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甲状腺激素受体βΔ的P-box氨基酸序列与转录激活作用关系的研究: 1; 作者谢伟赵荣兰 +4 位作者左爱军梁东春孙蓓郭刚张镜宇《动物医学进展》北大核心 2017年第3期89-96,共8页; 研究新发现的甲状腺激素受体(TR)TRβΔ的P-box氨基酸序列能否结合甲状腺激素反应元件(TRE)后增强靶基因转录,揭示P-box序列的保守性与TRβΔ转录激活作用的关系,验证TRβΔ的功能性和活性。构建pcDNA3.1-TRβΔ真核表达载体质粒和含有... 展开更多; 关键词甲状腺激素受体新亚型TRβΔ 甲状腺激素反应元件 P-box氨基酸序列转录激活; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠NKx6.1启动子克隆及特异性表达分析: 2; 作者王大玮汪蓓蕾 +4 位作者姚远陈皓张欣郭刚张瑞《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期113-116,共4页; 旨在构建大鼠NKx6.1启动子的报告载体,验证转录因子T3R对NKx6.1启动子的调控活性。用PCR扩增大鼠脑组织NKx6.1的5'上游启动子片段2.4 kb,应用生物信息学方法预测该片段上潜在的转录因子T3R结合位点,根据不同的结合位点作系列截短,获... 展开更多; 关键词同源盒基因NKx6.1 甲状腺激素双荧光素酶报告检测启动子活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

HCV NS5A通过抑制p-AMPK并上调固醇调节元件结合蛋白2及HMG-CoA还原酶促进小鼠肝细胞胆固醇合成被引量：1: 3; 作者张娟娟刘强乔玲《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1152-1160,共9页; 已有研究证明,丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)可诱导肝细胞脂肪变性。本文报告,HCV NS5A刺激肝细胞胆固醇合成,引起脂代谢失调,促进肝脂肪变性。首先,我们构建了由小鼠甲胎蛋白增强子和小鼠白蛋白启动子驱动的NS5A及NS5A domain... 展开更多; 关键词丙型肝炎病毒非结构蛋白5 A 胆固醇合成/HMG-CoA还原酶固醇调节元件结合蛋白2; 在线阅读下载PDF 职称材料

长链非编码RNA AK043773在脂肪细胞分化中的作用被引量：1: 4; 作者张娟娟乔玲朱恩东《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期156-161,共6页; 探索长链非编码RNA(lnc RNA)AK043773在脂肪细胞分化过程中的表达变化和调控作用。将小鼠前脂肪细胞成脂诱导,利用实时定量PCR技术检测成脂分化调控基因KLF7及AK043773的表达,构建AK043773过表达载体检测其对成脂分化的影响。经UCSC数... 展开更多; 关键词长链非编码RNA AK043773 脂肪细胞分化 KLF7; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲状腺激素受体βΔ的P-box氨基酸序列与转录激活作用关系的研究: 1; 作者谢伟赵荣兰左爱军梁东春孙蓓郭刚张镜宇; 机构包头医学院中心实验室生物医学研究中心天津医科大学代谢病医院内分泌研究所/卫生部激素与发育重点实验室; 出处《动物医学进展》北大核心 2017年第3期89-96,共8页; 基金国家自然科学基金项目(81550038) 内蒙古自然科学基金项目(2015BS0807 +4 种基金 2015BS0801) BSJJ201632); 文摘研究新发现的甲状腺激素受体(TR)TRβΔ的P-box氨基酸序列能否结合甲状腺激素反应元件(TRE)后增强靶基因转录,揭示P-box序列的保守性与TRβΔ转录激活作用的关系,验证TRβΔ的功能性和活性。构建pcDNA3.1-TRβΔ真核表达载体质粒和含有回文序列TRE的pGL3-Promoter/TRE报告基因载体。突变TRβΔ的P-box氨基酸序列对应的DNA序列,分别构建pcDNA3.1-TRβΔmut1、pcDNA3.1-TRβΔmut2突变质粒。以上质粒分组瞬时共转染至COS-7细胞中,分别用含有T3和不含T3的培养基处理后,检测各组荧光素酶的活性。以上载体经PCR、双酶切和质粒测序证实均构建成功。与TRβ1相比,TRβΔ的P-box序列仅在最后一位不同,但基本保证了完整性。在加入T3后,TRβΔ正常与TRE结合,激活报告基因表达,荧光素酶活性显著增加(P<0.01)。将P-box序列突变为与TRβ1一致的pcDNA3.1-TRβΔmut1,在T3调节下也能显著提高荧光素酶的表达(P<0.01)。但完全破坏P-box序列的pcDNA3.1-TRβΔmut2与TRβΔ相比,其荧光素酶的表达显著降低(P<0.01)。结果证明,TRβΔ只有通过完整保守的P-box氨基酸序列,在T3的调节下才能与TRE正常结合,产生转录激活作用。TRβΔ是有转录因子性质的功能性TR。; 关键词甲状腺激素受体新亚型TRβΔ 甲状腺激素反应元件 P-box氨基酸序列转录激活; Keywords thyroid hormone receptor isoform TRβΔ thyroid hormone response element P-box amino acid sequence transcription activation; 分类号 S852.21 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠NKx6.1启动子克隆及特异性表达分析: 2; 作者王大玮汪蓓蕾姚远陈皓张欣郭刚张瑞; 机构天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期113-116,共4页; 文摘旨在构建大鼠NKx6.1启动子的报告载体,验证转录因子T3R对NKx6.1启动子的调控活性。用PCR扩增大鼠脑组织NKx6.1的5'上游启动子片段2.4 kb,应用生物信息学方法预测该片段上潜在的转录因子T3R结合位点,根据不同的结合位点作系列截短,获得3段长度不等的启动子缺失片段,分别克隆到荧光素酶报告基因表达质粒(p GL3-Basic)上,构建相应的报告载体。将报告载体和T3R共转染大鼠星形胶质细胞(rat astrocytes,RA),并检测报告基因荧光素酶的活性。结果显示,成功构建大鼠NKx6.1启动子报告载体,双荧光素酶报告基因活性检测表明T3R对NKx6.1启动子有明显调控作用,其中-1 887 bp-1 507 bp活性最高,即存在关键顺式调控元件。克隆并筛选出启动子核心区域,揭示了甲状腺激素对大鼠NKx6.1的表达调控机制。; 关键词同源盒基因NKx6.1 甲状腺激素双荧光素酶报告检测启动子活性; Keywords thyroid hormones dual-luciferase reporter assay system promoter activity; 分类号 R591.1 [医药卫生—内科学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HCV NS5A通过抑制p-AMPK并上调固醇调节元件结合蛋白2及HMG-CoA还原酶促进小鼠肝细胞胆固醇合成被引量：1: 3; 作者张娟娟刘强乔玲; 机构天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室 VIDO-Inter Vac; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1152-1160,共9页; 基金国家自然科学基金项目(No.81370955)资助~~; 文摘已有研究证明,丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)可诱导肝细胞脂肪变性。本文报告,HCV NS5A刺激肝细胞胆固醇合成,引起脂代谢失调,促进肝脂肪变性。首先,我们构建了由小鼠甲胎蛋白增强子和小鼠白蛋白启动子驱动的NS5A及NS5A domainⅠ、Ⅱ和Ⅲ的慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒后通过尾静脉注射感染小鼠。小鼠血清总胆固醇测定及肝组织切片苏木精-伊红染色揭示,与模拟注射对照及增强绿色荧光蛋白(EGFP)慢病毒颗粒处理小鼠比较,NS5A慢病毒颗粒处理小鼠血清总胆固醇水平明显升高;肝细胞内脂滴明显增多。免疫组化和RTq PCR分析显示,胆固醇合成的关键调节酶HMG-CoA还原酶(HMGCR)在NS5A慢病毒处理的小鼠肝内表达显著升高。蛋白质印迹结果证明,与模拟注射及EGFP慢病毒颗粒处理的小鼠比较,NS5A慢病毒颗粒处理的小鼠肝细胞磷酸化的腺苷一磷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)水平明显降低,而固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)及其靶基因HMGCR的水平显著升高。进一步研究发现,NS5A domainⅡ慢病毒颗粒处理的小鼠肝细胞p-AMPK、SREBP-2和HMGCR表达水平与全长NS5A慢病毒处理的小鼠相似。上述结果提示,HCV NS5A蛋白可通过抑制AMPK磷酸化激活,上调SREBP-2而促进胆固醇合成的限速酶HMGCR的表达,从而促进小鼠肝细胞胆固醇合成。上述结果还提示,NS5A domainⅡ可能是全长NS5A蛋白调节HMGCR基因表达的有效片段。总之,本研究证明,HCV NS5A可引起胆固醇代谢紊乱,这可能是慢性HCV感染引起肝脂肪变性的机制之一。很遗憾,在本研究中,尚未测定SREBP-1的靶基因乙酰CoA羧化酶(脂肪酸合成的限速酶)的表达,相关实验正在进行中。; 关键词丙型肝炎病毒非结构蛋白5 A 胆固醇合成/HMG-CoA还原酶固醇调节元件结合蛋白2; Keywords hepatitis C virus（I-ICV） non-structural protein 5 A（NSSA） cholesterol synthesis/HMG-CoA reductase sterol regulatory element binding protein 2 （SREBP-2）; 分类号 R373.21 [医药卫生—病原生物学] R575.5 [医药卫生—消化系统]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名长链非编码RNA AK043773在脂肪细胞分化中的作用被引量：1: 4; 作者张娟娟乔玲朱恩东; 机构天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部激素与发育重点实验室天津市代谢性疾病重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期156-161,共6页; 基金国家自然科学基金项目(81501846) 天津医科大学代谢病医院内分泌研究所科学基金(2014RC01); 文摘探索长链非编码RNA(lnc RNA)AK043773在脂肪细胞分化过程中的表达变化和调控作用。将小鼠前脂肪细胞成脂诱导,利用实时定量PCR技术检测成脂分化调控基因KLF7及AK043773的表达,构建AK043773过表达载体检测其对成脂分化的影响。经UCSC数据库检索发现AK043773位于KLF7基因4号外显子的3'端下游,骨髓基质细胞系ST2和前脂肪细胞系3T3-L1成脂诱导分化后,实时定量PCR检测结果显示AK043773及KLF7表达协同下调;构建p CDNA3.1-AK043773过表达载体,转染ST2细胞后能显著提高AK043773的表达,进行脂肪细胞分化条件诱导,通过油红O染色及OD520nm吸光值检测可见AK043773过表达显著抑制ST2细胞中脂滴产生。AK043773及KLF7在脂肪细胞分化过程中协同下调,上调AK043773的表达可显著抑制脂肪细胞分化。; 关键词长链非编码RNA AK043773 脂肪细胞分化 KLF7; Keywords lncRNA AK043773 adipocyte differentiation KLF7; 分类号 R589.2 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	甲状腺激素受体βΔ的P-box氨基酸序列与转录激活作用关系的研究	谢伟赵荣兰左爱军梁东春孙蓓郭刚张镜宇	《动物医学进展》北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大鼠NKx6.1启动子克隆及特异性表达分析	王大玮汪蓓蕾姚远陈皓张欣郭刚张瑞	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	HCV NS5A通过抑制p-AMPK并上调固醇调节元件结合蛋白2及HMG-CoA还原酶促进小鼠肝细胞胆固醇合成	张娟娟刘强乔玲	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	长链非编码RNA AK043773在脂肪细胞分化中的作用	张娟娟乔玲朱恩东	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料