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MAGE的研究现状及展望 被引量:2
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作者 梁锐 王芳 畅继武 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第21期1257-1260,共4页
关键词 MAGE 肿瘤 转移
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模拟缺血再灌注对L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 李宏杰 董淑云 +1 位作者 张连元 畅继武 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1246-1248,共3页
目的探讨模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的发生机制。方法将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为对照组(C组)和模拟缺血再灌注组(IR组)。C组用模拟再灌注液培养,IR组用模拟缺血液培养4h后换再灌注液培养4h。观测细胞内超氧化物歧化... 目的探讨模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的发生机制。方法将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为对照组(C组)和模拟缺血再灌注组(IR组)。C组用模拟再灌注液培养,IR组用模拟缺血液培养4h后换再灌注液培养4h。观测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)及Ca2+含量的变化;采用MTT法检测线粒体功能;利用流式细胞仪和细胞DNA电泳检测细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测bcl-2及caspase-3蛋白表达情况,并结合自动图像分析系统对其结果进行半定量分析。结果IR组大鼠肌母细胞模拟缺血再灌注4h后细胞内XOD、Ca2+含量及凋亡百分率明显高于C组(287.88±8.47vs42±3.94U/gprot,1.547±0.017vs7.23±0.28lnMCF,7.23%±0.28%vs0.69%±0.07%,P<0.01),而细胞内SOD及线粒体呼吸功能明显低于C组(43.19±3.64vs248.52±11.26NU/mgprot,9.15%±0.49%vs100%,P<0.01),DNA电泳出现典型的梯状条带,bcl-2及caspase-3蛋白的表达均明显高于C组。结论模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞发生凋亡,其机制可能与氧化损伤、钙稳态失衡、线粒体损伤及caspase-3表达增强有关。 展开更多
关键词 再灌注损伤 细胞培养 细胞凋亡
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前列腺素E_1治疗急性肾功能衰竭34例 被引量:2
3
作者 史晓峰 张玥 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第3期667-668,共2页
关键词 急性肾功能衰竭 前列腺素E1 治疗 临床
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重组人干扰素α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)药物敏感性分析
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作者 李娜 牛瑞芳 +1 位作者 韩瑞发 孙二琳 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第3期75-77,共3页
通过BACTEC MGITTM 960全自动分枝杆菌培养鉴定/药敏仪对重组人干扰素α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)菌株进行利福平等10种抗菌药物的敏感性试验,以野生BCG作对照观察药物对重组BCG菌株活性的潜在影响.结果发现:重组人干扰素α-2b-卡介... 通过BACTEC MGITTM 960全自动分枝杆菌培养鉴定/药敏仪对重组人干扰素α-2b-卡介苗(hIFN-α-2b-BCG)菌株进行利福平等10种抗菌药物的敏感性试验,以野生BCG作对照观察药物对重组BCG菌株活性的潜在影响.结果发现:重组人干扰素α-2b-卡介苗在系统感染上对喹酮类的氧氟沙星、环丙沙星敏感,对氨基糖苷类药物的庆大霉素和卡那霉素耐药.在抗结核类药物中,除对吡嗪酰胺耐药外,对利福平等其他几种抗生素均敏感.因尿液回收率高,几乎所有的抗菌药物都对膀胱中的菌株有影响. 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 重组BCG 人干扰素Α-2B 免疫反应 耐药性
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人源化Fab段噬菌体抗体库的构建及初步鉴定 被引量:2
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作者 公倩 李常颖 +1 位作者 畅继武 朱铁虹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期646-650,共5页
目的:构建人天然Fab段噬菌体抗体库,为人源抗体的制备建立技术平台。方法:从正常健康人的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,构建噬菌体抗体库,酶切鉴定有无插入片段并测序分析,用IL-2和地高辛进行... 目的:构建人天然Fab段噬菌体抗体库,为人源抗体的制备建立技术平台。方法:从正常健康人的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,构建噬菌体抗体库,酶切鉴定有无插入片段并测序分析,用IL-2和地高辛进行富集筛选。结果:最终构建的抗体库库容约为8.4×107,酶切鉴定显示有插入片段,抗体库重组率是70%,DNA测序分析证实抗体重链属IgG亚类,轻链为λ链。用IL-2和地高辛进行三轮筛选,抗体库均得到了不同程度的富集。结论:成功构建了一个天然的人源化噬菌体抗体库,可用于下一步胰淀素人源化抗体的筛选、纯化和表达。 展开更多
关键词 噬菌体抗体库 抗体FAB段 人源化抗体
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胰淀素Fab抗体的筛选及初步鉴定 被引量:1
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作者 甄云凤 李常颖 +1 位作者 畅继武 朱铁虹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1112-1115,共4页
目的:从人天然Fab噬菌体抗体库中筛选胰淀素(amylin又称为胰岛淀粉样多肽)Fab抗体,测定其特异性及抗原结合活性。方法:以胰淀素为抗原,对抗体库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集筛选;将从人源噬菌体抗体库中筛选出的阳性克隆,... 目的:从人天然Fab噬菌体抗体库中筛选胰淀素(amylin又称为胰岛淀粉样多肽)Fab抗体,测定其特异性及抗原结合活性。方法:以胰淀素为抗原,对抗体库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集筛选;将从人源噬菌体抗体库中筛选出的阳性克隆,提取其质粒、切除gⅢ、自身环化并转入大肠杆菌中,以IPTG诱导表达可溶性抗体,最后用SDS-PAGE鉴定抗体表达情况、ELISA鉴定抗原结合活性和特异性。结果:成功筛选并表达了抗胰淀素的可溶性Fab抗体,经SDS-PAGE蛋白电泳,在相对分子质量约为47 kD处可见一蛋白条带。ELISA和Western blot证实了该Fab片段与胰淀素抗原的结合活性和特异性。结论:利用噬菌体抗体库技术获得了人源性的特异抗胰淀素Fab抗体,为临床进行下一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胰淀素 噬菌体抗体库 免疫球蛋白类 FAB 鉴定
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人源Fab噬菌体抗体库的构建与抗精氨酸加压素抗体的筛选
7
作者 董越华 胡占东 +3 位作者 公倩 李常颖 畅继武 朱铁虹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期146-149,共4页
目的:构建人源天然Fab噬菌体抗体库,筛选抗精氨酸加压素特异性抗体并进行初步鉴定。方法:从18位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA。利用RT-PCR扩增人Fab抗体基因片段,将其克隆至噬菌粒载体pComb3XSS内,构建人源天然Fab噬菌体抗体库... 目的:构建人源天然Fab噬菌体抗体库,筛选抗精氨酸加压素特异性抗体并进行初步鉴定。方法:从18位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA。利用RT-PCR扩增人Fab抗体基因片段,将其克隆至噬菌粒载体pComb3XSS内,构建人源天然Fab噬菌体抗体库。以固相化的精氨酸加压素为靶抗原对抗体库进行五轮筛选后,随机挑取50个单克隆进行phage-ELISA检测,阳性克隆行DNA测序分析。结果:成功构建库容为2.4×108的噬菌体抗体库,从中筛选到6株阳性克隆能够与精氨酸加压素特异性结合,其中阳性值最高的C4克隆行DNA测序分析证实其重链属IgG亚类,轻链为λ链。结论:构建大容量人源天然Fab抗体库,从中获得了特异性抗精氨酸加压素人源Fab抗体片段,有望为临床上精氨酸加压素的快速检测技术的建立奠定基础。 展开更多
关键词 精氨酸加压素 噬菌体抗体库 FAB段 筛选
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