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RNAi调下AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖
被引量：
5
1
作者
梅玫
任玉
+6 位作者
周旋
赵津辉
王凡
高伟
祁艳斌
姚智
蒋伶活
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期51-56,共6页
目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染...
目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染至乳腺癌MCF-7细胞。应用real-timePCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclinD1和P53的表达情况。应用MTT法、流式细胞术、2-D和3-DMatrigel实验检测MCF-7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力。结果:重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K介导的靶向AKT1,PI3KP85shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclinD1的表达亦下调,P53表达则上调。MTT法结果显示rAd5-siAKT1-siPI3K组细胞生长抑制率>50%,与未转染组和rAd5-siCtrl转染组比较,出现明显的G1/G0细胞周期阻滞;2-D和3-DMatrigel实验显示,未转染组和rAd5-siCtrl转染组细胞呈正常形态,而rAd5-siAKT1-siPI3K转染组细胞贴壁生长能力明显减低,细胞团块明显缩小。结论:靶向AKT1、PI3KP85亚基的shRNA技术可以抑制MCF-7细胞中AKT1、PI3KP85亚基的表达,抑制MCF-7细胞的体外增殖。
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关键词
RNA干扰
乳腺肿瘤
AKT1
PI3KP85
增殖
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职称材料
模拟缺血再灌注对L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的影响
被引量：
3
2
作者
李宏杰
董淑云
+1 位作者
张连元
畅继武
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1246-1248,共3页
目的探讨模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的发生机制。方法将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为对照组(C组)和模拟缺血再灌注组(IR组)。C组用模拟再灌注液培养,IR组用模拟缺血液培养4h后换再灌注液培养4h。观测细胞内超氧化物歧化...
目的探讨模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的发生机制。方法将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为对照组(C组)和模拟缺血再灌注组(IR组)。C组用模拟再灌注液培养,IR组用模拟缺血液培养4h后换再灌注液培养4h。观测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)及Ca2+含量的变化;采用MTT法检测线粒体功能;利用流式细胞仪和细胞DNA电泳检测细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测bcl-2及caspase-3蛋白表达情况,并结合自动图像分析系统对其结果进行半定量分析。结果IR组大鼠肌母细胞模拟缺血再灌注4h后细胞内XOD、Ca2+含量及凋亡百分率明显高于C组(287.88±8.47vs42±3.94U/gprot,1.547±0.017vs7.23±0.28lnMCF,7.23%±0.28%vs0.69%±0.07%,P<0.01),而细胞内SOD及线粒体呼吸功能明显低于C组(43.19±3.64vs248.52±11.26NU/mgprot,9.15%±0.49%vs100%,P<0.01),DNA电泳出现典型的梯状条带,bcl-2及caspase-3蛋白的表达均明显高于C组。结论模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞发生凋亡,其机制可能与氧化损伤、钙稳态失衡、线粒体损伤及caspase-3表达增强有关。
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关键词
再灌注损伤
细胞培养
细胞凋亡
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职称材料
题名
RNAi调下AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖
被引量：
5
1
作者
梅玫
任玉
周旋
赵津辉
王凡
高伟
祁艳斌
姚智
蒋伶活
机构
天津
大学
药物科学与技术学院
天津医科大学
天津
市基础医学
研究
中心
天津医科大学
附属
肿瘤
医院
头颈一科
天津医科大学第二附属医院泌尿研究所
天津医科大学
基础医学院免疫教研室
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期51-56,共6页
基金
国家重点基础研究发展规划(973计划)资助项目(No.2009CB918903)
国家自然科学基金资助项目(No.30670802)
天津市应用基础与前沿计划重点项目(No.09JCZDJC19700, No.10JCYBJC12500)~~
文摘
目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染至乳腺癌MCF-7细胞。应用real-timePCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclinD1和P53的表达情况。应用MTT法、流式细胞术、2-D和3-DMatrigel实验检测MCF-7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力。结果:重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K介导的靶向AKT1,PI3KP85shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclinD1的表达亦下调,P53表达则上调。MTT法结果显示rAd5-siAKT1-siPI3K组细胞生长抑制率>50%,与未转染组和rAd5-siCtrl转染组比较,出现明显的G1/G0细胞周期阻滞;2-D和3-DMatrigel实验显示,未转染组和rAd5-siCtrl转染组细胞呈正常形态,而rAd5-siAKT1-siPI3K转染组细胞贴壁生长能力明显减低,细胞团块明显缩小。结论:靶向AKT1、PI3KP85亚基的shRNA技术可以抑制MCF-7细胞中AKT1、PI3KP85亚基的表达,抑制MCF-7细胞的体外增殖。
关键词
RNA干扰
乳腺肿瘤
AKT1
PI3KP85
增殖
Keywords
RNA interference
breast neoplasms
AKT1
PI3K P85
proliferation
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
模拟缺血再灌注对L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的影响
被引量：
3
2
作者
李宏杰
董淑云
张连元
畅继武
机构
天津医科大学
第二
附属
医院
泌
尿
外科
研究所
华北煤炭医学院基础部病理生理教研室
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1246-1248,共3页
基金
河北省科学技术发展计划项目(052761866)
文摘
目的探讨模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的发生机制。方法将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为对照组(C组)和模拟缺血再灌注组(IR组)。C组用模拟再灌注液培养,IR组用模拟缺血液培养4h后换再灌注液培养4h。观测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)及Ca2+含量的变化;采用MTT法检测线粒体功能;利用流式细胞仪和细胞DNA电泳检测细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测bcl-2及caspase-3蛋白表达情况,并结合自动图像分析系统对其结果进行半定量分析。结果IR组大鼠肌母细胞模拟缺血再灌注4h后细胞内XOD、Ca2+含量及凋亡百分率明显高于C组(287.88±8.47vs42±3.94U/gprot,1.547±0.017vs7.23±0.28lnMCF,7.23%±0.28%vs0.69%±0.07%,P<0.01),而细胞内SOD及线粒体呼吸功能明显低于C组(43.19±3.64vs248.52±11.26NU/mgprot,9.15%±0.49%vs100%,P<0.01),DNA电泳出现典型的梯状条带,bcl-2及caspase-3蛋白的表达均明显高于C组。结论模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞发生凋亡,其机制可能与氧化损伤、钙稳态失衡、线粒体损伤及caspase-3表达增强有关。
关键词
再灌注损伤
细胞培养
细胞凋亡
Keywords
reperfusion injury,cell culture,apoptosis
分类号
R363.1 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNAi调下AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖
梅玫
任玉
周旋
赵津辉
王凡
高伟
祁艳斌
姚智
蒋伶活
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
模拟缺血再灌注对L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的影响
李宏杰
董淑云
张连元
畅继武
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
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职称材料
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