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人源抗狂犬病毒二硫键稳定性Fv抗体片段基因的构建与表达
被引量:
3
1
作者
赵小玲
荫俊
+2 位作者
陈伟强
杨冠
张素娟
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期124-127,共4页
目的构建人源抗狂犬病毒二硫键稳定性Fv(dsFv)抗体基因,并在原核系统中实现高效表达,制备有活性的人源抗狂犬病毒dsFv抗体片段。方法采用PCR定点突变的方法,构建抗狂犬病毒dsFv抗体的重、轻链(VH、VL)突变基因,NdeⅠ和NotⅠ双酶切后分...
目的构建人源抗狂犬病毒二硫键稳定性Fv(dsFv)抗体基因,并在原核系统中实现高效表达,制备有活性的人源抗狂犬病毒dsFv抗体片段。方法采用PCR定点突变的方法,构建抗狂犬病毒dsFv抗体的重、轻链(VH、VL)突变基因,NdeⅠ和NotⅠ双酶切后分别插入pET-22b(+)表达质粒中,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。将VL、VH包涵体蛋白经盐酸胍变性,按比例混合在复性折叠缓冲液中,使二者折叠形成dsFv抗体片段。并以其母本抗体scFv作对照,对其抗原特异性和稳定性进行初步评价。结果在VH的第44位氨基酸和VL的第100位氨基酸引入了半胱氨酸,成功构建了抗狂犬病毒dsFv抗体基因,并在原核系统中实现了对二者的高效表达,VH、VL蛋白在复性缓冲液中正确折叠形成了dsFv抗体片段。结论对筛选获得的抗狂犬病毒scFv成功进行了稳定性改构,制备了有活性的dsFv抗体片段,改构以后的dsFv保持了对狂犬病毒的特异结合活性,而其在血清中的稳定性有明显改进,而且其热稳定性和抵抗尿素化学变性的能力亦大大改进。
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关键词
狂犬病病毒
二硫键稳定性Fv抗体
基因表达
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职称材料
低浓度SO_2检测管的研制
被引量:
2
2
作者
张华山
李官贤
+2 位作者
袭著革
吴佛运
陈士清
《中国环境监测》
CSSCI
CSCD
北大核心
1996年第4期29-31,共3页
通过对常见的几种检测管法的比较,筛选出灵敏度较高的亚硝基铁氰化钠法;同时筛选出载体为60—80目的素陶瓷,指示剂浓度为20%。玻璃管内径为2.0—2.3mm,采气速度为0.3(L/min),采样体积为12L,以此条件...
通过对常见的几种检测管法的比较,筛选出灵敏度较高的亚硝基铁氰化钠法;同时筛选出载体为60—80目的素陶瓷,指示剂浓度为20%。玻璃管内径为2.0—2.3mm,采气速度为0.3(L/min),采样体积为12L,以此条件进行实验.结果表明,检测管变色长度对应SO2浓度的相关性很好;变异系数均小于110%,检测的重现性较好。检测管的测定值与理论值的平均相对误差为5.09%(<±15%),最大相对误差为7.13%(<±25%),准确度较高.测定结果可靠;与化学法比较,两者无显著性差异;浓度小于0.15mg/m3的H2S及浓度小于0.01mg/m3的NO2对SO2检测管无干扰.
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关键词
检测管
二氧化硫
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职称材料
浅谈人发水解物的防晒作用及其机理
被引量:
11
3
作者
张延坤
《日用化学工业》
CAS
CSCD
北大核心
1995年第2期28-31,共4页
人发水解物主要由小分子肽、黑色汞和氨基酸类等成分组成。本文就人发水解物作为新型天然防晒剂的防日光紫外线损伤的作用及其各成分的不同防晒作用机理等内容进行了系统地综述。
关键词
化妆品
人发
水解物
防晒剂
防晒
紫外线吸收剂
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职称材料
甲基对硫磷压电免疫传感技术的初步探讨
被引量:
1
4
作者
卢澄
潘家荣
+1 位作者
高志贤
姚伟
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期334-337,共4页
分别利用蛋白A法和巯基自组装膜法将抗体固定在压电石英晶体金电极上,结果表明巯基自组装膜法效果更好。在利用巯基自组装膜法固定甲基对硫磷抗体的基础上,初步建立了基于直接法和竞争法的甲基对硫磷压电免疫传感技术并对两种技术作了比...
分别利用蛋白A法和巯基自组装膜法将抗体固定在压电石英晶体金电极上,结果表明巯基自组装膜法效果更好。在利用巯基自组装膜法固定甲基对硫磷抗体的基础上,初步建立了基于直接法和竞争法的甲基对硫磷压电免疫传感技术并对两种技术作了比较,结果表明,基于竞争法的压电免疫传感技术对对硫磷抗原抗体反应的响应频移值较大,可提高检测灵敏度,降低检测限。
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关键词
压电免疫传感技术
甲基对硫磷
巯基自组装膜法
竞争法
直接法
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职称材料
题名
人源抗狂犬病毒二硫键稳定性Fv抗体片段基因的构建与表达
被引量:
3
1
作者
赵小玲
荫俊
陈伟强
杨冠
张素娟
机构
军事医学科学院
微生物流行病
研究所
天津军事医学科学院卫生学环境医学研究所
军事医学科学院
生物工程
研究所
解放军第
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期124-127,共4页
文摘
目的构建人源抗狂犬病毒二硫键稳定性Fv(dsFv)抗体基因,并在原核系统中实现高效表达,制备有活性的人源抗狂犬病毒dsFv抗体片段。方法采用PCR定点突变的方法,构建抗狂犬病毒dsFv抗体的重、轻链(VH、VL)突变基因,NdeⅠ和NotⅠ双酶切后分别插入pET-22b(+)表达质粒中,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。将VL、VH包涵体蛋白经盐酸胍变性,按比例混合在复性折叠缓冲液中,使二者折叠形成dsFv抗体片段。并以其母本抗体scFv作对照,对其抗原特异性和稳定性进行初步评价。结果在VH的第44位氨基酸和VL的第100位氨基酸引入了半胱氨酸,成功构建了抗狂犬病毒dsFv抗体基因,并在原核系统中实现了对二者的高效表达,VH、VL蛋白在复性缓冲液中正确折叠形成了dsFv抗体片段。结论对筛选获得的抗狂犬病毒scFv成功进行了稳定性改构,制备了有活性的dsFv抗体片段,改构以后的dsFv保持了对狂犬病毒的特异结合活性,而其在血清中的稳定性有明显改进,而且其热稳定性和抵抗尿素化学变性的能力亦大大改进。
关键词
狂犬病病毒
二硫键稳定性Fv抗体
基因表达
Keywords
rabies virus
disulfide-stabilized Fv fragment
gene expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
低浓度SO_2检测管的研制
被引量:
2
2
作者
张华山
李官贤
袭著革
吴佛运
陈士清
机构
天津军事医学科学院卫生学环境医学研究所
出处
《中国环境监测》
CSSCI
CSCD
北大核心
1996年第4期29-31,共3页
文摘
通过对常见的几种检测管法的比较,筛选出灵敏度较高的亚硝基铁氰化钠法;同时筛选出载体为60—80目的素陶瓷,指示剂浓度为20%。玻璃管内径为2.0—2.3mm,采气速度为0.3(L/min),采样体积为12L,以此条件进行实验.结果表明,检测管变色长度对应SO2浓度的相关性很好;变异系数均小于110%,检测的重现性较好。检测管的测定值与理论值的平均相对误差为5.09%(<±15%),最大相对误差为7.13%(<±25%),准确度较高.测定结果可靠;与化学法比较,两者无显著性差异;浓度小于0.15mg/m3的H2S及浓度小于0.01mg/m3的NO2对SO2检测管无干扰.
关键词
检测管
二氧化硫
Keywords
SO_2,detection tube
分类号
X511.05 [环境科学与工程—环境工程]
在线阅读
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职称材料
题名
浅谈人发水解物的防晒作用及其机理
被引量:
11
3
作者
张延坤
机构
天津
市
军事医学科学院
卫生学
环境
医学
研究所
出处
《日用化学工业》
CAS
CSCD
北大核心
1995年第2期28-31,共4页
文摘
人发水解物主要由小分子肽、黑色汞和氨基酸类等成分组成。本文就人发水解物作为新型天然防晒剂的防日光紫外线损伤的作用及其各成分的不同防晒作用机理等内容进行了系统地综述。
关键词
化妆品
人发
水解物
防晒剂
防晒
紫外线吸收剂
分类号
TQ658.24 [化学工程—精细化工]
在线阅读
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职称材料
题名
甲基对硫磷压电免疫传感技术的初步探讨
被引量:
1
4
作者
卢澄
潘家荣
高志贤
姚伟
机构
中国农业
科学院
农产品加工
研究所
天津军事医学科学院卫生学环境医学研究所
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期334-337,共4页
基金
863国家高新技术研究计划(2006AA10Z449)
文摘
分别利用蛋白A法和巯基自组装膜法将抗体固定在压电石英晶体金电极上,结果表明巯基自组装膜法效果更好。在利用巯基自组装膜法固定甲基对硫磷抗体的基础上,初步建立了基于直接法和竞争法的甲基对硫磷压电免疫传感技术并对两种技术作了比较,结果表明,基于竞争法的压电免疫传感技术对对硫磷抗原抗体反应的响应频移值较大,可提高检测灵敏度,降低检测限。
关键词
压电免疫传感技术
甲基对硫磷
巯基自组装膜法
竞争法
直接法
Keywords
piezoelectric immunosensor
methyl parathion
sulfhydryl self-assembled layer
competitive detection
direct method
分类号
S481.8 [农业科学—农药学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人源抗狂犬病毒二硫键稳定性Fv抗体片段基因的构建与表达
赵小玲
荫俊
陈伟强
杨冠
张素娟
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
低浓度SO_2检测管的研制
张华山
李官贤
袭著革
吴佛运
陈士清
《中国环境监测》
CSSCI
CSCD
北大核心
1996
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
浅谈人发水解物的防晒作用及其机理
张延坤
《日用化学工业》
CAS
CSCD
北大核心
1995
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
甲基对硫磷压电免疫传感技术的初步探讨
卢澄
潘家荣
高志贤
姚伟
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
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职称材料
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