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应用recA-RFLP调查洋葱伯克霍尔德菌医院血流感染暴发 被引量:6
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作者 吕琳 宋诗铎 +1 位作者 王玉宝 孙二琳 《中国感染控制杂志》 CAS 2007年第4期219-223,共5页
目的探讨聚合酶链反应-限制性内切酶多态性(PCR-RFLP)分析法调查洋葱伯克霍尔德菌医院感染暴发的价值。方法对分离自某医院心脏手术后发生医院血流感染患者的经API20NE条鉴定系统鉴定的28株洋葱伯克霍尔德菌进行recA基因PCR扩增,应用限... 目的探讨聚合酶链反应-限制性内切酶多态性(PCR-RFLP)分析法调查洋葱伯克霍尔德菌医院感染暴发的价值。方法对分离自某医院心脏手术后发生医院血流感染患者的经API20NE条鉴定系统鉴定的28株洋葱伯克霍尔德菌进行recA基因PCR扩增,应用限制性内切酶HaeⅢ对recA基因PCR扩增片段进行PCR-RFLP分析。同时采用微量肉汤稀释法和琼脂纸片扩散法进行药敏试验。结果全部洋葱伯克霍尔德菌医院血流感染临床株recA基因的PCR扩增阳性,PCR产物经HaeⅢ限制性内切酶酶切,出现一致的谱型,符合RFLP-J型,即B.stabilis(基因型Ⅳ)。28株菌对四环素、阿米卡星、庆大霉素耐药,对氟喹诺酮、碳青霉烯类、复方磺胺甲口恶唑、米诺环素、头孢曲松、头孢他啶、哌拉西林敏感,对头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、头孢氨噻肟的敏感性存在微小差异。结论此次医院血流感染暴发为洋葱伯克霍尔德菌B.stabilis(基因型Ⅳ)所致。recA基因的PCR-RFLP分型对洋葱伯克霍尔德菌医院感染暴发的调查及追踪溯源有重大价值。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德复合体 医院感染 血流感染 疾病暴发流行 PCR-RFLP
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抗菌药物预防剖宫产手术部位感染国内文献荟萃分析 被引量:26
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作者 高斌 陈静 +1 位作者 宋诗铎 曹武奎 《中国感染控制杂志》 CAS 2009年第3期173-177,共5页
目的 探讨剖宫产围手术期预防性使用抗菌药物策略对控制其手术部位感染和子宫内膜炎的影响。方法检索相关医学文献数据库,对抗菌药物预防剖宫产手术部位感染的临床随机对照研究进行收集、筛选、评价并提取数据进行荟萃分析。结果荟萃... 目的 探讨剖宫产围手术期预防性使用抗菌药物策略对控制其手术部位感染和子宫内膜炎的影响。方法检索相关医学文献数据库,对抗菌药物预防剖宫产手术部位感染的临床随机对照研究进行收集、筛选、评价并提取数据进行荟萃分析。结果荟萃分析表明,首剂术前0.5~2h或钳夹脐带后给予短期抗菌药物较术后长期使用抗菌药物预防剖宫产手术部位感染(OR=0.34,95%CI为0.24~0.48,P%0.05)和产后病率(OR:0.40,95%CI为0.32~0.48,P%0.05)的效果显著;对上述2种用药策略效果差异无论是在预防单纯选择性剖宫产术(OR=0.45,95%CI为0.11~1.83,P〉0.05)或是在选择/非选择性剖宫产术(OR=0.55,95%CI为0.16~1.96,P〉0.05)术后子宫内膜炎方面均无统计学意义。结论推荐术前0.5~2h或钳夹脐带后短期使用抗菌药物作为预防剖宫产手术相关感染的一项策略。 展开更多
关键词 剖宫产 抗菌药物 预防用药 手术部位感染 荟萃分析 循证医学 合理用药
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2株产气肠杆菌临床株对厄他培南耐药机制的研究 被引量:3
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作者 张肖 宋诗铎 +2 位作者 祁伟 王淑香 郭文学 《中国感染控制杂志》 CAS 2010年第6期408-413,共6页
目的研究2株产气肠杆菌临床株Ea293和Ea2880对厄他培南耐药的机制。方法采用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),应用K-B法检测菌株对美罗培南、亚胺培南及厄他培南的耐药性,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;聚合酶链反应(PCR)扩增碳青... 目的研究2株产气肠杆菌临床株Ea293和Ea2880对厄他培南耐药的机制。方法采用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),应用K-B法检测菌株对美罗培南、亚胺培南及厄他培南的耐药性,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;聚合酶链反应(PCR)扩增碳青霉烯酶基因(KPC,IMP-1、2组,VIM)和广谱及超广谱β-内酰胺酶基因(TEM,SHV,CTXM-1、2、9组ESBI.s),并进行序列分析;十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行细菌外膜蛋白分析,并对外膜蛋白基因OmpE36进行PCR扩增及序列分析。结果药物敏感试验显示,产气肠杆菌Ea293和Ea2880均对厄他培南耐药。PCR扩增4种碳青霉烯酶基因和5种广谱及超广谱β-内酰胺酶基因,仅Ea2880的SHV和CTX-M-9组ESBLs基因阳性,SHV基因的PCR产物测序为SHV-11型广谱酶。细菌外膜蛋白SDS-PAGE结果显示,与碳青霉烯类抗生素敏感的产气肠杆菌Eal885相比,Ea293和Ea2880均缺失42 kD左右的条带,即OmpE36。PCR扩增外膜蛋白基因OmpE36,Ea2880可见预期片段,DNA序列分析显示其与GenBank公布的产气肠杆菌标准株ATCC 13048的相似性为87%,氨基酸序列的相似性亦为87%;而Ea293未扩增出预期片段。结论产气肠杆菌临床株Ea293与Ea2880对厄他培南耐药的主要原因可能是外膜蛋白基因OmpE36缺失,同时Ea2880可能还有CTX-M-9组ESBLs参与。 展开更多
关键词 产气肠杆菌 厄他培南 碳青霉烯酶 超广谱Β-内酰胺酶 基因 外膜蛋白基因 序列分析 抗药性 微生物
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2株阴沟肠杆菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究 被引量:12
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作者 张肖 宋诗铎 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期303-306,314,共5页
目的研究2株阴沟肠杆菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法采用微量肉汤稀释法测定MIC,同时应用K-B法检测对亚胺培南、美罗培南及厄他培南的耐药性,用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR扩增检测碳青霉烯酶(blaKPC、blaIMP-1组... 目的研究2株阴沟肠杆菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法采用微量肉汤稀释法测定MIC,同时应用K-B法检测对亚胺培南、美罗培南及厄他培南的耐药性,用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR扩增检测碳青霉烯酶(blaKPC、blaIMP-1组、blaIMP-2组、blaVIM)编码基因和广谱及超广谱β-内酰胺酶(blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1组、blaCTX-M-2组、blaCTX-M-9组)编码基因;SDS-PAGE进行细菌外膜蛋白(Omp)分析,并对外膜蛋白基因ompF进行PCR扩增。结果药敏试验显示2株阴沟肠杆菌具有对广谱青霉素、第三、四代头孢菌素、碳青霉烯类、氟喹诺酮类、氨基糖甙类抗生素和酶抑制剂复合制剂的多重耐药性。PCR扩增4种碳青霉烯酶基因和5种广谱及超广谱β-内酰胺酶基因,其中一株阴沟肠杆菌TEM及CTX-M-9组ESBLs基因扩增阳性,其余基因扩增阴性。细菌外膜蛋白SDS-PAGE结果显示:与碳青霉烯类抗生素敏感的阴沟肠杆菌比较,2株碳青霉烯类抗生素耐药的阴沟肠杆菌均缺少分子量在38KDa左右的条带,即OmpF;且PCR扩增其外膜蛋白基因ompF均为阴性。结论 2株阴沟肠杆菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素的耐药机制主要与外膜蛋白OmpF的缺失有关。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌:多重耐药 碳青霉烯酶基因 ESBLS 外膜蛋白
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产ESBLs大肠埃希氏菌临床株EC98A7表型和基因型研究 被引量:1
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作者 郭庆兰 宋诗铎 +2 位作者 祁伟 郑东钧 郭文学 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期91-95,共5页
目的 研究大肠埃希氏菌多重耐药临床菌株EC98A7对超广谱β 内酰胺类抗生素的耐药机制。方法 采用K B法、双纸片协同试验、接合传递试验、质粒谱分析、PCR、PCR RFLP和DNA序列分析等方法分析EC98A7的表型及基因型。结果 EC98A7对头孢... 目的 研究大肠埃希氏菌多重耐药临床菌株EC98A7对超广谱β 内酰胺类抗生素的耐药机制。方法 采用K B法、双纸片协同试验、接合传递试验、质粒谱分析、PCR、PCR RFLP和DNA序列分析等方法分析EC98A7的表型及基因型。结果 EC98A7对头孢他啶等第三代头孢菌素和庆大霉素等抗生素高度耐药 ,并能将全部耐药表型通过一个大小约 80kb的质粒传递给受体株。双纸片协同试验证明EC98A7产ESBLs。PCR等证实EC98A7含有TEM型和CTX M型ESBLs。PCR RFLP显示TEM型ESBL含有E10 4K突变 ,无R16 4H突变。同源性分析表明 5 0 3bp的blaCTX M DNA片段与CTX M亚组 1同一性最高 ,与blaCTX M 3 相比仅有 1个核苷酸改变即A787G ,对应氨基酸改变为D2 39G。结论 大肠埃希氏菌多重耐药临床株EC98A7同时产TEM型及CTX M型两种ESBLs ,推测这与对超广谱 β 内酰胺类抗生素的高度耐药有关。 展开更多
关键词 ESBLS 大肠埃希氏菌 超广谱β-内酰胺类抗生素 庆大霉素 头孢菌素 耐药性
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