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EPO光激化学发光定量检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
陈凯
吴丹
+3 位作者
聂庆东
相平
任杰
李会强
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1202-1206,1215,共6页
目的:建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫(LiCA)技术定量检测血清促红细胞生成素(EPO)的方法,并对方法进行方法学评估。方法:采用棋盘格滴定法,用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体,分别包被发光微粒,及进行生物素化...
目的:建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫(LiCA)技术定量检测血清促红细胞生成素(EPO)的方法,并对方法进行方法学评估。方法:采用棋盘格滴定法,用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体,分别包被发光微粒,及进行生物素化,两两配对筛选出最佳双抗体组合,进而确定最佳反应浓度,建立光激化学发光检测EPO的方法,建立标准曲线,评价该方法。研究中采用SPSS19.0软件和ELISA Calc进行统计分析。结果:筛选到一组最适抗体,分别与发光微粒和生物素进行连接,成功建立了EPO定量检测的双抗体夹心模式LiCA方法。该法检测的敏感性为0.09 ng/ml,在0.09~30 ng/ml范围内线性良好。批内变异系数和批间变异系数分别为2.93%和3.86%,EPO浓度高达30 ng/ml时无Hook效应。51例EPO增高及51例健康体检者EPO的测定结果与放射免疫法检测EPO比较具有良好的相关性(r=0.957),建立的参考范围为0.76~6.80 ng/ml。结论:成功建立了双抗体夹心模式的光激化学发光定量检测EPO的方法。该检测方法均具有敏感性高、免洗板、线性范围宽、背景荧光低、快速简便等特点。在EPO检测中具有极好的应用前景,有助于EPO诊断试剂盒的研制。
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关键词
促红细胞生成素
光激化学发光
方法学评价
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职称材料
孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立
2
作者
郝颖新
侯丽英
+2 位作者
周宇捷
张月香
李会强
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期917-920,共4页
目的:建立孕妇外周血妊娠相关蛋白A的鲁米诺氧通道免疫测定方法。方法:采用1株鼠抗人PAPP-A单克隆抗体用于生物素标记,兔抗人PAPP-A多克隆抗体包被受体微球,与包被有链霉亲和素的供体微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测...
目的:建立孕妇外周血妊娠相关蛋白A的鲁米诺氧通道免疫测定方法。方法:采用1株鼠抗人PAPP-A单克隆抗体用于生物素标记,兔抗人PAPP-A多克隆抗体包被受体微球,与包被有链霉亲和素的供体微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果:本方法的批内及批间精密度为5.91%~7.94%和6.14%~9.69%;分析灵敏度2.8 mU/L,功能灵敏度4.6 mU/L,在2.8~8000 mU/L范围内线性良好;回收率为96.7%~100.3%,通过干扰性实验分析溶血、黄疸和脂血的干扰率均<10%;当PAPP-A浓度高达8000 mU/L时,无Hook效应;本文所建立方法检测50份临床标本,结果与时间分辨荧光分析法的结果相关系数为0.989。结论:本研究建立的方法能够用于孕妇血清PAPP-A的定量测定,检测性能符合临床诊断试剂的要求。
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关键词
妊娠相关蛋白A
鲁米诺氧通道免疫测定
均相发光免疫分析
定量分析
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职称材料
题名
EPO光激化学发光定量检测方法的建立
被引量:
1
1
作者
陈凯
吴丹
聂庆东
相平
任杰
李会强
机构
天津
市北辰医院
检验
科
清华
大学
医院
检验
科
天津医科大学
检验
学院
天津医科大学医学检验学院免疫学教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期1202-1206,1215,共6页
基金
天津市北辰区科学技术委员会项目基金(BCWS2012-07)资助
文摘
目的:建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫(LiCA)技术定量检测血清促红细胞生成素(EPO)的方法,并对方法进行方法学评估。方法:采用棋盘格滴定法,用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体,分别包被发光微粒,及进行生物素化,两两配对筛选出最佳双抗体组合,进而确定最佳反应浓度,建立光激化学发光检测EPO的方法,建立标准曲线,评价该方法。研究中采用SPSS19.0软件和ELISA Calc进行统计分析。结果:筛选到一组最适抗体,分别与发光微粒和生物素进行连接,成功建立了EPO定量检测的双抗体夹心模式LiCA方法。该法检测的敏感性为0.09 ng/ml,在0.09~30 ng/ml范围内线性良好。批内变异系数和批间变异系数分别为2.93%和3.86%,EPO浓度高达30 ng/ml时无Hook效应。51例EPO增高及51例健康体检者EPO的测定结果与放射免疫法检测EPO比较具有良好的相关性(r=0.957),建立的参考范围为0.76~6.80 ng/ml。结论:成功建立了双抗体夹心模式的光激化学发光定量检测EPO的方法。该检测方法均具有敏感性高、免洗板、线性范围宽、背景荧光低、快速简便等特点。在EPO检测中具有极好的应用前景,有助于EPO诊断试剂盒的研制。
关键词
促红细胞生成素
光激化学发光
方法学评价
Keywords
Erythropoietin
Light initiated chemiluminescence immunoassay
Methodological evaluation
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立
2
作者
郝颖新
侯丽英
周宇捷
张月香
李会强
机构
天津
市中心妇产科医院
检验
科
天津医科大学
医学
检验
学院
临床
免疫
学
教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期917-920,共4页
基金
国家“863”计划项目(2012AA022602)
天津市滨海新区自主创新重大项目(2011-BK120017)
文摘
目的:建立孕妇外周血妊娠相关蛋白A的鲁米诺氧通道免疫测定方法。方法:采用1株鼠抗人PAPP-A单克隆抗体用于生物素标记,兔抗人PAPP-A多克隆抗体包被受体微球,与包被有链霉亲和素的供体微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果:本方法的批内及批间精密度为5.91%~7.94%和6.14%~9.69%;分析灵敏度2.8 mU/L,功能灵敏度4.6 mU/L,在2.8~8000 mU/L范围内线性良好;回收率为96.7%~100.3%,通过干扰性实验分析溶血、黄疸和脂血的干扰率均<10%;当PAPP-A浓度高达8000 mU/L时,无Hook效应;本文所建立方法检测50份临床标本,结果与时间分辨荧光分析法的结果相关系数为0.989。结论:本研究建立的方法能够用于孕妇血清PAPP-A的定量测定,检测性能符合临床诊断试剂的要求。
关键词
妊娠相关蛋白A
鲁米诺氧通道免疫测定
均相发光免疫分析
定量分析
Keywords
Pregnancy associated plasm a protein A
Luminescent oxygen channeling immunoassay
Homogeneous immunoassay
Quantitative analysis
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EPO光激化学发光定量检测方法的建立
陈凯
吴丹
聂庆东
相平
任杰
李会强
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
孕妇血清妊娠相关蛋白A鲁米诺氧通道免疫测定方法的建立
郝颖新
侯丽英
周宇捷
张月香
李会强
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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