 作者马文君郭校燕滕琳王培培卫宏远郑春阳; 机构天津大学天津强微特生物科技有限公司舒泰神(北京)生物制药股份有限公司守正创新生物科技(天津)有限公司; 出处《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第9期114-121,共8页; 文摘目的:实现人汗腺抗菌素(Dermcidins,DCD-1L)的原核异源可溶表达,并进行纯化及活性分析。方法:首先检索NCBI确定人DCD-1L的序列,构建载体并转化E.coli ER2566,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达后,进行SDS-PAGE电泳进行鉴定。其次,通过单因素实验,对不同温度、转速和补料速度等发酵条件进行研究与优化,根据DCD-1L蛋白特性优化蛋白纯化工艺。最后采用质谱和牛津杯法对纯化的蛋白进行分子量和抗菌活性鉴定。结果:经SDS-PAGE凝胶检测,在上清中分子量处检测到条带,证明采用原核表达系统可实现人DCD-1L的可溶表达;通过单因素实验获得最佳DCD-1L的发酵条件为:37℃培养,转速400 r/min,开启蠕动泵以50 mL/30 min补料速度自动加入发酵罐中;研究还建立了包括超滤、Q柱洗脱和分子筛在内的一整套优化的蛋白纯化工艺,获得的产品纯度大于96%,总回收率18.4%;最后,通过牛津杯法检测,纯化的重组人DCD-1L在浓度为50μg/mL时,对表皮葡萄球菌这类革兰氏阳性菌较大肠杆菌具有更明显的抑菌活性。结论:本研究对重组人DCD-1L蛋白实现了原核可溶表达,并建立了稳定可靠的发酵、纯化工艺,并进行了初步的抗菌活性鉴定,为后续重组人DCD-1L蛋白的应用研究奠定了基础。; 关键词人汗腺抗菌素载体构建异源可溶表达发酵条件优化蛋白纯化; Keywords human sweat gland antibiotic vector construction soluble prokaryotic expression optimization of fermentation conditions protein purification; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名乙酰基四肽-11防脱发作用的研究被引量：2: 6; 作者石莲莲马文君孙亚萍王培培郑春阳; 机构天津强微特生物科技有限公司守正创新生物科技(天津)有限公司; 出处《日用化学工业（中英文）》 CAS 北大核心 2023年第11期1293-1298,共6页; 基金科技重大专项与工程-生物医药产业链创新专项(21ZXSYSY00010)。; 文摘将乙酰基四肽-11应用于小鼠进行脱发研究。通过对C57BL/6雌性小鼠背部进行脱毛处理,实验组连续涂抹3个质量浓度梯度(10,20和30μg/mL)的乙酰基四肽-11水溶液18天,对照组涂抹生理盐水,观察小鼠背部毛发生长情况,HE染色进行组织学分析,并初步进行了志愿者试用评估。结果表明,一定质量浓度的乙酰基四肽-11可以预防小鼠脱发,避免毛囊微型化,同时可以维持小鼠表皮紧致。志愿者试用评估表明测试样品对所有志愿者都有防脱发效果,85%志愿者反馈头发密度变大。; 关键词乙酰基四肽-11 ⅩⅤⅡ型胶原脱发毛囊干细胞; Keywords acetyl tetrapeptide-11 ⅩⅤⅡcollagen hair loss follicle stem cell; 分类号 TQ658 [化学工程—精细化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质被引量：2: 7; 作者郑春阳刘珺魏国祥王磊; 机构天津强微特生物科技有限公司; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1333-1337,共5页; 基金天津市滨海新区科技小巨人成长计划-科技型企业创新发展(科技创业)项目(2010-BK130070) 天津市科技型中小企业技术创新基金项目(11C26211203970) +1 种基金天津市科技计划项目(12ZCZDSY01800); 文摘首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后,将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过转化导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilius WB800N宿主,培养并经过1 mmol/L IPTG诱导表达后,发酵胞外上清经SDS-PAGE电泳证明重组蛋白质成功获得表达。其相对分子质量为27 kD,最适反应温度为80℃,最适反应pH为6.0。由此得知,分泌表达的嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶的枯草芽孢杆菌工程菌株构建成功,这为未来该酶的产业化生产奠定了基础。; 关键词枯草芽孢杆菌表达系统分泌表达耐高温嗜热内切-1 4-β-木聚糖酶; Keywords Bacillus subtilis expression system, expression and secretion, thermophilic endo-1，4-β-xylanase; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名AIMP1衍生肽的护肤功效研究: 8; 作者杨秀芬马文君李磊王培培郑春阳; 机构天津强微特生物科技有限公司守正创新生物科技(天津)有限公司; 出处《日用化学工业（中英文）》 CAS 北大核心 2023年第2期171-179,共9页; 基金 2021年天津市生物医药科技重大专项(21ZXSYSY00010)。; 文摘皮肤糖化反应是导致肤色暗黄、色斑、老化的一个重要因素,针对皮肤糖化问题,开发了一种生物活性多肽并进行护肤功效验证。AIMP1衍生肽(AdP)是由氨基酰tRNA合成酶相互作用多功能蛋白质1(AIMP1)衍生而来的寡肽,具有类AIMP1的多种生物活性。采用牛血清白蛋白(BSA)糖化和羰基化体系研究AdP的抗糖化效果,并对含AdP的样品进行了临床功效测试。结果表明:AdP可减缓BSA与葡萄糖的糖基化反应,减少蛋白质羰基的生成,具有浓度依赖性;皮肤角质层含水量显著提高27.32%,TEWL降低12.77%,R2值提高10.34%,ITA°值提高14.25%,皱纹面积减少12.14%,AdP可有效抑制蛋白糖化,具有提升屏障功能、祛黄提亮抗皱的功效。; 关键词 AIMP1衍生肽抗糖化功效研究; Keywords AIMP1 derived peptide anti-glycosylation efficacy study; 分类号 TQ658 [化学工程—精细化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	常压室温等离子体快速诱变选育丙酮酸高产菌株	司晓光郭刚王小霞郑春阳高强	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2014	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	重组角质细胞生长因子(KGF)的原核表达及优化	田顺立郑春阳	《安徽农业科学》 CAS	2018	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人源磷脂酶PLA2异源可溶表达纯化及酶学分析	马文君滕琳田顺利郭校燕王培培郑春阳卫宏远	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	基因共表达对人源LysoPLD异源可溶性表达、纯化及酶学性质的影响	马文君滕琳王培培卫宏远郑春阳	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	重组人汗腺抗菌素蛋白的异源可溶表达、发酵优化及分离纯化研究	马文君郭校燕滕琳王培培卫宏远郑春阳	《食品工业科技》 CAS 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	乙酰基四肽-11防脱发作用的研究	石莲莲马文君孙亚萍王培培郑春阳	《日用化学工业（中英文）》 CAS 北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶在枯草杆菌中的表达及酶学性质	郑春阳刘珺魏国祥王磊	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	AIMP1衍生肽的护肤功效研究	杨秀芬马文君李磊王培培郑春阳	《日用化学工业（中英文）》 CAS 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料