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海洋酸化和升温对中间球海胆幼虫发育和生长的影响
被引量：
3
1
作者
秦艳杰
宋晓楠
+1 位作者
李霞
赵祥吉
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期450-455,共6页
为了研究海洋酸化和气候变暖对海洋生物的联合作用,按照文献[4]和[7]中对海洋环境变化的预测趋势,设置了3组海水,即对照组(pH为7.93～7.99,水温T为18℃)、试验组E3(在对照组基础上pH减小0.3,T升高3℃)、试验组E6(在对照组基础上pH减小0....
为了研究海洋酸化和气候变暖对海洋生物的联合作用,按照文献[4]和[7]中对海洋环境变化的预测趋势,设置了3组海水,即对照组(pH为7.93～7.99,水温T为18℃)、试验组E3(在对照组基础上pH减小0.3,T升高3℃)、试验组E6(在对照组基础上pH减小0.6,T升高6℃),在此条件下对中间球海胆Strongylocentrotus intermedius幼虫的发育及生长情况进行了研究。结果表明:酸化及升温海水对海胆孵化率没有显著影响;E3组海胆与对照组发育进程一致,而E6组则较慢;E3和E6组海胆分别存活了18 d和12 d,分别发育至八腕幼虫和四腕幼虫阶段,可见试验海水环境严重影响海胆幼虫的存活;E3组海胆幼虫的生长在受精后的前10 d与对照组差异不显著(P>0.05),之后显著低于对照组(P<0.05),而E6组海胆幼虫的生长在整个试验阶段均显著低于对照组(P<0.05);将骨针长度分解为口后腕骨针长度和躯干部骨针长度,各组海胆的生长差异主要表现在口后腕骨针长度上;试验组长腕幼虫畸形均不同程度地表现为腕短小、萎缩、腕骨针折断、骨针弯曲变形等。研究表明,中间球海胆对海洋酸化和气候变暖的海洋环境非常敏感,如果按照预测趋势,海洋环境变化将会对该海胆产生严重的负面影响。
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关键词
中间球海胆
海洋酸化
升温
幼虫发育
生长
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职称材料
盐藻小G蛋白基因(DsRab)的克隆及在高盐胁迫下的表达分析
被引量：
5
2
作者
余祝君
柴晓杰
+2 位作者
张晓琳
张婷
薛飞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期77-83,共7页
采用RT-PCR和RACE技术扩增了杜氏盐藻小G蛋白基因cDNA全长序列(GenBank Accession No.JN989548),命名为DsRab,对其进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR方法检测盐胁迫下该基因的表达情况。结果表明,DsRab基因的cDNA全长为1 299 bp...
采用RT-PCR和RACE技术扩增了杜氏盐藻小G蛋白基因cDNA全长序列(GenBank Accession No.JN989548),命名为DsRab,对其进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR方法检测盐胁迫下该基因的表达情况。结果表明,DsRab基因的cDNA全长为1 299 bp,开放阅读框(ORF)为612 bp,编码203个氨基酸,5'非编码区78 bp,3'非编码区609 bp;保守性结构域分析可知编码的小G蛋白有4个GTP/GDP保守结构域,1个效应区、1个羧基端的半胱氨酸结构域和5个Rab亚家族共有的结构域;二级结构预测表明该蛋白有32.02%的α-螺旋,23.65%的伸展片段,44.33%的自由卷曲,三维建模成功;比对分析发现DsRab蛋白与多种生物的Ypt/Rab的氨基酸序列具有较高的同源性。荧光定量PCR结果表明,盐藻在高盐(3.0 mol/L)胁迫下,DsRab基因表达量显著上调,1 h后表达量达到最大值,为正常培养下对照组(0 h)的4.9倍,差异极显著(P<0.01)。
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关键词
杜氏盐藻
小G蛋白基因
RACE技术
生物信息学
荧光定量PCR
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职称材料
盐藻小G蛋白DsRab的原核表达及纯化
被引量：
1
3
作者
李秀娟
柴晓杰
+2 位作者
陶晓迎
赵欢
丛玉婷
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期176-180,共5页
前期对盐藻小G蛋白基因DsRab研究表明,在盐胁迫诱导下该基因转录水平明显提高。为进一步研究该蛋白在盐藻耐盐机制中的作用,PCR扩增DsRab的开放阅读框(ORF),并将其克隆至带有GST标签的原核表达载体pGS-21a,得到重组表达载体pGS-21a-DsRa...
前期对盐藻小G蛋白基因DsRab研究表明,在盐胁迫诱导下该基因转录水平明显提高。为进一步研究该蛋白在盐藻耐盐机制中的作用,PCR扩增DsRab的开放阅读框(ORF),并将其克隆至带有GST标签的原核表达载体pGS-21a,得到重组表达载体pGS-21a-DsRab。将重组表达载体转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并优化诱导表达条件,利用GST-SefinoseTM Kit进行纯化,用SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明,成功构建了重组表达载体pGS-21a-DsRab,SDS-PAGE结果显示得到的蛋白与预期分子量相符,并且纯度较高;Western blot检测结果初步证明该融合蛋白为GST-DsRab。
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关键词
盐藻
DsRab
GST
原核表达
纯化
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职称材料
题名
海洋酸化和升温对中间球海胆幼虫发育和生长的影响
被引量：
3
1
作者
秦艳杰
宋晓楠
李霞
赵祥吉
机构
大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室
江西省上饶市鄱阳中学
出处
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期450-455,共6页
基金
辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划项目(LJQ2011077)
国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室资助项目(201102)
文摘
为了研究海洋酸化和气候变暖对海洋生物的联合作用,按照文献[4]和[7]中对海洋环境变化的预测趋势,设置了3组海水,即对照组(pH为7.93～7.99,水温T为18℃)、试验组E3(在对照组基础上pH减小0.3,T升高3℃)、试验组E6(在对照组基础上pH减小0.6,T升高6℃),在此条件下对中间球海胆Strongylocentrotus intermedius幼虫的发育及生长情况进行了研究。结果表明:酸化及升温海水对海胆孵化率没有显著影响;E3组海胆与对照组发育进程一致,而E6组则较慢;E3和E6组海胆分别存活了18 d和12 d,分别发育至八腕幼虫和四腕幼虫阶段,可见试验海水环境严重影响海胆幼虫的存活;E3组海胆幼虫的生长在受精后的前10 d与对照组差异不显著(P>0.05),之后显著低于对照组(P<0.05),而E6组海胆幼虫的生长在整个试验阶段均显著低于对照组(P<0.05);将骨针长度分解为口后腕骨针长度和躯干部骨针长度,各组海胆的生长差异主要表现在口后腕骨针长度上;试验组长腕幼虫畸形均不同程度地表现为腕短小、萎缩、腕骨针折断、骨针弯曲变形等。研究表明,中间球海胆对海洋酸化和气候变暖的海洋环境非常敏感,如果按照预测趋势,海洋环境变化将会对该海胆产生严重的负面影响。
关键词
中间球海胆
海洋酸化
升温
幼虫发育
生长
Keywords
Strongylocentrotus intermedius
ocean acidification
warming
larval development
growth
分类号
Q143 [生物学—生态学]
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职称材料
题名
盐藻小G蛋白基因(DsRab)的克隆及在高盐胁迫下的表达分析
被引量：
5
2
作者
余祝君
柴晓杰
张晓琳
张婷
薛飞
机构
大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期77-83,共7页
基金
国家自然科学基金项目(30972240)
辽宁省教育厅科技研究项目(2008T023)
文摘
采用RT-PCR和RACE技术扩增了杜氏盐藻小G蛋白基因cDNA全长序列(GenBank Accession No.JN989548),命名为DsRab,对其进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR方法检测盐胁迫下该基因的表达情况。结果表明,DsRab基因的cDNA全长为1 299 bp,开放阅读框(ORF)为612 bp,编码203个氨基酸,5'非编码区78 bp,3'非编码区609 bp;保守性结构域分析可知编码的小G蛋白有4个GTP/GDP保守结构域,1个效应区、1个羧基端的半胱氨酸结构域和5个Rab亚家族共有的结构域;二级结构预测表明该蛋白有32.02%的α-螺旋,23.65%的伸展片段,44.33%的自由卷曲,三维建模成功;比对分析发现DsRab蛋白与多种生物的Ypt/Rab的氨基酸序列具有较高的同源性。荧光定量PCR结果表明,盐藻在高盐(3.0 mol/L)胁迫下,DsRab基因表达量显著上调,1 h后表达量达到最大值,为正常培养下对照组(0 h)的4.9倍,差异极显著(P<0.01)。
关键词
杜氏盐藻
小G蛋白基因
RACE技术
生物信息学
荧光定量PCR
Keywords
Dunaliella salina Small GTP-binding protein gene RACE Bioinformatics-analysis QRT-PCR
分类号
S917.3 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
盐藻小G蛋白DsRab的原核表达及纯化
被引量：
1
3
作者
李秀娟
柴晓杰
陶晓迎
赵欢
丛玉婷
机构
大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期176-180,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30972240)
辽宁省教育厅科技研究项目(2008T023)
文摘
前期对盐藻小G蛋白基因DsRab研究表明,在盐胁迫诱导下该基因转录水平明显提高。为进一步研究该蛋白在盐藻耐盐机制中的作用,PCR扩增DsRab的开放阅读框(ORF),并将其克隆至带有GST标签的原核表达载体pGS-21a,得到重组表达载体pGS-21a-DsRab。将重组表达载体转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并优化诱导表达条件,利用GST-SefinoseTM Kit进行纯化,用SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明,成功构建了重组表达载体pGS-21a-DsRab,SDS-PAGE结果显示得到的蛋白与预期分子量相符,并且纯度较高;Western blot检测结果初步证明该融合蛋白为GST-DsRab。
关键词
盐藻
DsRab
GST
原核表达
纯化
Keywords
Dunaliella salina DsRab GST Prokaryotic expression Purification
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
海洋酸化和升温对中间球海胆幼虫发育和生长的影响
秦艳杰
宋晓楠
李霞
赵祥吉
《大连海洋大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
盐藻小G蛋白基因(DsRab)的克隆及在高盐胁迫下的表达分析
余祝君
柴晓杰
张晓琳
张婷
薛飞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
盐藻小G蛋白DsRab的原核表达及纯化
李秀娟
柴晓杰
陶晓迎
赵欢
丛玉婷
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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