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莱茵衣藻IFT25的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备
被引量：
5
1
作者
王震
董彬
+1 位作者
樊振川
孟德梅
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期903-908,共6页
IFT25是维持纤毛运动和感知所必须元件纤毛内运输蛋白IFT复合物B中的重要组分之一,探索IFT25尤其在模式生物莱茵衣藻中的作用机制具有重要作用。作者采用经济和简单的方法,制备莱茵衣藻IFT25的兔源多克隆抗体。将ift25分别连接到pMAL-c...
IFT25是维持纤毛运动和感知所必须元件纤毛内运输蛋白IFT复合物B中的重要组分之一,探索IFT25尤其在模式生物莱茵衣藻中的作用机制具有重要作用。作者采用经济和简单的方法,制备莱茵衣藻IFT25的兔源多克隆抗体。将ift25分别连接到pMAL-c2X-和pET-28a(+)-载体上,转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导大量表达,并经亲和纯化后蛋白质纯度超过90%。通过颈背部皮下多次免疫8周龄大的新西兰大白兔,制备多克隆抗体,取第五次免疫后血清用ELISA测定效价超过128 000。抗血清依次经过Protein A和硝酸纤维素膜纯化后,用Western blotting检测抗体特异性,结果表明制备的抗体可以特异性识别莱茵衣藻中的IFT25,为IFT25作用机制的阐明和纤毛相关疾病的诊断提供了重要理论和方法支持。
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关键词
莱茵衣藻
纤毛
IFT25
原核表达
蛋白纯化
多克隆抗体
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职称材料
题名
莱茵衣藻IFT25的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备
被引量：
5
1
作者
王震
董彬
樊振川
孟德梅
机构
天津
科技大学教育部
食品
营养与
安全
重点
实验室
天津市食品营养与安全和药物化学联合实验室
天津
科技大学新农村发展研究院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期903-908,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31501544)
天津市应用基础与前沿技术研究计划项目(13JCYBJC41900
17JCQNJC14400)
文摘
IFT25是维持纤毛运动和感知所必须元件纤毛内运输蛋白IFT复合物B中的重要组分之一,探索IFT25尤其在模式生物莱茵衣藻中的作用机制具有重要作用。作者采用经济和简单的方法,制备莱茵衣藻IFT25的兔源多克隆抗体。将ift25分别连接到pMAL-c2X-和pET-28a(+)-载体上,转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导大量表达,并经亲和纯化后蛋白质纯度超过90%。通过颈背部皮下多次免疫8周龄大的新西兰大白兔,制备多克隆抗体,取第五次免疫后血清用ELISA测定效价超过128 000。抗血清依次经过Protein A和硝酸纤维素膜纯化后,用Western blotting检测抗体特异性,结果表明制备的抗体可以特异性识别莱茵衣藻中的IFT25,为IFT25作用机制的阐明和纤毛相关疾病的诊断提供了重要理论和方法支持。
关键词
莱茵衣藻
纤毛
IFT25
原核表达
蛋白纯化
多克隆抗体
Keywords
Chlamydomonas reinhardtii
cilia
IFT25
prokaryotic expression
protein purification
polyclonal antibody
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
莱茵衣藻IFT25的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备
王震
董彬
樊振川
孟德梅
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
5
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