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上转换发光免疫层析技术及其在食品安全检测中的应用 被引量:4
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作者 任舒悦 姜会聪 +3 位作者 彭媛 白家磊 宁保安 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第5期1858-1863,共6页
食品安全是关系到亿万人民健康生活的头等大事,保障食品安全的快速检测技术在不断进步。传统的理化检测方法存在样品前处理复杂、耗时费力、成本居高不下等问题,只能作为疑似样品的确证方法,不能满足质量安全监督现场筛查的需求。上转... 食品安全是关系到亿万人民健康生活的头等大事,保障食品安全的快速检测技术在不断进步。传统的理化检测方法存在样品前处理复杂、耗时费力、成本居高不下等问题,只能作为疑似样品的确证方法,不能满足质量安全监督现场筛查的需求。上转换发光免疫层析技术是建立在功能化上转换发光纳米材料与抗原抗体特异结合的层析技术基础上的一种新兴技术,具有灵敏度高、特异性强、使用便捷、检测速度快等特点,被广泛应用于快速检测过程中。本文对上转换发光技术及免疫层析技术进行了简要介绍,主要对上转换免疫层析技术以及其在食品安全检测领域的应用进展进行了综述。通过分析目前技术的优点与不足,根据目前的应用领域,提出了发展方向,为该技术在食品安全领域的进一步应用提供了参考。 展开更多
关键词 上转换发光 免疫层析 食品安全检测
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悬浮芯片技术在食品安全检测方面应用进展 被引量:2
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作者 李烨 郭启悦 +3 位作者 任舒悦 张迎春 杨仕平 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第5期1236-1242,共7页
食品安全是重要的民生问题,如何保障食品安全,守护"舌尖上的中国"一直是国家和人民关注的焦点问题。悬浮芯片技术是唯一被美国食品药品管理局(Food and Drug Administration, FDA)批准的生物芯片技术,具有准确、灵敏、高通量... 食品安全是重要的民生问题,如何保障食品安全,守护"舌尖上的中国"一直是国家和人民关注的焦点问题。悬浮芯片技术是唯一被美国食品药品管理局(Food and Drug Administration, FDA)批准的生物芯片技术,具有准确、灵敏、高通量等优点,可以满足食品安全部门监管,食品行业自检需求,被越来越多的研究者应用于食品安全方面的检测。因此了解该技术的发展及应用对研究者有重要意义。本文主要对悬浮芯片技术的原理及组成、在食品安全检测中的应用进行了概述,阐述了近5年该技术在检测食源性微生物、农兽药残留、转基因食品和过敏原方面的应用,并对悬浮芯片技术进一步发展方向进行展望。 展开更多
关键词 悬浮芯片 高通量 食品安全 荧光编码微球 中位荧光强度值
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食品安全快速检测技术研究进展 被引量:23
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作者 李双 韩殿鹏 +3 位作者 彭媛 周焕英 宁保安 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第17期5575-5581,共7页
食品安全关系人民群众生命安全与社会的长治久安,保障食品安全是民生工程、民心工程,更是一项重大而艰巨的政治任务。进入新时代,人民群众日益增长的美好生活需要对食品安全提出新的要求。食品安全检测技术对我国的食品安全意义重大,但... 食品安全关系人民群众生命安全与社会的长治久安,保障食品安全是民生工程、民心工程,更是一项重大而艰巨的政治任务。进入新时代,人民群众日益增长的美好生活需要对食品安全提出新的要求。食品安全检测技术对我国的食品安全意义重大,但传统大型的、检测时间长的食品检测已不能满足当前需求,这使得时间短、成本低的检测技术成为中国食品检测未来的发展趋势。快速检测技术将检验过程简单化、快速化,检测仪器上手容易、操作简单,近年来,随着多学科的交叉融合,食品安全快速检测技术得到了迅速的发展。本文综述了快速检测技术在食品安全领域的主要应用,列举了当前食品安全快速检测技术研究热点,并展望了其未来发展的方向。 展开更多
关键词 食品安全 快速检测 化学比色法 生物传感器 免疫分析
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低场核磁共振技术在食品安全快速检测中的应用 被引量:24
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作者 郭启悦 李烨 +2 位作者 任舒悦 杨仕平 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第2期380-384,共5页
近年来,随着食品安全检测技术的逐步发展,高效快速的检测方法备受推崇。低场核磁共振技术(low field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)因具有快速精确,对样品及操作限制较小且检测成本低等优势,在工业、医药、材料、食品等领域都得... 近年来,随着食品安全检测技术的逐步发展,高效快速的检测方法备受推崇。低场核磁共振技术(low field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)因具有快速精确,对样品及操作限制较小且检测成本低等优势,在工业、医药、材料、食品等领域都得到了广泛的应用。本研究对NMR在食品品质分析、食品掺假检测和食品中微生物快速检测方面的应用进行了综述,以期为其在食品安全快速检测领域的应用研究提供参考。 展开更多
关键词 低场核磁共振 食品安全 快速检测
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食品安全检测中脱氧核酶生物传感技术研究进展 被引量:3
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作者 邵芙蓉 赵尊全 +2 位作者 白家磊 曹高芳 高志贤 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第11期281-290,共10页
脱氧核酶(deoxyribozymes,DNAzymes)是一类具有催化活性的人造脱氧核糖核酸(DNA),因其在生物传感领域存在巨大潜力而受到广泛关注。这些功能性寡核苷酸不仅可以作为特异性的分子识别元件,还能直接通过本身的酶催化活性报告或者传递信号... 脱氧核酶(deoxyribozymes,DNAzymes)是一类具有催化活性的人造脱氧核糖核酸(DNA),因其在生物传感领域存在巨大潜力而受到广泛关注。这些功能性寡核苷酸不仅可以作为特异性的分子识别元件,还能直接通过本身的酶催化活性报告或者传递信号。近年来,基于DNAzyme的生物传感技术在食品安全领域的研究和应用得到了迅速发展。本文重点关注了近3年来的文献资料,综述了DNAzyme的催化机制和生物传感策略以及它们在食品安全快速检测中的研究进展,并讨论了未来该生物传感技术在食品样品分析检测中可能的发展趋势和方向。 展开更多
关键词 脱氧核酶 生物传感 食品安全 检测技术 生物传感器
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光子晶体材料在食品安全检测中的应用 被引量:1
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作者 闫静坤 耿璐 +5 位作者 张思怡 王海璁 彭媛 曹维强 高志贤 苗颖 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第6期24-30,共7页
瘦肉精、“毒”奶粉、染色馒头等食品安全事件屡屡发生,严重危害人体健康与生命安全。同时,农兽药残留、重金属超标、非法添加物等食品安全问题已成为社会热点话题,对这些食品有害物的监测和检测必不可少。因此,建立健全食品安全检测技... 瘦肉精、“毒”奶粉、染色馒头等食品安全事件屡屡发生,严重危害人体健康与生命安全。同时,农兽药残留、重金属超标、非法添加物等食品安全问题已成为社会热点话题,对这些食品有害物的监测和检测必不可少。因此,建立健全食品安全检测技术体系,对保障食品质量安全和人们身体健康至关重要。光子晶体由于其自身的光学特性及光子带隙的可调控性,在食品有毒有害物质的检测研究中引起广泛关注,可作为可视化、无标记的快速检测材料。本文综述了光子晶体材料的优势及其在食品中有害物检测中的研究进展,简要介绍了光子晶体材料在富集纯化、防伪标签方面的应用,并展望了光子晶体传感材料的未来发展方向,为光子晶体材料在食品安全领域的研究提供参考与启示。 展开更多
关键词 光子晶体 食品安全 样品前处理 检测技术 包装防伪
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四苯乙烯类聚集诱导发光材料在食品安全检测中的应用 被引量:1
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作者 李毓 武晋海 +3 位作者 孙博 白家磊 吴建虎 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第6期10-16,共7页
食品安全对人们的身心健康至关重要,快捷、精准、灵活和直观的检测方法是保障食品安全的重要手段。聚集诱导发光(aggregation-inducedemission,AIE)材料是近年来提出的一种新型荧光材料,该材料具有可调节的光学特性、良好的光学性能及... 食品安全对人们的身心健康至关重要,快捷、精准、灵活和直观的检测方法是保障食品安全的重要手段。聚集诱导发光(aggregation-inducedemission,AIE)材料是近年来提出的一种新型荧光材料,该材料具有可调节的光学特性、良好的光学性能及较好的抗干扰性,并以背景值低、信号强度高的优势在食品安全检测领域展现出广阔的应用前景。四苯乙烯(tetraphenylethylene,TPE)是最具有代表性的AIE分子之一,具有合成简便、易功能化及优异的AIE效应等优点。本文对TPE类AIE材料的发光机制,以及近年来在食品安全领域中的应用研究进展进行了综述,重点总结和分析TPE衍生物在真菌毒素、农兽药残留、重金属离子、食品添加剂、致病微生物等方面的研究进展,并对目前存在的问题和应用前景进行了总结和展望,旨在激发新的研究思路和兴趣,推进传感技术的发展,促进TPE类AIE材料的多元化应用。 展开更多
关键词 聚集诱导发光 四苯乙烯 食品安全
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基于荧光生物传感技术检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B 被引量:5
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作者 王美玲 胡婷 +3 位作者 李昌哲 周焕英 高志贤 罗鹏 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第1期57-64,共8页
目的利用纳米金粒子(gold nanoparticles,AuNPs)荧光猝灭性能和核酸适配体的高亲和力,构建一种简便、灵敏的纳米金“Turn-on”型荧光生物传感方法检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxins B,SEB)的方法。方法以Au... 目的利用纳米金粒子(gold nanoparticles,AuNPs)荧光猝灭性能和核酸适配体的高亲和力,构建一种简便、灵敏的纳米金“Turn-on”型荧光生物传感方法检测牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxins B,SEB)的方法。方法以AuNPs作为荧光体的能量受体(猝灭剂),荧光素-单链DNA(fluorescein-ssDNA,FAM-ssDNA)作为荧光能量供体,冷冻法制备AuNPs-SEB适配体复合物,基于AuNPsSEB适配体复合物/SEB/FAM-ssDNA的竞争性结合,构建纳米金“Turn-on”型荧光生物传感检测方法。对缓冲体系pH和反应时间等条件进行优化,以牛奶为代表对方法检测性能进行验证。结果在优化好的实验条件(pH 7.5、反应时间15 min和反应温度25℃)下,在10^(-1)~10^(4)ng/mL范围内,荧光强度与SEB质量浓度之间呈现良好的线性关系,其相关系数为0.995,检出限为0.062 ng/mL。应用于牛奶样品中SEB的测定,方法回收率为91.2%~108.0%,相对标准偏差在2.6%~5.2%范围之间。结论该纳米金“Turn-on”型荧光生物传感检测技术具有简便、灵敏和准确等优点,可为食品中污染物的检测提供一种可行的新方法。 展开更多
关键词 纳米金粒子 核酸适配体 荧光生物传感 金黄色葡萄球菌肠毒素B 牛奶
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基于化学发光磁酶免疫分析技术检测单增李斯特菌 被引量:15
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作者 范龙兴 宁保安 +7 位作者 孙智勇 白家磊 彭媛 曲晓辰 刘超 乌恩琦 高志贤 刘颖 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第3期124-129,共6页
探索化学发光磁酶免疫分析技术在单核细胞增生性李斯特菌检测中的应用,并初步建立和优化检测方法及条件。将抗LM兔多抗与磁性微球偶联构建免疫磁分离原件,应用双抗夹心法ELISA检测LM全菌抗原,应用化学发光法进行定量检测,应用正交设计... 探索化学发光磁酶免疫分析技术在单核细胞增生性李斯特菌检测中的应用,并初步建立和优化检测方法及条件。将抗LM兔多抗与磁性微球偶联构建免疫磁分离原件,应用双抗夹心法ELISA检测LM全菌抗原,应用化学发光法进行定量检测,应用正交设计优化主要反应条件,建立标准曲线,测试灵敏性与特异性。通过正交试验优化的反应条件为37℃条件下,免疫磁珠用量20μL、含0.1%BSA的PBS封闭15 min,捕获抗原2 h,HRP标记的抗LM单抗稀释至1∶10 000(体积比)特异性结合反应30 min后进行化学发光检测,标准曲线拟合优度0.954,最低检出限10~4 CFU/m L,特异性良好,检测时限为3 h^4 h。 展开更多
关键词 化学发光 免疫磁珠 单增李斯特菌
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功能食品中铁含量现场快速检测方法的建立 被引量:7
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作者 刘飞 周焕英 +2 位作者 刘忠文 张亦红 高志贤 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2011年第1期102-105,共4页
建立功能食品中铁快速检测技术。通过试验选择最佳反应条件。曲拉通-100为增溶剂三价铁与硫氰酸钾显色反应,形成红色络合物。该络合物在波长480 nm,使用AMMS-1型快检仪检测。三价铁浓度在0.5 mg/L~3.0 mg/L范围内,呈线性关系。相关系数... 建立功能食品中铁快速检测技术。通过试验选择最佳反应条件。曲拉通-100为增溶剂三价铁与硫氰酸钾显色反应,形成红色络合物。该络合物在波长480 nm,使用AMMS-1型快检仪检测。三价铁浓度在0.5 mg/L~3.0 mg/L范围内,呈线性关系。相关系数为0.999 4,最低检出限为50μg/kg本方法摩尔吸光系数为3.6×104 L/(mol.cm),标准偏差2.4%。该方法用于测定功能食品中铁含量,操作简捷,结果准确可靠。 展开更多
关键词 功能食品 快速检测
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用于组胺检测的新型电化学传感技术研究 被引量:5
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作者 姜随意 吴业宾 +4 位作者 王浩 宁保安 白家磊 彭媛 高志贤 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第4期113-118,共6页
通过对检测条件的优化,制备高特异性、高稳定性、高敏感的MIP-Au NPs-GCE电化学传感器,建立新型的组胺检测方法。通过对该传感器的电极电化学行为进行研究,分析出了电极电化学行为的变化规律,还对Au NPs的信号放大作用进行了验证。该方... 通过对检测条件的优化,制备高特异性、高稳定性、高敏感的MIP-Au NPs-GCE电化学传感器,建立新型的组胺检测方法。通过对该传感器的电极电化学行为进行研究,分析出了电极电化学行为的变化规律,还对Au NPs的信号放大作用进行了验证。该方法的检测时间<30 min,标准曲线为:Y=2.953 lg X+1.968,R^2=0.998 8,最低检测限(LOD):0.22 ng/m L,检测范围:0.25 ng/m L^100 ng/m L。以豆腐乳作为实际样品进行加标回收试验,加标回收率位于93.57%~103.93%之间,相对标准偏差(RSD)位于0.93%~3.08%之间,各检测水平之间的差异具有统计学意义。 展开更多
关键词 组胺 电化学传感技术 分子印迹膜 AuNPs信号放大
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基于间接竞争法的表面等离子共振免疫传感技术检测雌二醇 被引量:2
12
作者 贾映彤 彭媛 +4 位作者 白家磊 张希浩 宁保安 高志贤 崔建升 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期223-228,共6页
建立一种基于间接竞争法的表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)免疫传感技术检测雌二醇(estradiol,E_2),这种方法无需标记,可以实时监测竞争过程。在间接竞争实验中,E_2和E_2的单克隆抗体(monoclonal antibody,E_2-m Ab)等... 建立一种基于间接竞争法的表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)免疫传感技术检测雌二醇(estradiol,E_2),这种方法无需标记,可以实时监测竞争过程。在间接竞争实验中,E_2和E_2的单克隆抗体(monoclonal antibody,E_2-m Ab)等体积混合后共同竞争被固定在了SPR传感器的芯片表面的E_2-牛血清白蛋白包被原(E_2-bovine serum albumin,E_2-BSA),SPR产生的信号和E_2的质量浓度呈反比。优化实验参数如抗体质量浓度、再生次数等,最后再用全脂牛奶做E_2的加标实验。实验的线性范围为15.63~500 ng/m L,最低检出限为11.13 ng/m L。本研究的SPR免疫传感技术构建了一种通用的方法,可以用来无标记检测其他不同的小分子。 展开更多
关键词 表面等离子共振 无标记 雌二醇 实时 间接竞争
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上转换技术应用于生物传感器的构建 被引量:1
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作者 田静菡 宁保安 +4 位作者 张娜 彭媛 白家磊 赵玉凤 高志贤 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2014年第18期138-142,共5页
上转换材料可通过非线性的光学过程将低能量的激发光源转化成高能量的近红外或可见光辐射,组织穿透性强,生物兼容性好,产生的背景信号较低、斯托克斯位移较大、发射峰窄、几乎没有光漂白性,是近年来取得飞速发展与应用的荧光材料。本文... 上转换材料可通过非线性的光学过程将低能量的激发光源转化成高能量的近红外或可见光辐射,组织穿透性强,生物兼容性好,产生的背景信号较低、斯托克斯位移较大、发射峰窄、几乎没有光漂白性,是近年来取得飞速发展与应用的荧光材料。本文对上转换材料的合成、表面修饰、应用等最新进展进行阐述。本实验室成功合成了有机相的上转换纳米颗粒,并基于此材料构建传感器应用于食品样品中双酚A的检测。 展开更多
关键词 上转换 荧光材料 表面修饰 生物传感器
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用于检测牛奶中雌二醇的酶热传感技术研究 被引量:1
14
作者 原林 宁保安 +4 位作者 彭媛 白家磊 范献军 姜随意 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第4期1376-1382,共7页
目的建立一种用于检测牛奶中雌二醇的酶热传感技术。方法羧基化雌二醇经1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)与β-内酰胺酶偶联。酶热传感器中装SPG酶柱,通过ELISA原理使游离雌二醇与结合雌二醇竞争结合雌二醇抗体,从而检... 目的建立一种用于检测牛奶中雌二醇的酶热传感技术。方法羧基化雌二醇经1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)与β-内酰胺酶偶联。酶热传感器中装SPG酶柱,通过ELISA原理使游离雌二醇与结合雌二醇竞争结合雌二醇抗体,从而检测基质中的雌二醇浓度。优化酶热传感检测体系中的反应底物、系统流速、抗原抗体稀释比例等实验因素。结果磷酸盐缓冲液(PBS)基质中测定IC50值为10.2 ng/m L,线性检测范围:5.1~19.4 ng/m L,最低检测限2.8 ng/m L,变异系数为3.4%,与多种雌激素类结构类似物之间均无交叉反应,特异性良好。牛奶样品中测定IC50值:0.45 ng/m L,线性检测范围:0.24~0.79 ng/m L,最低检测限0.12ng/m L。结论酶热传感技术可以快速检测牛奶中的雌二醇残留,操作便捷、样品前处理简单,是一种高效、经济的适用于食品安全工作现场检测的方法。 展开更多
关键词 雌二醇 酶热传感器 牛奶
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金属有机框架材料在食品检测中应用的研究进展 被引量:9
15
作者 李光华 刘厦 +3 位作者 康凯 邓素梅 康维钧 高志贤 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第21期223-234,共12页
食品安全问题始终是社会关注的热点之一。为保障食品安全和人类健康,对食品污染物进行检测是控制和消除其所造成风险的关键。因此,开发灵敏、准确的食品污染物检测方法具有十分重要的意义。金属有机框架(metal-organic frameworks,MOFs... 食品安全问题始终是社会关注的热点之一。为保障食品安全和人类健康,对食品污染物进行检测是控制和消除其所造成风险的关键。因此,开发灵敏、准确的食品污染物检测方法具有十分重要的意义。金属有机框架(metal-organic frameworks,MOFs)是一类由金属离子或金属团簇与有机配体自组装而成的新型多孔晶体材料,具有孔隙率高、比表面积大、结构可调、功能多样等优点,越来越受到学界关注。MOFs可与多种检测技术、样品前处理技术相结合,在食品检测方面具有广泛的应用前景。本文综述了近些年MOFs及其复合物材料在食品检测中应用的研究进展,主要包括作为传感检测材料和作为色谱法样品前处理材料应用的研究,同时对其在食品安全领域中存在的应用问题进行了总结,并展望了其在食品安全领域未来的研究方向。 展开更多
关键词 金属有机框架 传感器 色谱法 样品前处理 食品检测
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基于适配体检测农药残留的技术进展 被引量:4
16
作者 姚子仪 贾雪霞 +3 位作者 黄惠 张晓雨 高志贤 杨仕平 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第2期430-438,共9页
随着多种农药地广泛使用,农药残留带来的健康问题越来越受到大众的关注。基于核酸适配体进行农药残留的检测技术在有毒有害物质检测方面发挥着重要作用。相比于抗体,适配体具有稳定性好、容易合成和修饰、靶标范围广等优势。近些年来,... 随着多种农药地广泛使用,农药残留带来的健康问题越来越受到大众的关注。基于核酸适配体进行农药残留的检测技术在有毒有害物质检测方面发挥着重要作用。相比于抗体,适配体具有稳定性好、容易合成和修饰、靶标范围广等优势。近些年来,发表了一些适配体与荧光检测、电化学检测、拉曼光谱等方法进行结合的新型方法。这些方法可以更加准确、灵敏地检测出农药残留量。其中有部分新方法实现了高通量检测。本文总结了近5年使用的核酸适配体进行农药残留检测的方法,同时比较了前几年的检测方法。 展开更多
关键词 适配体 农药残留 比色法 电化学法
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食品腐败相关气体检测研究进展 被引量:2
17
作者 周子萱 杨迎澳 +2 位作者 任舒悦 李双 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第6期31-39,共9页
食品在贮藏、运输和销售等环节中由于本身的酶促反应以及微生物的污染,容易发生腐败变质,不仅降低了食品的营养价值,而且其产生的腐败微生物及毒素等多种有毒有害物质也会对食品安全造成严重威胁,因此食品腐败检测对于降低食品安全风险... 食品在贮藏、运输和销售等环节中由于本身的酶促反应以及微生物的污染,容易发生腐败变质,不仅降低了食品的营养价值,而且其产生的腐败微生物及毒素等多种有毒有害物质也会对食品安全造成严重威胁,因此食品腐败检测对于降低食品安全风险具有重要意义。而食品腐败检测因其方法技术的限制,目前仍是食品安全领域极具挑战性的难题之一。检测食品腐败过程中产生的特征气体的技术方法具有便捷、高效、无损等优点,因此成为了当前食品腐败检测研究领域的热点。本文将对气体检测在食品腐败检测中的最新进展进行综述,对比色法、荧光、电子鼻以及电化学传感方法进行分类总结,重点阐述纳米材料传感在气体检测中的应用,及其与物联网、机器学习相结合的辅助分析方法,展望了气体检测在食品腐败检测行业中的发展趋势和即将面临的挑战,为食品腐败检测中气体检测的研究提供参考和启发。 展开更多
关键词 食品腐败 气体传感器 无损检测 食品安全
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地西泮单克隆抗体的制备及其酶联免疫吸附检测方法的建立 被引量:10
18
作者 李桂敏 宁保安 +3 位作者 白家磊 赵丽 赵翠娇 高志贤 《食品安全质量检测学报》 CAS 2014年第3期956-963,共8页
目的:制备地西泮(diazepam, DZP)单克隆抗体,并且对制备的抗体进行一系列性质鉴定。方法利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1-ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl) carbodi imide hydrochloride, EDC·HCl]法合成免疫原... 目的:制备地西泮(diazepam, DZP)单克隆抗体,并且对制备的抗体进行一系列性质鉴定。方法利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1-ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl) carbodi imide hydrochloride, EDC·HCl]法合成免疫原和包被原,用免疫原免疫Balb/C小鼠,当效价到1:16000以后取小鼠脾脏与SP2/0进行细胞融合。然后采用竞争结合双阳性两步筛选法,筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,并且利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞,采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化,利用酶联免疫吸附法、表面等离子共振仪(surface plasmon resonance, SPR)等方法对纯化后的抗体进行性质鉴定。结果成功合成了地西泮免疫原和包被原,免疫Balb/C小鼠7次后效价达到1:16000,最终制备出单克隆抗体,抗体解离常数(dissociation constants, KDs)为4.0985×10-7 mol/L,且与大部分结构类似物没有明显的交叉反应。应用此抗体建立间接竞争ELISA法,抗体的IC50=10.8 ng/mL,检测范围为0.45~862.00 ng/mL。结论本研究制备出了地西泮单克隆抗体,为地西泮的免疫学检测提供了有力的支持。 展开更多
关键词 地西泮 杂交瘤技术 单克隆抗体 酶联免疫吸附法
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采用磁性纳米微球增强信号的表面等离子体共振免疫传感系统检测水中莠去津残留 被引量:1
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作者 柳明 彭媛 +7 位作者 赵琢 翟自芹 刘磊 王华 张园 白家磊 宁保安 高志贤 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期688-695,共8页
将磁性纳米微球(MNP,表面修饰羧基的磁性四氧化三铁微球)与表面等离子体共振(SPR)免疫传感技术结合,以莠去津单克隆抗体(AT—mAb)与磁性纳米微球的偶联物(AT—mAb—MNP)作为传感识别元件,初步建立了一种用于饮用水中除草剂... 将磁性纳米微球(MNP,表面修饰羧基的磁性四氧化三铁微球)与表面等离子体共振(SPR)免疫传感技术结合,以莠去津单克隆抗体(AT—mAb)与磁性纳米微球的偶联物(AT—mAb—MNP)作为传感识别元件,初步建立了一种用于饮用水中除草剂莠去津残留检测的SPR信号增强免疫传感方法。通过对检测条件的优化,该方法对自来水中莠去津的检出限为0.89ng/mL(S/N=3),检测范围为8.62~7.18×10^3ng/mL,检测时间小于20min;在10~1000ng/mL添加水平内,莠去津的平均回收率为94%~102%,相对标准偏差(RSD)为5.1%~7.3%。磁性纳米微球的加入有效增强了SPR传感器的响应信号强度,提高了检测方法的灵敏度。本研究建立了一种快速、灵敏、准确的水中莠去津残留的检测方法,可为相应的现场检测技术和设备的研发提供技术基础. 展开更多
关键词 磁性纳米微球 表面等离子体共振 间接竞争免疫 莠去津 残留
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上转换发光免疫层析法快速检测牛奶中雌二醇 被引量:9
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作者 姜会聪 任舒悦 +6 位作者 王瑜 李巧凤 白家磊 彭媛 宁保安 孙思明 高志贤 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第3期119-123,共5页
建立定量快速检测雌二醇(E2)的上转换免疫层析技术。以上转换发光材料(UCP)为新型标记物,采用戊二醛法偶联单克隆抗体(m Ab),制备UPT-m Ab复合物,并以其作为探针,基于小分子竞争结合,建立免疫层析试纸条方法,并对试纸条性能进行评价。... 建立定量快速检测雌二醇(E2)的上转换免疫层析技术。以上转换发光材料(UCP)为新型标记物,采用戊二醛法偶联单克隆抗体(m Ab),制备UPT-m Ab复合物,并以其作为探针,基于小分子竞争结合,建立免疫层析试纸条方法,并对试纸条性能进行评价。方法特异性强,稳定性好,灵敏度高,最低检出限低至2.75 ng/m L,线性范围为5 ng/m L^2 000 ng/m L,回收率88.88%~103.5%,变异系数CV<10%。成功构建了上转换免疫层析法用于检测雌二醇,适用于现场快速检测,具有良好的经济价值和应用前景。 展开更多
关键词 上转换发光材料 免疫层析 雌二醇 间接竞争
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