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慢病毒介导的甲胎蛋白敲减表达抑制肝癌细胞HepG2的增殖
被引量：
1
1
作者
张艳
强冉
+4 位作者
唐晓燕
李怡璇
刘民
李欣
汤华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期48-54,共7页
甲胎蛋白(AFP)是原发性肝癌的标志物.本实验室前期研究表明,AFP的表达与肝癌细胞的增殖及细胞周期相关.为了建立高效稳定的AFPsiRNA细胞导入方法,本研究构建了AFP慢病毒siRNA干涉载体pRNAT-U6.2/AFPsiRNA.并将其转入HEK293细胞后,Wester...
甲胎蛋白(AFP)是原发性肝癌的标志物.本实验室前期研究表明,AFP的表达与肝癌细胞的增殖及细胞周期相关.为了建立高效稳定的AFPsiRNA细胞导入方法,本研究构建了AFP慢病毒siRNA干涉载体pRNAT-U6.2/AFPsiRNA.并将其转入HEK293细胞后,Western印迹表明,pRNAT-U6.2/AFPsiRNA的干扰效率为88.7%(P<0.05).pRNAT-U6.2/AFPsiRNA与4个包装质粒共同转染293T细胞包装成慢病毒后感染HepG2细胞,感染3 d时GFP的表达量达95%,感染35 d的子代细胞中GFP的表达量仍稳定在85%.GFP表达量的观察显示,慢病毒载体可以高效并稳定表达外源基因.Western印迹结果也显示,HepG2细胞被病毒感染3 d和25 d后,AFP表达水平均有降低,抑制率分别为74.8%和63.4%(P<0.05).克隆形成实验表明,AFP沉默后,细胞克隆形成个数降低63%(P<0.01),表明HepG2细胞增殖能力受到抑制.
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关键词
HEPG2细胞
甲胎蛋白
RNA干扰
慢病毒
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题名
慢病毒介导的甲胎蛋白敲减表达抑制肝癌细胞HepG2的增殖
被引量：
1
1
作者
张艳
强冉
唐晓燕
李怡璇
刘民
李欣
汤华
机构
天津市生命科学中心实验室天津医科大学基础医学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期48-54,共7页
基金
天津市自然科学基金重点项目(No.09JCZDJC17500)
国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(No.2007AA021808)~~
文摘
甲胎蛋白(AFP)是原发性肝癌的标志物.本实验室前期研究表明,AFP的表达与肝癌细胞的增殖及细胞周期相关.为了建立高效稳定的AFPsiRNA细胞导入方法,本研究构建了AFP慢病毒siRNA干涉载体pRNAT-U6.2/AFPsiRNA.并将其转入HEK293细胞后,Western印迹表明,pRNAT-U6.2/AFPsiRNA的干扰效率为88.7%(P<0.05).pRNAT-U6.2/AFPsiRNA与4个包装质粒共同转染293T细胞包装成慢病毒后感染HepG2细胞,感染3 d时GFP的表达量达95%,感染35 d的子代细胞中GFP的表达量仍稳定在85%.GFP表达量的观察显示,慢病毒载体可以高效并稳定表达外源基因.Western印迹结果也显示,HepG2细胞被病毒感染3 d和25 d后,AFP表达水平均有降低,抑制率分别为74.8%和63.4%(P<0.05).克隆形成实验表明,AFP沉默后,细胞克隆形成个数降低63%(P<0.01),表明HepG2细胞增殖能力受到抑制.
关键词
HEPG2细胞
甲胎蛋白
RNA干扰
慢病毒
Keywords
HepG2 cells
AFP
RNA interfering
lentivirus
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢病毒介导的甲胎蛋白敲减表达抑制肝癌细胞HepG2的增殖
张艳
强冉
唐晓燕
李怡璇
刘民
李欣
汤华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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