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miR-142-5p靶向调控RPN2对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响及其机制
被引量：
1
1
作者
张士俊
王延民
+2 位作者
吴焕成
胡群亮
靳春杰
《山东医药》
CAS
2022年第13期45-49,55,共6页
目的探讨微小RNA-142-5p(miR-142-5p)靶向调控核糖蛋白2(RPN2)对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响及其机制。方法体外培养人胶质瘤细胞系U251、U87、T98G和正常星形胶质细胞株HA1800,采用RT-qPCR法检测各细胞miR-142-5p、RPN2 mRNA表达。借...
目的探讨微小RNA-142-5p(miR-142-5p)靶向调控核糖蛋白2(RPN2)对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响及其机制。方法体外培养人胶质瘤细胞系U251、U87、T98G和正常星形胶质细胞株HA1800,采用RT-qPCR法检测各细胞miR-142-5p、RPN2 mRNA表达。借助生物信息学软件TargetScan7.2预测miR-142-5p与RPN2的靶向结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证。取传15代、对数生长期、生长状态良好的人胶质瘤细胞,随机分为对照组、miR-142-5p组、RPN2组、miR-142-5p+RPN2组,对照组不予转染,miR-142-5p组、RPN2组、miR-142-5p+RPN2组分别转染miR-142-5p mimic或(和)RPN2过表达质粒,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,采用Transwell侵袭实验检测各组侵袭能力,采用Western blotting法检测各组Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、p-GSK3-β、GSK3-β、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达。结果U251、U87、T98G细胞miR-142-5p相对表达量明显低于HA1800细胞,RPN2 mRNA相对表达量明显高于HA1800细胞(P均<0.05);而U251、U87、T98G细胞miR-142-5p和RPN2 mRNA相对表达量两两比较P均>0.05。选择miR-142-5p相对表达量最低、RPN2 mRNA相对表达量最高的人胶质瘤U251细胞进行后续实验。经在线生物信息学软件TargetScan7.2预测,RPN2 mRNA的3′非编码区第93~99位碱基存在与miR-142-5p的靶向结合位点;双荧光素酶报告基因实验证实,miR-142-5p能够靶向抑制RPN2 mRNA表达。与对照组比较,miR-142-5p组培养48、72 h时细胞增殖活性明显降低,RPN2组细胞增殖活性明显增强(P均<0.05);与miR-142-5p组比较,RPN2组培养48、72 h时细胞增殖活性明显增强(P均<0.05);与RPN2组比较,miR-142-5p+RPN2组培养48、72 h时细胞增殖活性明显降低(P均<0.05)。与对照组比较,miR-142-5p组侵袭细胞数明显减少,RPN2组侵袭细胞数明显增多(P均<0.05);与miR-142-5p组比较,RPN2组和miR-142-5p+RPN2组侵袭细胞数明显增多(P均<0.05);与RPN2组比较,miR-142-5p+RPN2组侵袭细胞数明显减少(P<0.05)。与对照组比较,miR-142-5p组β-catenin、p-GSK3-β、N-cadherin、Vimentin相对表达量明显降低,E-cadherin相对表达量明显升高(P均<0.05);与对照组、miR-142-5p组比较,RPN2组β-catenin、p-GSK3-β、N-cadherin、Vimentin相对表达量明显升高,E-cadherin相对表达量明显降低(P均<0.05);与RPN2组比较,miR-142-5p+RPN2组β-catenin、p-GSK3-β、N-cadherin、Vimentin相对表达量明显降低,E-cadherin相对表达量明显升高(P均<0.05)。结论miR-142-5p能够靶向抑制RPN2表达,从而抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭,其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路传导有关。
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关键词
胶质瘤
微小RNA-142-5p
核糖蛋白2
细胞增殖
细胞侵袭
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职称材料
题名
miR-142-5p靶向调控RPN2对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响及其机制
被引量：
1
1
作者
张士俊
王延民
吴焕成
胡群亮
靳春杰
机构
天津市北辰医院神经外科
天津
医科大学总
医院
神经
外科
出处
《山东医药》
CAS
2022年第13期45-49,55,共6页
基金
天津市自然科学基金项目(18JCYBJC25100)。
文摘
目的探讨微小RNA-142-5p(miR-142-5p)靶向调控核糖蛋白2(RPN2)对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响及其机制。方法体外培养人胶质瘤细胞系U251、U87、T98G和正常星形胶质细胞株HA1800,采用RT-qPCR法检测各细胞miR-142-5p、RPN2 mRNA表达。借助生物信息学软件TargetScan7.2预测miR-142-5p与RPN2的靶向结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证。取传15代、对数生长期、生长状态良好的人胶质瘤细胞,随机分为对照组、miR-142-5p组、RPN2组、miR-142-5p+RPN2组,对照组不予转染,miR-142-5p组、RPN2组、miR-142-5p+RPN2组分别转染miR-142-5p mimic或(和)RPN2过表达质粒,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,采用Transwell侵袭实验检测各组侵袭能力,采用Western blotting法检测各组Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、p-GSK3-β、GSK3-β、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达。结果U251、U87、T98G细胞miR-142-5p相对表达量明显低于HA1800细胞,RPN2 mRNA相对表达量明显高于HA1800细胞(P均<0.05);而U251、U87、T98G细胞miR-142-5p和RPN2 mRNA相对表达量两两比较P均>0.05。选择miR-142-5p相对表达量最低、RPN2 mRNA相对表达量最高的人胶质瘤U251细胞进行后续实验。经在线生物信息学软件TargetScan7.2预测,RPN2 mRNA的3′非编码区第93~99位碱基存在与miR-142-5p的靶向结合位点;双荧光素酶报告基因实验证实,miR-142-5p能够靶向抑制RPN2 mRNA表达。与对照组比较,miR-142-5p组培养48、72 h时细胞增殖活性明显降低,RPN2组细胞增殖活性明显增强(P均<0.05);与miR-142-5p组比较,RPN2组培养48、72 h时细胞增殖活性明显增强(P均<0.05);与RPN2组比较,miR-142-5p+RPN2组培养48、72 h时细胞增殖活性明显降低(P均<0.05)。与对照组比较,miR-142-5p组侵袭细胞数明显减少,RPN2组侵袭细胞数明显增多(P均<0.05);与miR-142-5p组比较,RPN2组和miR-142-5p+RPN2组侵袭细胞数明显增多(P均<0.05);与RPN2组比较,miR-142-5p+RPN2组侵袭细胞数明显减少(P<0.05)。与对照组比较,miR-142-5p组β-catenin、p-GSK3-β、N-cadherin、Vimentin相对表达量明显降低,E-cadherin相对表达量明显升高(P均<0.05);与对照组、miR-142-5p组比较,RPN2组β-catenin、p-GSK3-β、N-cadherin、Vimentin相对表达量明显升高,E-cadherin相对表达量明显降低(P均<0.05);与RPN2组比较,miR-142-5p+RPN2组β-catenin、p-GSK3-β、N-cadherin、Vimentin相对表达量明显降低,E-cadherin相对表达量明显升高(P均<0.05)。结论miR-142-5p能够靶向抑制RPN2表达,从而抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭,其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路传导有关。
关键词
胶质瘤
微小RNA-142-5p
核糖蛋白2
细胞增殖
细胞侵袭
Keywords
glioma
microRNA-142-5p
riboprotein 2
cell proliferation
cell migration
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-142-5p靶向调控RPN2对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响及其机制
张士俊
王延民
吴焕成
胡群亮
靳春杰
《山东医药》
CAS
2022
1
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