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小鼠CCL21真核表达载体构建及趋化活性检测
1
作者
宫婷
李鸿立
巴一
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期125-129,共5页
目的:构建趋化因子CCL21的真核表达载体并表达蛋白,初步检测其趋化活性。方法:RT-PCR方法扩增CCL21 cDNA片段,并将扩增的片段插入pcDNA3.1真核表达载体,构建重组载体pcDNA3.1-m CCL21,将其转染到小鼠前胃癌细胞(mouse forestomach carci...
目的:构建趋化因子CCL21的真核表达载体并表达蛋白,初步检测其趋化活性。方法:RT-PCR方法扩增CCL21 cDNA片段,并将扩增的片段插入pcDNA3.1真核表达载体,构建重组载体pcDNA3.1-m CCL21,将其转染到小鼠前胃癌细胞(mouse forestomach carcinoma,MFC)。利用趋化小室法,检测表达产物针对树突状细胞(DC)趋化活性。结果:基因测序结果证实克隆产物为CCL21基因scya21b型,pcDNA3.1-mCCL21载体构建成功,Western印迹法检测到CCL21蛋白表达,转基因细胞的培养上清对树突状细胞具有显著趋化活性。结论:成功构建真核表达载体pcDNA3.1-m CCL21,其表达产物具有针对DC的趋化活性。
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关键词
趋化因子
CC
遗传载体
CCL21
载体构建
趋化活性
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职称材料
题名
小鼠CCL21真核表达载体构建及趋化活性检测
1
作者
宫婷
李鸿立
巴一
机构
天津医科大学附属天津肿瘤医院消化肿瘤内科
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期125-129,共5页
基金
天津市教委科研基金资助项目(20060111)
文摘
目的:构建趋化因子CCL21的真核表达载体并表达蛋白,初步检测其趋化活性。方法:RT-PCR方法扩增CCL21 cDNA片段,并将扩增的片段插入pcDNA3.1真核表达载体,构建重组载体pcDNA3.1-m CCL21,将其转染到小鼠前胃癌细胞(mouse forestomach carcinoma,MFC)。利用趋化小室法,检测表达产物针对树突状细胞(DC)趋化活性。结果:基因测序结果证实克隆产物为CCL21基因scya21b型,pcDNA3.1-mCCL21载体构建成功,Western印迹法检测到CCL21蛋白表达,转基因细胞的培养上清对树突状细胞具有显著趋化活性。结论:成功构建真核表达载体pcDNA3.1-m CCL21,其表达产物具有针对DC的趋化活性。
关键词
趋化因子
CC
遗传载体
CCL21
载体构建
趋化活性
Keywords
Chemokines,CC
Genetic vectors
CCL21
Vector construction
Electroporation
分类号
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
小鼠CCL21真核表达载体构建及趋化活性检测
宫婷
李鸿立
巴一
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
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