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致肾盂肾炎大肠杆菌粘附素papG基因克隆及序列分析 被引量:12
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作者 郑铃 陈锦英 +1 位作者 陈贻锴 詹丽钦 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期34-38,共5页
目的 克隆F13型致肾盂肾炎大肠杆菌 (UPEC) 132株的粘附素基因papG并作序列分析。 方法 根据Ⅰ型papG(papGJ96 )和Ⅱ型 papG(papGIA2 )基因序列设计 3条引物 ,PG2和PG3分别为下游 3’端引物 ,PG1为两型papG上游 5’端共用引物 ,并在... 目的 克隆F13型致肾盂肾炎大肠杆菌 (UPEC) 132株的粘附素基因papG并作序列分析。 方法 根据Ⅰ型papG(papGJ96 )和Ⅱ型 papG(papGIA2 )基因序列设计 3条引物 ,PG2和PG3分别为下游 3’端引物 ,PG1为两型papG上游 5’端共用引物 ,并在各引物 5’端加入限制性内切酶位点。以UPEC132染色体DNA为模板进行PCR扩增 ,将扩增产物克隆入质粒载体 ,筛选阳性重组质粒作序列分析。结果 UPEC132株以Ⅰ型 papG引物扩增时为阴性结果 ,以Ⅱ型 papG引物扩增时可获得约 110 0bp的DNA片段。扩增产物经克隆获得阳性重组质粒 pGC39和pGC10 3,对其序列分析显示 papG132编码337个氨基酸 ,与 papGJ96的同源性仅为 4 5 % ,而与 papGIA2的同源性为 98.6 %。与papGIA2比较 ,papG132核苷酸序列 +3位缺失 1个三联体密码 ,并在特异性受体结合域 +49位、+16 0位和PapD蛋白亚单位作用区 +2 72位、+314位存在错义突变 ,此外还存在 7处同义突变。结论UPEC132株的P菌毛不同于相同血清型的UPECJ96株 ,前者为F13型papA与Ⅱ型papG组合 ,后者为F13型 papA与Ⅰ型papG组合。Ⅱ型PapG粘附力较强 ,具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 肾盂肾炎 大肠杆菌 papG 序列分析 基因克隆 粘附素
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基于胚胎干细胞实验模型评价黄芩苷的胚胎毒性 被引量:14
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作者 张崴 宋殿荣 +1 位作者 王雅楠 朱泽 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期864-869,共6页
目的应用胚胎干细胞实验模型体系评价黄芩苷的胚胎毒性。方法分别将胚胎干细胞D3和胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3)与黄芩苷20,40,60,80和100 mg·L-1共培养,MTT法检测细胞活性,分别计算黄芩苷对胚胎干细胞D3和3T3细胞增殖半数抑制浓度I... 目的应用胚胎干细胞实验模型体系评价黄芩苷的胚胎毒性。方法分别将胚胎干细胞D3和胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3)与黄芩苷20,40,60,80和100 mg·L-1共培养,MTT法检测细胞活性,分别计算黄芩苷对胚胎干细胞D3和3T3细胞增殖半数抑制浓度IC50(D3)和IC50(3T3)。利用悬滴-悬浮-贴壁方法,体外培养胚胎干细胞向心肌细胞分化,实时定量PCR方法检测心肌细胞特异表达肌球蛋白重链(β-MHC)基因的表达,计算胚胎干细胞D3定向分化半数抑制浓度,即ID50(D3)。利用胚胎毒性统计公式,预测黄芩苷的胚胎毒性。结果不同浓度黄芩苷作用10 d后,胚胎干细胞D3和3T3细胞存活能力随着黄芩苷浓度增加缓慢下降,黄芩苷对胚胎干细胞D3和3T3细胞增殖均有一定程度的抑制作用,其IC50(D3)和IC50(3T3)分别为135.9和63.3 mg·L-1。体外胚胎干细胞经悬滴-悬浮-贴壁培养可分化为能够表达β-MHC基因的心肌样细胞,黄芩苷2,5,10,20和40 mg·L-1对胚胎干细胞定向分化为心肌细胞的抑制率分别为29.5%,46.8%,59.6%,61.7%和69.0%,黄芩苷对胚胎干细胞分化有一定程度的抑制作用,其体外心肌细胞定向分化的ID50(D3)为7.25 mg·L-1。根据胚胎毒性计算公式,计算得黄芩苷具有弱胚胎毒性。结论黄芩苷具有弱胚胎毒性。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 黄芩苷 毒性作用
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两种检测抗生素S632A对Vero细胞毒性作用方法的比较 被引量:2
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作者 何健民 石立莹 +2 位作者 李晓眠 李电东 刘琼岩 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期33-35,共3页
为检测S632A对细胞的毒性作用,比较了CPE法及MTT法检测其效果,结果可见,2种方法均可证明S632A对细胞的毒性较低,MTT法比CPE法敏感性高。
关键词 MTT法 CPE法 TI(治疗指数)
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狨猴副粘病毒感染 被引量:1
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作者 刘凤勇 石建党 +2 位作者 金孟珏 李晓眠 王俊莉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第5期8-9,共2页
1999年夏季,在一个狨猴实验室中暴发急性呼吸道疾病,动物发病率达80%,死亡率约20%,病程在3~10天.在确定发病原因中,动物剖检只见肺脏病变,对4只死亡狨猴肺组织进行病毒分离,对分离物进行电子显微镜检查和血凝及血凝抑制试验,电镜显示... 1999年夏季,在一个狨猴实验室中暴发急性呼吸道疾病,动物发病率达80%,死亡率约20%,病程在3~10天.在确定发病原因中,动物剖检只见肺脏病变,对4只死亡狨猴肺组织进行病毒分离,对分离物进行电子显微镜检查和血凝及血凝抑制试验,电镜显示分离物属副粘病毒,凝集试验表明分离物产生的红细胞凝集现象能被副流感病毒Ⅰ型(仙台病毒)阳性血清所抑制.而且发病后动物血清抗体效价对副流感病毒Ⅰ型(仙台病毒)升高4倍以上,从而确定动物死亡原因是副流感病毒Ⅰ型(仙台病毒)引起肺炎感染造成. 展开更多
关键词 狨猴 副粘病毒 病毒感染 阳性血清 病原体 血抑结果 毒株
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普通棉耳狨猴仙台病毒感染的报道 被引量:1
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作者 刘凤勇 金孟珏 +2 位作者 石建党 李晓眠 钱月辉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第2期80-80,共1页
关键词 普通棉耳狨猴 仙台病毒感染 实验动物
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普通棉耳狨猴副粘病毒自然感染的研究
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作者 刘凤勇 石建党 +2 位作者 金孟珏 李晓眠 王俊莉 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期94-96,共3页
对一个狨猴实验室中暴发急性呼吸道疾病进行了病因调查。通过动物剖检、病毒分离、电子显微镜检查和血凝及血凝抑制试验和动物感染实验 ,确定其病原是副流感病毒 型(仙台病毒 )。从而确定动物死亡原因是病毒引起肺炎感染造成。
关键词 普通棉耳狨猴 副粘病毒 自然感染 仙台病毒 血凝抑制试验
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柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及新城疫病毒抑制作用的初步研究
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作者 高瑞霄 张孟超 +2 位作者 唐亮 邱良雪 李晓眠 《中兽医医药杂志》 2007年第6期26-29,共4页
目的:初探柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制作用及其机制,温度、酸碱度对提取物作用的影响;观察柠檬提取物对新城疫病毒的抑制作用。方法:利用滤纸片扩散法测定不同提取物浓度的相对抑菌活性,不同温度、酸碱度环境提取物相... 目的:初探柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制作用及其机制,温度、酸碱度对提取物作用的影响;观察柠檬提取物对新城疫病毒的抑制作用。方法:利用滤纸片扩散法测定不同提取物浓度的相对抑菌活性,不同温度、酸碱度环境提取物相对抑菌活性。利用Vero细胞为载体观察提取物对新城疫病毒的抑制作用。结果:柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有显著的抑菌活性,其活性不受酸碱度影响,但受温度影响;提取物对新城疫病毒具有直接抑制作用,对该病的预防及治疗作用则不明显。结论:柠檬提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及新城疫病毒均具抑制作用。 展开更多
关键词 柠檬提取物 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 新城疫病毒 Veto细胞
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