目的:探讨新型信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription,STAT3)抑制剂HJC0152对人头颈部鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)细胞株侵袭和迁移能力的影响及可能机制。方法:实验分为...目的:探讨新型信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription,STAT3)抑制剂HJC0152对人头颈部鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)细胞株侵袭和迁移能力的影响及可能机制。方法:实验分为二甲基亚砜(DMSO)组和HJC0152组。Western blot检测细胞总蛋白中STAT3、p-STAT3 Tyr705/Ser727、MMP-2/9、N/E-cadherin、TWIST1和vimentin蛋白表达水平及核浆蛋白中的STAT3和p-STAT3 Tyr705/Ser727蛋白表达水平;划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力;免疫荧光实验观察N/E-cadherin蛋白的表达和亚细胞定位。结果:HJC0152组细胞总蛋白和核浆蛋白p-STAT3 Tyr705表达水平均受到显著抑制,而STAT3、p-STAT3 Ser727未见明显变化;总蛋白MMP-2/9、N-cadherin、TWIST1和vimentin表达水平降低,E-cadherin水平升高。HJC0152组细胞向划痕中央移动的距离明显短于DMSO组,通过Transwell小室聚碳酸酯膜的细胞较DMSO组也显著减少。结论:HJC0152可有效抑制头颈鳞癌细胞STAT3 Tyr705的磷酸化,阻碍其发挥转录因子的作用,抑制其下游基因表达,从而干预HNSCC侵袭和迁移能力。展开更多
文摘目的:探讨肺腺癌转移相关转录因子1(metastasis-associated lungadenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对口腔鳞状细胞癌侵袭能力的影响。方法:应用RT-PCR方法检测MALAT1在口腔鳞状细胞癌组织标本、正常口腔黏膜组织标本以及口腔鳞癌细胞系中的表达;利用小干扰RNA(si RNA)敲低MALAT1在人舌鳞状细胞癌细胞Tscca中的表达;MTT法检测细胞的增殖能力变化;划痕实验、Transwell实验检测肿瘤细胞迁移、侵袭能力的变化;蛋白质印迹法检测肿瘤细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)等相关蛋白的表达变化;免疫荧光法检测细胞EMT相关蛋白表达变化;建立Tscca裸鼠皮下荷瘤模型,免疫组织化学染色法检测细胞增殖、侵袭相关蛋白表达。结果:MALAT1在口腔鳞癌组织中的表达明显高于正常组织。抑制MALAT1表达后细胞增殖率下降,细胞系划痕闭合减慢,通过Transwell小室聚碳酸酯膜的细胞数减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);基质金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)、神经钙黏素(N-cadherin)蛋白表达水平明显下调,钙黏着蛋白(E-cadherin)表达水平上调。免疫荧光显示,细胞神经钙黏素荧光强度明显减弱,钙黏着蛋白荧光强度显著增强。体内实验结果显示,MALAT1 si RNA治疗组裸鼠皮下荷瘤体积小于空白对照组及无义序列组(F=18.664,P<0.001);免疫组织化学染色结果示,MALAT1 si RNA治疗组中增殖核抗原(PCNA)、MMP-2、MMP-9表达减少。结论:MALAT1在口腔鳞癌组织中过表达,敲低人舌鳞癌细胞中MALAT1的表达可抑制舌鳞癌细胞的迁移、侵袭能力,MALAT1可能通过调控EMT促进口腔鳞癌的增殖和侵袭过程。
