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利用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白
被引量：
2
1
作者
岳金荣
丛玉婷
+3 位作者
邢震宇
高相楠
王明芳
柴晓杰
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期1187-1195,共9页
为进一步探究杜氏盐藻促有丝分裂原活化蛋白激酶(DsMAPK)的功能,采用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白。将pGS21a-MAPK质粒转入大肠杆菌BL21中表达MAPK蛋白并制备多克隆抗体;将培养至对数生长期的盐藻细胞进行盐胁迫处理,...
为进一步探究杜氏盐藻促有丝分裂原活化蛋白激酶(DsMAPK)的功能,采用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白。将pGS21a-MAPK质粒转入大肠杆菌BL21中表达MAPK蛋白并制备多克隆抗体;将培养至对数生长期的盐藻细胞进行盐胁迫处理,然后提取盐藻总蛋白,并进行SDS-PAGE和Western blotting检测;以内源性靶蛋白为诱饵,将细胞总蛋白与MAPK抗体进行共孵育,将经蛋白A/G琼脂糖珠纯化的免疫共沉淀复合物进行质谱检测。结果表明,制备的多克隆抗体特异性良好;筛选出165种特有的差异蛋白。通过GO和KEGG分析发现,这些差异蛋白主要参与了新陈代谢、遗传信息的传递以及信号转导等生物学调控过程。蛋白质互作网络分析发现,直接与MAPK相互作用的蛋白有4种。本研究结果为深入研究杜氏盐藻响应盐胁迫的分子机制提供了参考。
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关键词
杜氏盐藻
MAPK
免疫共沉淀技术
质谱技术
生物信息学
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职称材料
题名
利用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白
被引量：
2
1
作者
岳金荣
丛玉婷
邢震宇
高相楠
王明芳
柴晓杰
机构
大连海洋大学/辽宁省省级高校水生生物学重点实验室
出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期1187-1195,共9页
基金
国家自然科学基金(31472260、30972240)。
文摘
为进一步探究杜氏盐藻促有丝分裂原活化蛋白激酶(DsMAPK)的功能,采用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白。将pGS21a-MAPK质粒转入大肠杆菌BL21中表达MAPK蛋白并制备多克隆抗体;将培养至对数生长期的盐藻细胞进行盐胁迫处理,然后提取盐藻总蛋白,并进行SDS-PAGE和Western blotting检测;以内源性靶蛋白为诱饵,将细胞总蛋白与MAPK抗体进行共孵育,将经蛋白A/G琼脂糖珠纯化的免疫共沉淀复合物进行质谱检测。结果表明,制备的多克隆抗体特异性良好;筛选出165种特有的差异蛋白。通过GO和KEGG分析发现,这些差异蛋白主要参与了新陈代谢、遗传信息的传递以及信号转导等生物学调控过程。蛋白质互作网络分析发现,直接与MAPK相互作用的蛋白有4种。本研究结果为深入研究杜氏盐藻响应盐胁迫的分子机制提供了参考。
关键词
杜氏盐藻
MAPK
免疫共沉淀技术
质谱技术
生物信息学
Keywords
Dunaliella salina
MAPK
Co-immunoprecipitation
mass spectrometry
bioinformatics
分类号
Q945 [生物学—植物学]
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作者
出处
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被引量
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1
利用免疫共沉淀联合质谱技术筛选盐藻MAPK的互作蛋白
岳金荣
丛玉婷
邢震宇
高相楠
王明芳
柴晓杰
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
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