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GWAS和QTL联合分析在年龄相关性黄斑变性遗传学发病机制研究中的应用
1
作者 张蔚然 王森楠(综述) +1 位作者 李志清 张琰(审校) 《中华实验眼科杂志(中英文)》 北大核心 2025年第7期651-655,共5页
年龄相关性黄斑变性(AMD)严重危害老年人视觉健康,且近年来其发病率呈上升趋势。随着人口老龄化加剧,AMD发病率持续上升,探究其遗传学发病机制至关重要。全基因组关联研究(GWAS)已鉴定出大量与AMD相关的单核苷酸多态性,但多数位于非编码... 年龄相关性黄斑变性(AMD)严重危害老年人视觉健康,且近年来其发病率呈上升趋势。随着人口老龄化加剧,AMD发病率持续上升,探究其遗传学发病机制至关重要。全基因组关联研究(GWAS)已鉴定出大量与AMD相关的单核苷酸多态性,但多数位于非编码区,功能机制不明。通过揭示遗传变异对基因表达、蛋白质水平和代谢物丰度的调控作用,为解析GWAS发现的非编码变异的功能提供了强有力的工具。结合数量性状位点(QTL)可有效解释GWAS数据,同时可增大发现有统计学意义遗传变异位点的可能性。本综述总结了GWAS联合QTL数据的分析、整合研究,以期更好地理解基因变异对AMD发生和发展的影响,为寻找AMD的有效治疗靶点提供新思路。 展开更多
关键词 全基因组关联研究 数量性状位点 年龄相关性黄斑变性 视网膜
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膜联蛋白在动脉粥样硬化中的研究进展 被引量：4
2
作者 刘洋 王楠 +2 位作者 张琰 宋继洋 曹云山 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2017年第2期203-205,共3页
膜联蛋白亦称为钙磷脂结合蛋白,是一类钙离子依赖的膜磷脂结合蛋白超家族,其家族各成员主要以四聚体的结构形式存在,并具有极高的同源性。虽然膜联蛋白是依赖于钙离子的调节蛋白,但一些家族成员还受到酸碱度的调节而发生结构改变。膜联... 膜联蛋白亦称为钙磷脂结合蛋白,是一类钙离子依赖的膜磷脂结合蛋白超家族,其家族各成员主要以四聚体的结构形式存在,并具有极高的同源性。虽然膜联蛋白是依赖于钙离子的调节蛋白,但一些家族成员还受到酸碱度的调节而发生结构改变。膜联蛋白的编码基因具有高度保守性,首先发现于脊椎动物体内,随后发现,膜联蛋白基因广泛存在于原核和真核生物体内。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 膜联蛋白A1 膜联蛋白A2 膜联蛋白A5 细胞运动
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组织工程角膜上皮种子细胞的研究进展 被引量：1
3
作者 曹静洁 张琛 赵少贞 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期857-860,共4页
对于角膜缘干细胞（LSCs）缺乏导致的眼表疾病,角膜移植是较好的治疗方法,传统角膜移植术的开展受供体来源匮乏、术后排斥反应等因素的影响.构建组织工程角膜上皮进行移植很大程度上解决了供体来源和术后免疫排斥的问题,成为重要和有效... 对于角膜缘干细胞（LSCs）缺乏导致的眼表疾病,角膜移植是较好的治疗方法,传统角膜移植术的开展受供体来源匮乏、术后排斥反应等因素的影响.构建组织工程角膜上皮进行移植很大程度上解决了供体来源和术后免疫排斥的问题,成为重要和有效的治疗方法,而种子细胞的选择是手术成功的关键.随着组织工程技术和细胞培养技术的不断发展,组织工程角膜种子细胞方面的研究越来越多,种子细胞的可选择性也越来越大,如胚胎干细胞（ESCs）、LSCs等研究已经逐步展开.就目前体外重建组织工程角膜上皮研究中使用的种子细胞及其近年来的相关研究进展进行综述。 展开更多
关键词 角膜上皮/移植 组织工程/方法学 干细胞/细胞学 细胞分化 细胞培养 组织工程角膜上皮
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结膜下注射间充质干细胞对大鼠角膜移植物生存的影响 被引量：4
4
作者 李斐 张琰 +2 位作者 茹玉莎 刘会娟 赵少贞 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期440-445,共6页
背景 间充质干细胞（MSCs）已用于多种器官移植抗排斥反应的基础和临床研究.我们先前的研究表明,鼠尾静脉注射MSCs可延长大鼠角膜植片的存活时间,但治疗时MSCs的需求量较大且存在一定的全身不良反应.眼局部应用MSCs是否能够替代角膜移... 背景 间充质干细胞（MSCs）已用于多种器官移植抗排斥反应的基础和临床研究.我们先前的研究表明,鼠尾静脉注射MSCs可延长大鼠角膜植片的存活时间,但治疗时MSCs的需求量较大且存在一定的全身不良反应.眼局部应用MSCs是否能够替代角膜移植排斥反应的全身治疗尚不清楚. 目的 探讨结膜下注射骨髓MSCs对大鼠角膜移植排斥反应的作用.方法 从清洁级Wistar大鼠股骨和胫骨骨髓中分离获得MSCs进行培养和传代,以体外成骨细胞分化和脂肪细胞分化法进行鉴定,取第3代MSCs用于实验.将20只Wistar大鼠双眼角膜作为角膜供体植片,40只Lewis大鼠右眼作为受体植床,行同种异体穿透角膜移植术.应用随机数字表法将40只受体大鼠分为PBS对照组和MSCs治疗组,另取6只正常Lewis大鼠作为正常对照组.MSCs治疗组大鼠分别于角膜移植术后即刻和第3天结膜下注射含2＆#215;106 MSCs的PBS 0.1 ml,PBS对照组大鼠以同样的方法仅给予等容积PBS.各组大鼠术后每天裂隙灯显微镜下观察角膜植片的混浊、水肿和新生血管情况,并按角膜植片排斥反应标准进行评分.于术后第10天分别处死PBS对照组和MSCs治疗组各12只大鼠,取出术眼角膜组织,采用实时荧光定量PCR法检测Th1细胞相关炎性因子γ干扰素（IFN-γ）mRNA和白细胞介素-2（IL-2）mRNA及Th2细胞相关炎性因子IL-4 mRNA和IL-10 mRNA在角膜中的相对表达量;采用ELISA法检测角膜组织中Th2细胞相关因子IL-4和IL-10蛋白的质量浓度. 结果 培养的细胞生长良好,成骨细胞分化的细胞茜素红染色呈橘黄色,脂肪细胞分化的细胞油红O染色呈红色,证实为MSCs.角膜移植术后MSCs治疗组角膜植片存活时间为（11.8±1.6）d,长于PBS对照组的（9.6±1.4）d,差异有统计学意义（P=0.004）;MSCs治疗组大鼠角膜植片中IFN-γmRNA、IL-2 mRNA的相对表达量较PBS对照组下降,但2个组间差异均无统计学意义（均P＞0.05）,但IL-4 mRNA和IL-10 mRNA相对表达量明显高于PBS对照组,差异均有统计学意义（均P=0.00）.正常对照组、PBS对照组和MSCs治疗组大鼠角膜植片中IL-10蛋白质量浓度分别为（22.74±7.06）、（68.40±12.83）和（215.41±44.66） pg/ml,3个组间总体比较差异有统计学意义（F=55.06,P=0.00）,且MSCs治疗组大鼠植片中IL-10蛋白质量浓度明显高于PBS对照组及正常对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 结膜下注射MSCs可以延长大鼠异体穿透角膜移植术后植片的存活时间,这一作用可能是通过调节Th 1/Th2平衡,特别是上调Th2细胞因子而介导的. 展开更多
关键词 间充质干细胞移植 角膜移植 移植物存活/免疫 T淋巴细胞 Γ干扰素 白细胞介素 LEWIS大鼠
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眼底像血管管径测量与眼病 被引量：3
5
作者 王红星 韩倩 +2 位作者 张琰 于广委 李筱荣 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第2期197-200,共4页
眼底像血管管径的测量这一技术在近年来得到广泛应用,它利用计算机软件对数字化眼底照片进行分析,对照片中的血管直径进行测量。这种技术能够对视网膜血管管径的改变与多种眼病之间的关系进行评估。研究表明,眼底像血管管径受年龄、眼... 眼底像血管管径的测量这一技术在近年来得到广泛应用,它利用计算机软件对数字化眼底照片进行分析,对照片中的血管直径进行测量。这种技术能够对视网膜血管管径的改变与多种眼病之间的关系进行评估。研究表明,眼底像血管管径受年龄、眼部的生物学特性、个体的体育活动时间和雌激素水平等因素影响,并且同黄斑水肿、糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性、青光眼以及视网膜色素变性等眼病的发生、发展和预后密切相关。因此,通过测量视网膜血管管径的变化,不但可以协助分析罹患这些眼病的危险程度,还将为评估这些眼病对治疗的反应和预后提供可靠的信息。 展开更多
关键词 视网膜中央动脉等效管径 视网膜中央静脉等效管径 眼病
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α-黑素细胞刺激素对谷氨酸诱导的视网膜兴奋性毒性的保护作用 被引量：2
6
作者 刘冕 张琰 +4 位作者 刘勋 张丽娟 李盛来 王红星 李筱荣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期440-443,共4页
背景 视网膜中谷氨酸异常增高是主要致盲性眼病的基本病理机制之一,但目前仍缺乏一种针对谷氨酸诱导的视网膜兴奋性毒性的有效保护措施.研究证明腹腔注射α-黑素细胞刺激素（α-MSH）可拮抗谷氨酸诱导的大脑海马区神经元的凋亡,但其对... 背景 视网膜中谷氨酸异常增高是主要致盲性眼病的基本病理机制之一,但目前仍缺乏一种针对谷氨酸诱导的视网膜兴奋性毒性的有效保护措施.研究证明腹腔注射α-黑素细胞刺激素（α-MSH）可拮抗谷氨酸诱导的大脑海马区神经元的凋亡,但其对视网膜疾病的保护作用尚未证实. 目的 研究α-MSH对谷氨酸引起的视网膜兴奋性毒性的保护作用. 方法 用胚胎第9天（E9）的鸡视网膜建立组织块培养体系.分别收集体外培养第3、5、7天的视网膜组织块及第12、14、16天（E12、E14、E16）的鸡胚视网膜各3块,进行常规苏木精-伊红染色,观察各标本的视网膜形态及组织结构,并用real-time PCR法分别检测不同培养时间点视网膜组织块中α-MSH受体（MCRs）表达量的动态变化.将视网膜组织块分为谷氨酸刺激组、α-MSH＋谷氨酸刺激组以及正常培养组,分别用谷氨酸及α-MSH＋谷氨酸处理48 h,正常培养组未做处理,用TUNEL染色法检测各组视网膜组织块中细胞凋亡情况,并进行定量分析；real-time PCR法检测各组视网膜组织块中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达. 结果 培养3、5、7d视网膜组织块中各层组织结构与E12、E14和E16的视网膜组织结构相似.MC1R mRNA在E9、E12、E14和E16鸡视网膜中的表达量明显低于出生后第1天（P1）,差异均有统计学意义（均P=0.000）；MC5R mRNA在E9的表达量明显低于E12及E14,差异均有统计学意义（均P=0.000）,从E14至P1则逐渐降低；而MC1R mRNA和MC5R mRNA在培养不同时间视网膜组织块中的表达呈现同样的规律.TUNEL染色显示,谷氨酸刺激鸡胚视网膜组织48 h后,视网膜内核层和神经节细胞层细胞大量凋亡,外核层亦有少量凋亡细胞.DAPI染色结果表明,视网膜各层排列紊乱,但α-MSH＋谷氨酸刺激组视网膜结构比较规则.定量分析结果表明,谷氨酸刺激组鸡胚视网膜每张切片的平均凋亡细胞数量为（601±24）个,α-MSH＋谷氨酸刺激组为（62±16）个,正常对照组为（72±13）个,各组凋亡细胞数量总体比较差异有统计学意义（F=1422.890,P=0.000）；α-MSH＋谷氨酸刺激组凋亡细胞数量明显少于谷氨酸刺激组,差异有统计学意义（P=0.000）.谷氨酸刺激组视网膜组织块中GFAP mRNA的相对表达量为2.23±0.06,α-MSH＋谷氨酸刺激组为1.14±0.15,正常对照组为1.05±0.04,组间总体差异有统计学意义（F=82.216,P=0.000）.谷氨酸刺激组GFAP mRNA的表达量是正常对照组的2.1倍,差异有统计学意义（P=0.000）.α-MSH＋谷氨酸刺激组的GFAP的表达量较谷氨酸刺激组显著下调,差异有统计学意义（P=0.000）,但与正常对照组相比差异无统计学意义（P=0.553）. 结论 α-MSH在视网膜组织块中大幅度降低谷氨酸诱导的兴奋性毒性,这种保护作用可能是通过抑制谷氨酸诱导的胶质细胞反应性增生而引起的. 展开更多
关键词 Α-黑素细胞刺激素 视网膜 谷氨酸 兴奋性毒性 凋亡
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大鼠复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎眼部炎症和病理特征分析 被引量：4
7
作者 郑慧 张晓敏 +4 位作者 粘红 张灵君 刘勋 Hui Shao 李筱荣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期642-646,共5页
背景目前用于自身免疫性葡萄膜炎的实验研究动物模型多为单次发作性葡萄膜炎，与临床上自身免疫性葡萄膜炎患者反复发作导致的眼部严重组织形态学和功能学改变的自然病程并不完全相符。建立复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）模型... 背景目前用于自身免疫性葡萄膜炎的实验研究动物模型多为单次发作性葡萄膜炎，与临床上自身免疫性葡萄膜炎患者反复发作导致的眼部严重组织形态学和功能学改变的自然病程并不完全相符。建立复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）模型对临床研究具有重要意义。目的建立大鼠复发性EAU动物模型，动态观察眼部炎症和病理特点，并分析其眼部白细胞介素-17（IL-17）的表达。方法采用光感受器间维生素A类结合蛋白1177—1191多肽片段（IRBP1177—1191，R16）注射于9只SPF级Lewis大鼠皮下进行免疫，10d后分离淋巴结及脾脏T细胞，体外R16刺激下培养2d。将24只SPF级Lewis大鼠按随机数字表法分为正常组和造模后1、2、3个月组，每组6只。将制备的T细胞悬液通过尾静脉注射法注入模型组大鼠体内，建立复发性EAU模型。注射后每天在裂隙灯显微镜下观察大鼠眼部炎症表现，依据Caspi炎症反应分级标准进行评分。分别于造模后1、2、3个月处死动物后制备视网膜切片，并行苏木精-伊红染色，观察视网膜组织中炎性细胞浸润情况和视网膜厚度的改变；采用免疫组织化学法检测IL-17A在各组大鼠视网膜中的表达，并计算阳性表达的评分。结果R16特异性T细胞注射后第4天大鼠前房出现不同程度的混浊，炎症评分为2分。第6天前房重度混浊，评为3分；至第10天大鼠眼前节恢复正常，但造模后2个月内炎症复发4—5次，且大鼠一侧眼发病而对侧眼可正常，与人自身免疫性葡萄膜炎的自然病程极为相似。视网膜组织病理学检查发现，造模后1、2、3个月组随着注射时间的延长，炎性细胞浸润逐渐减少。与正常组大鼠比较，造模后1、2、3个月组大鼠视网膜全层、外核层及内核层逐渐变薄，4个组间的总体比较差异均有统计学意义（F=20．46、288．40、4．43，均P=0．00）；正常组及造模后1、2、3个月组大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）数分别为（231．27±15．36）、（225．36±17．79）、（132．18±9．39）和（67．45±11．90）个，显示造模后随着时间的延长，RGCs逐渐减少，差异有统计学意义（F=68．94，P=0．00）。正常组及造模后1、2、3个月组大鼠视网膜中IL-17表达评分分别为（0．64±0．17）、（1．92±0．19）、（1．17±0．23）和（0．83±0．23）分，显示造模后大鼠视网膜中IL-17表达明显增强，差异有统计学意义（F=64．10，P=0．00）。结论利用R16特异性T细胞可成功诱导大鼠的复发性EAU模型，Th17可能参与疾病的整个过程。 展开更多
关键词 葡萄膜炎 复发性 实验性 免疫 自身 动物模型 大鼠
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