不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株转移相关microRNAs的筛选研究 被引量：2

1

作者 鲁为山 李书军 +5 位作者 刘彬 李洋 罗猛 孙丽亚 尤嘉琮 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第11期835-840,共6页

背景与目的微小RNA(microRNAs,miRNAs)参与调节肿瘤发生发展的多个过程,包括细胞的分裂增殖、细胞周期、凋亡、血管形成、侵袭和转移等。本研究应用miRNA芯片检测具有高低不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株L9981和NL9980的miRNA表达谱,从... 背景与目的微小RNA(microRNAs,miRNAs)参与调节肿瘤发生发展的多个过程,包括细胞的分裂增殖、细胞周期、凋亡、血管形成、侵袭和转移等。本研究应用miRNA芯片检测具有高低不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株L9981和NL9980的miRNA表达谱,从中筛选出与大细胞肺癌转移相关的miRNAs。方法收集L9981和NL9980细胞,抽提总RNA进行CY3标记,将标记RNA在miRNA芯片上进行杂交反应。通过数据统计分析,筛选出表达明显差异的miRNAs。应用Real-timePCR验证芯片结果,并应用生物信息学方法预测靶基因。结果在不同转移潜能人大细胞肺癌L9981和NL9980细胞株中共筛选到22个表达明显差异的miRNAs。与NL9980相比,在L9981中有13个miRNAs表达上调,9个表达下调。Real-timePCR验证miR-125a-3p在细胞中的表达水平与芯片结果趋势一致,预测其靶基因可能为胰岛素样生长因子2。结论筛选得到与大细胞肺癌转移相关的miRNA表达谱。 展开更多

关键词 肺肿瘤 细胞系 转移 微小RNA

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肺癌转移进展 被引量：36

2

作者 刘红雨 陈军 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第1期40-42,共3页

肺癌的发病率和死亡率一直居高不下，肺癌患者的预后一直未得到有效提高。原因是因为肺癌是一种非常复杂的肿瘤，而肺癌的转移是肺癌的恶性标志和特征，也是导致治疗失败和患者死亡的主要原因。约30％的患者在诊断时就已有远处转移，50... 肺癌的发病率和死亡率一直居高不下，肺癌患者的预后一直未得到有效提高。原因是因为肺癌是一种非常复杂的肿瘤，而肺癌的转移是肺癌的恶性标志和特征，也是导致治疗失败和患者死亡的主要原因。约30％的患者在诊断时就已有远处转移，50-60％在治疗过程中发生远处转移，80—90％的肺癌患者死亡是由转移引起的。因此，肺癌的转移是一个重大的难题。 展开更多

关键词 肺癌转移 肺癌患者 治疗失败 远处转移 死亡率 发病率

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肺癌分子诊断与分子分期研究进展 被引量：8

3

作者 吴志浩 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第1期34-39,共6页

肺癌已成为世界范围内最主要的肿瘤死亡原因，大约31％与癌症相关的死亡是由肺癌造成的。在世界范围内，肺癌患者的5年存活率也只有大约15％。目前肺癌低存活率主要在于基于症状的诊断方法对发现早期肺癌并不十分有效，3／4的病人在确... 肺癌已成为世界范围内最主要的肿瘤死亡原因，大约31％与癌症相关的死亡是由肺癌造成的。在世界范围内，肺癌患者的5年存活率也只有大约15％。目前肺癌低存活率主要在于基于症状的诊断方法对发现早期肺癌并不十分有效，3／4的病人在确诊时肺癌已发生转移。若能在早期检测到肺癌病变，病人5年存活率可提高到60-80％。第十二届肺癌大会已圆满结束，来自不同国家的科学家呈现了许多早期诊断的工作和研究。 展开更多

关键词 肺癌患者 分子分期 分子诊断 5年存活率 死亡原因 世界范围 早期肺癌 诊断方法

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肺癌基础研究和临床治疗的“个体化”时代——第十二届肺癌大会评述 被引量：2

4

作者 周清华 吴志浩 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第1期1-3,共3页

第十二届世界肺癌大会于2007年9月2日-6日在韩国首都首尔举行，本次大会的的最大特点是与会者无处无时不感受到肺癌“个体化”时代不是即将来临，而是我们已经确确实实地进入了肺癌的“个体化”时代。本次大会给我们的最新信息是：随着... 第十二届世界肺癌大会于2007年9月2日-6日在韩国首都首尔举行，本次大会的的最大特点是与会者无处无时不感受到肺癌“个体化”时代不是即将来临，而是我们已经确确实实地进入了肺癌的“个体化”时代。本次大会给我们的最新信息是：随着人类基因组计划的完成和后基因组计划的即将完成，人们不仅可以应用基因组计划和后基因组计划的成果探讨肺癌发生发展、侵袭转移，血管生成， 展开更多

关键词 “个体化” 肺癌 临床治疗 后基因组计划 人类基因组计划 侵袭转移 血管生成

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肺癌相关单核苷酸多态性的研究进展 被引量：1

5

作者 滑峰 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第2期156-164,共9页

肺癌是目前全球范围内对人类健康威胁最大的恶性肿瘤之一,关于肺癌的病因学、预防、诊断、治疗等研究已经成为世界各国的重要课题。已有研究表明遗传因素在肺癌的发生、发展、治疗反应、预后等中具有重要作用，

关键词 单核苷酸多态性 肺癌 治疗反应 恶性肿瘤 人类健康 遗传因素 病因学

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hOGG1基因Ser326Cys多态性与肺癌易感性的meta分析研究 被引量：4

6

作者 钱乾 刘仍允 +3 位作者 雷哲 尤嘉琮 周清华 张洪涛 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第3期205-210,共6页

背景与目的就全世界范围内而言,肺癌是一种常见疾病。人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(human8-hydrox-yguanine glycosylase,hOGG1)是一种DNA修复酶,它能特异切除8-羟基鸟嘌呤(8-dihydro-8-oxoguanine,8-OH-G),对损伤的DNA进行修复。hOGG1Ser326Cy... 背景与目的就全世界范围内而言,肺癌是一种常见疾病。人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(human8-hydrox-yguanine glycosylase,hOGG1)是一种DNA修复酶,它能特异切除8-羟基鸟嘌呤(8-dihydro-8-oxoguanine,8-OH-G),对损伤的DNA进行修复。hOGG1Ser326Cys基因多态性与癌症易感性的关系一直是研究的热点,而该多态性与肺癌易感性的关系尚存在争议。本研究采用meta分析旨在更好地探讨hOGG1Ser326Cys多态性与肺癌易感性之间的关系。方法使用MEDLINE数据库检索2010年11月以前的相关文献,按照纳入标准,全面搜索含有研究hOGG1Ser326Cys多态性与肺癌易感性相关的信息。由至少两位评论员做独立文献筛选和资料提取,并交叉审核。使用STATA10.1软件进行统计分析。结果根据检索条件,共有22篇文献(包括8,575例肺癌患者和9,484名正常对照个体)被纳入当前的meta分析。分析结果表明22项研究的结果存在明显异质性,当排除不符合Hard-Weinberg平衡定律的两篇文献后,其余的文献呈现出较好的同质性。与hOGG1Ser326相比,Cys326基因型明显增加了肺癌发病风险(OR=1.24,95%CI:1.10-1.39,P<0.001)。这种正相关在亚洲人群和医院来源的样本中尤为明显(OR=1.28,95%CI:1.11-1.49;OR=1.26,95%CI:1.09-1.46)。结论 hOGG1Ser326Cys多态性与肺癌易感性之间存在明显相关性,Cys326基因型能明显增加肺癌发病风险。 展开更多

关键词 HOGG1 肺肿瘤 易感性 META分析

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非小细胞肺癌患者hOGG1基因启动子区域突变的研究 被引量：1

7

作者 刘霞 赵军 +4 位作者 刘仍允 雷哲 尤嘉琮 周清华 张洪涛 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第3期199-204,共6页

背景与目的 8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(8-hydroxygumine DNA glycosylase1,OGG1)是一种DNA修复酶,可以从DNA切除修复8-羟基鸟嘌呤(8-dihydro-8-oxoguanine,8-OH-G)。人类OGG1基因(hOGG1)的多态性可能会改变酶的活性而影响个体修复损伤DNA... 背景与目的 8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(8-hydroxygumine DNA glycosylase1,OGG1)是一种DNA修复酶,可以从DNA切除修复8-羟基鸟嘌呤(8-dihydro-8-oxoguanine,8-OH-G)。人类OGG1基因(hOGG1)的多态性可能会改变酶的活性而影响个体修复损伤DNA的能力,促进癌变。然而,hOGG1基因启动子区域的突变与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的关系尚不明晰。我们拟探讨hOGG1基因启动子区域的突变与NSCLC发生发展的潜在关系。方法选取苏州大学附属第一医院2003年1月-2005年12月新鲜手术切除的40例NSCLC组织标本,采用PCR-SSCP和直接测序的方法检测NSCLC及其对应的癌旁组织中hOGG1基因启动子区域的突变。结果在40例NSCLC患者中未发现hOGG1基因启动子区域的异常突变,但发现单核苷酸多态位点rs159153与TNM分期明显相关(P=0.008);同时发现吸烟者中淋巴结转移率明显较低(P=0.034)。结论单核苷酸多态位点rs159153和吸烟史可能对NSCLC的侵袭和转移潜在性提供预测。 展开更多

关键词 肺肿瘤 PCR-SSCP hOGG1基因 突变

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肺癌基因治疗现状与展望 被引量：11

8

作者 祖玲玲 刘红雨 +1 位作者 陈军 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第9期758-762,共5页

肺癌是当今发生率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,根据病理和临床特征,可以分为小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）两大类[1]。其中SCLC约占肺癌发病总数的16.8%,而NSCLC约占80... 肺癌是当今发生率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,根据病理和临床特征,可以分为小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）两大类[1]。其中SCLC约占肺癌发病总数的16.8%,而NSCLC约占80.4%[2]。由于肺癌被诊断发现时往往已属晚期,导致患者的5年生存率往往低于10%;随着肺癌诊断和治疗技术的进步,目前肺癌的5年生存率可提高到近15%。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 基因治疗 5年生存率 CELL LUNG 肺癌诊断 恶性肿瘤 临床特征

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LKB1-AMPK-mTOR信号传导通路在肿瘤中的研究进展 被引量：19

9

作者 张霞 孙琳琳 钟殿胜 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第8期685-688,共4页

肿瘤可以认为是一种基因疾病,其中癌基因的激活和抑癌基因的失活是肿瘤发生、发展过程中最为关键的环节之一。近年来,一个新的抑癌基因LKB1,又名STK11（serine threonine protein kinase11）,在肿瘤中的作用引起了越来越多的关注。

关键词 肿瘤发生 信号传导通路 protein 抑癌基因 基因疾病 LKB1

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尼古丁及尼古丁乙酰胆碱受体在肺癌发生发展过程中的作用 被引量：6

10

作者 郭丽丽 吴志浩 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第9期753-757,共5页

肺癌是目前世界上最常见的癌症之一,约占所有癌症病例的15%,而吸烟是目前公认的引起肺癌的主要危险因素之一,在发展中国家,约80%的肺癌病例与吸烟有关[1]。肺癌的预后总体上仍然不是很乐观,男性的5年生存率为6%-14%,女性为7%-18%[2]。... 肺癌是目前世界上最常见的癌症之一,约占所有癌症病例的15%,而吸烟是目前公认的引起肺癌的主要危险因素之一,在发展中国家,约80%的肺癌病例与吸烟有关[1]。肺癌的预后总体上仍然不是很乐观,男性的5年生存率为6%-14%,女性为7%-18%[2]。在香烟烟雾约4,000多种化学物质中,已有60多种被确定为致癌物,它们大多通过与DNA相互作用,导致DNA加合物的形成,从而引起细胞中遗传物质或基因的改变。尼古丁是烟草的主要成分之一,其作用主要是导致吸烟者的成瘾性。 展开更多

关键词 尼古丁乙酰胆碱受体 肺癌 DNA加合物 生发 发展中国家 5年生存率 吸烟者 危险因素

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肺癌的遗传学与分子生物学最新进展——第十二届世界肺癌大会回顾 被引量：3

11

作者 徐克 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第1期29-33,共5页

“第十二届世界肺癌大会”于2007年9月2—6日在韩国首都首尔召开，会议的主题是“开创肺癌防治的新纪元”。有来自全球67个国家约5000名肺癌防治领域著名专家、学者参加了这次国际肺癌领域的学术盛会。会议就控烟与肺癌防治、肺癌的外... “第十二届世界肺癌大会”于2007年9月2—6日在韩国首都首尔召开，会议的主题是“开创肺癌防治的新纪元”。有来自全球67个国家约5000名肺癌防治领域著名专家、学者参加了这次国际肺癌领域的学术盛会。会议就控烟与肺癌防治、肺癌的外科手术治疗、化疗和放疗、分子靶向治疗等临床和基础研究领域的最新进展进行了研讨。本文将就在肺癌的遗传学及分子生物学方面的最新研究进展作一下回顾。 展开更多

关键词 分子生物学 遗传学 肺癌 世界 外科手术治疗 分子靶向治疗 防治

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肺癌中EML4-ALK融合基因的存在状态及生物学功能 被引量：2

12

作者 杨统 刘红雨 陈军 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2012年第2期112-116,共5页

肺癌是当前世界上最常见的恶性肿瘤,主要包括小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）两类,而NSCLC约占肺癌总数的80%。尽管外科手术技术不断提高,化疗新药不断上市并进入临床应用,

关键词 非小细胞肺癌 生物学功能 存在状态 融合基因 外科手术技术 cell LUNG NSCLC

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肿瘤相关成纤维细胞促进肿瘤侵袭转移的作用机制 被引量：15

13

作者 李学勤 徐克 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期386-392,共7页

肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤微环境中最主要的成分之一,在肿瘤的发生发展中发挥着必不可少的作用。骨髓和脂肪的局部组织固有成纤维细胞及间充质干细胞是CAFs来源的主要前体细胞。大量研究表明,CAFs... 肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤微环境中最主要的成分之一,在肿瘤的发生发展中发挥着必不可少的作用。骨髓和脂肪的局部组织固有成纤维细胞及间充质干细胞是CAFs来源的主要前体细胞。大量研究表明,CAFs并不作为单独细胞在肿瘤周围存在,而是和肿瘤细胞相互作用,促进肿瘤的生长与存活并维持其恶性倾向。肿瘤细胞可以影响CAFs前体的招募,并诱导正常成纤维细胞活化为CAFs;同时,CAFs可以分泌多种细胞因子、生长因子和细胞外基质蛋白质,促进肿瘤细胞的增殖、耐药及侵袭转移,从而影响肿瘤的预后。CAFs还参与血管淋巴管的生成、细胞外基质重塑、免疫抑制以及肿瘤细胞上皮间质转化等有利于肿瘤发生发展的外源性途径,为肿瘤细胞提供了一个良好的微环境。大量研究显示,研发靶向CAFs的药物可以中断其与肿瘤细胞之间的联系,从而抑制肿瘤的生长和转移。因此,深入了解CAFs促肿瘤的作用机制将有利于肿瘤治疗新靶点的发现。本文将对CAFs促进肿瘤侵袭转移的作用机制加以综述。 展开更多

关键词 肿瘤相关成纤维细胞 转移 血管生成 基质重塑 免疫抑制

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慢病毒载体及其研究进展 被引量：70

14

作者 孟凡荣 陈琛 +1 位作者 万海粟 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期870-876,共7页

慢病毒载体(lentivirus vector,LV)是目前分子及细胞生物实验中非常有效的工具,在基因转染方面有着许多独特的优势,例如,对细胞是否处于有丝分裂期没有特别的要求,基因转染效率高,可容纳较大基因片段等。本文将就慢病毒载体的来源、分... 慢病毒载体(lentivirus vector,LV)是目前分子及细胞生物实验中非常有效的工具,在基因转染方面有着许多独特的优势,例如,对细胞是否处于有丝分裂期没有特别的要求,基因转染效率高,可容纳较大基因片段等。本文将就慢病毒载体的来源、分子特征及研究进展等进行综述。 展开更多

关键词 慢病毒载体 病毒包装 RNA干扰 应用

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转录因子Snail与肿瘤的上皮细胞间质化 被引量：1

15

作者 李林 吴志浩 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第9期749-752,共4页

肿瘤对人体的危害极大,其引起的死亡大多是因为肿瘤转移。肿瘤的转移是一个十分复杂的过程,它是多种基因参与的结果,不仅仅是遗传性状的改变,还包括细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的相互作用。一些在胚胎发育中起着重要作用的基... 肿瘤对人体的危害极大,其引起的死亡大多是因为肿瘤转移。肿瘤的转移是一个十分复杂的过程,它是多种基因参与的结果,不仅仅是遗传性状的改变,还包括细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的相互作用。一些在胚胎发育中起着重要作用的基因常常在癌组织中重新激活,提示其可能有促进肿瘤发生和/或转移的作用。肿瘤的浸润和转移是通过细胞粘附分子的改变而实现的。 展开更多

关键词 肿瘤转移 细胞间质 转录因子 细胞粘附分子 上皮 细胞外基质 浸润和转移 遗传性状

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MAPK通路支架蛋白KSR的研究进展 被引量：1

16

作者 杨雪琴 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第4期587-590,共4页

Ras信号级联在细胞生长和发育的信号传导中具有重要作用,Ras通路的一个主要途径就是MAPK通路,包括胞浆激酶Raf、MEK以及MAPK等。20世纪90年代中期Kornfeld、Sundaram和Therrien等[1-3]于3个不同实验室在果蝇及线虫中发现了一个新的基因,

关键词 KSR 激酶活性 结构域 支架蛋白 MAPK 通路

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MicroRNAs在肿瘤相关成纤维细胞促进肿瘤发展进程中的作用 被引量：4

17

作者 郭雪茹 徐克 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1181-1188,共8页

肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境(TME)中最主要的细胞组分之一,在肿瘤发生、进展中发挥重要作用。微小RNA(miRNAs)参与CAFs的转化与代谢重编程,并可调控CAFs的干性及其介导的肿瘤细胞增殖、侵袭和化疗耐药等机制,在CAFs的形成和C... 肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境(TME)中最主要的细胞组分之一,在肿瘤发生、进展中发挥重要作用。微小RNA(miRNAs)参与CAFs的转化与代谢重编程,并可调控CAFs的干性及其介导的肿瘤细胞增殖、侵袭和化疗耐药等机制,在CAFs的形成和CAFs对肿瘤的促进作用中发挥重要功能;而CAFs释放的miRNAs可作为肿瘤的诊断、预后及用药选择的参考指标。因此探索miRNAs在肿瘤细胞与CAFs相互作用中的功能,揭示其作用机制,对于理解肿瘤的发生和发展具有重要意义;同时也可为新的肿瘤治疗策略提供研究方向。本文将对miRNAs在CAFs的形成及CAFs对肿瘤细胞调控中的作用加以介绍。 展开更多

关键词 MICRORNA 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞 肿瘤进展 细胞因子

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支气管肺类癌的诊断及治疗 被引量：5

18

作者 韦森 李昕 +1 位作者 陈军 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第9期733-738,共6页

支气管肺类癌是罕见的肺部肿瘤,总体生长缓慢、预后尚可。根据其临床特征往往可以推测支气管肺类癌的诊断和亚型并指导治疗。其中年轻、CT表现为中心型肿瘤且无肺门或纵隔淋巴结肿大的病例,典型类癌的可能性较大。此亚型远处转移几率小... 支气管肺类癌是罕见的肺部肿瘤,总体生长缓慢、预后尚可。根据其临床特征往往可以推测支气管肺类癌的诊断和亚型并指导治疗。其中年轻、CT表现为中心型肿瘤且无肺门或纵隔淋巴结肿大的病例,典型类癌的可能性较大。此亚型远处转移几率小,在手术治疗前除胸增强CT外可以不进行其它的常规术前分期检查。中心型肿瘤临床怀疑纵隔淋巴结累及或周围型肿瘤临床怀疑肺门纵隔淋巴结累及的病例,可能为不典型类癌。此亚型应做全面术前评估和分期。累及纵隔淋巴结的不典型类癌预后相对较差,应行多学科积极治疗。支气管肺类癌虽然其生物学特性不活跃,但均为恶性肿瘤,放化疗效果差,手术切除是最主要的治疗手段。彻底切除肿瘤、最大限度保留正常的肺组织是此类肺肿瘤外科治疗的基本目标。 展开更多

关键词 类癌 肺肿瘤 典型类癌 不典型类癌

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在长载体中引入定点突变的方法

19

作者 孟凡荣 陈琛 +1 位作者 万海粟 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期563-568,共6页

背景与目的体外基因定点突变是分子生物学实验的常用方法。然而,虽然目前已经报道了多种基因突变的方法,但对于在长的载体序列中引入突变,一般的方法并不太容易实现。方法本研究在我们前期报告的基因突变方法的基础上,描述了一种简单易... 背景与目的体外基因定点突变是分子生物学实验的常用方法。然而,虽然目前已经报道了多种基因突变的方法,但对于在长的载体序列中引入突变,一般的方法并不太容易实现。方法本研究在我们前期报告的基因突变方法的基础上,描述了一种简单易操作的可在长序列中引入定点突变的方法。这个方法的基本实验程序是:①确定待突变区域,合成一对均含有Type IIs类限制性内切酶位点载体引物,并合成一对互补的突变单链;②在突变区域之外的合适位置上,选择一个桥点,并合成一对均含有Type IIs类的限制性内切酶位点的桥点引物;③利用载体引物序列和桥点引物序列做PCR反应,以扩增载体序列中突变区域外的序列;④利用相应的Type IIs类的限制性内切酶,对以上扩增产物进行酶切;⑤将酶切产物和两个突变单链复性成的突变双链连接,形成突变载体,并转化进受体菌作克隆鉴定。结果为证明我们所报告的方法的有效性,我们在长的载体中进行了测试,结果显示,不但实验操作简单易行,而且突变效率可达到90%以上。结论我们提供了一种有效的在长载体中进行定点突变的方法。 展开更多

关键词 定点突变 长载体 TYPE IIs类限制性内切酶 桥点引物

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Vegfr2-luc转基因子代小鼠的鉴定

20

作者 王伟强 刘红雨 +7 位作者 宋志涛 王玉丽 王竞 李颖 李永文 王岷 陈军 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第5期391-395,共5页

背景与目的 Vegfr2-luc转基因小鼠体内血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor recep- tor 2,VEGFR2)的表达可以驱动荧光素酶报告基因(luciferase,luc)的表达,是活体动物水平实时监测血管生成情况的有利工具。本研... 背景与目的 Vegfr2-luc转基因小鼠体内血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor recep- tor 2,VEGFR2)的表达可以驱动荧光素酶报告基因(luciferase,luc)的表达,是活体动物水平实时监测血管生成情况的有利工具。本研究旨在对子代Vegfr2-luc转基因小鼠进行鉴定,以确定能否用于血管生成研究。方法 PCR检测新生小鼠基因组内luc基因;利用活体成像技术观察新生Vegfr2-luc转基因小鼠生长发育过程中以及皮肤伤口修复过程中 luc基因表达水平的变化情况;荧光素酶报告基因检测试剂盒检测成年(8周龄)转基因小鼠各脏器荧光素酶的活性和Real-time PCR检测各器官VEGFR2 mRNA的表达水平。结果 PCR结果显示50%(56/112)的新生小鼠携带luc基因。活体成像结果显示随着Vegfr2-luc转基因小鼠发育成熟,luc表达量逐渐降低(P<0.001);在皮肤伤口修复过程中, 伤口处luc表达水平先增强后降低(P<0.001)。雌性成年转基因小鼠各脏器VEGFR2 mRNA的表达水平与荧光素酶活性呈正相关(r=0.948,P<0.001)。将睾丸组织除外,雄性成年转基因小鼠各脏器VEGFR2mRNA的表达水平与荧光素酶活性同样呈正相关(r=0.836,P<0.001)。结论 Vegfr2-luc转基因子代小鼠体内luc表达水平的变化可以反映VEGFR2 的表达情况。 展开更多

关键词 动物模型 血管新生 荧光素酶报告基因

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