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β-catenin在白血病细胞系中表达的研究
被引量：
16
1
作者
麦玉洁
邱录贵
+6 位作者
李增军
李新
王国蓉
于珍
徐燕
王亚非
李茜
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2007年第5期919-922,共4页
本研究检测β-catenin在白血病/淋巴瘤细胞系中的表达,探讨其与白血病的关系。采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot的方法检测β-catenin在白血病细胞系中的表达。结果表明:白血病细胞系中β-catenin在转录水平上有广泛表达,...
本研究检测β-catenin在白血病/淋巴瘤细胞系中的表达,探讨其与白血病的关系。采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot的方法检测β-catenin在白血病细胞系中的表达。结果表明:白血病细胞系中β-catenin在转录水平上有广泛表达,其中:在U937、KG1a、Jurkat、K562、Namalwa细胞中存在极高表达;在HEL、HUT78、Raji、Daudi、CEM中有中等表达;而在LCL-H、HL-60、NB4、J6-1、Ramos细胞中β-cateninmRNA呈相对较低水平的表达。蛋白表达水平与mRNA表达水平结果一致。所检测的细胞系中,胞核中均可见β-catenin的表达,但程度不一;在U937、K562、KG1a和Jurkat细胞的胞核内可见大量分布。结论:β-catenin作为WNT/β-catenin信号转导途径中重要的"调节子",其在白血病细胞中的过量表达提示WNT/β-catenin信号转导途径可能在白血病细胞中有异常激活。
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关键词
Β-CATENIN
白血病细胞系
WNT/β-catenin信号转导途径
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职称材料
反义寡核苷酸靶向hTERT对K562细胞株端粒酶活性和细胞凋亡的影响
2
作者
应晓杨
方美云
王一
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2008年第1期48-53,共6页
本研究探讨靶向封闭端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,ASPSODN)对K562细胞目的基因抑制作用及对端粒酶活性和细胞凋亡的影响。选用3种浓度ASPSODN,分别为0.2μmol/L、0.6...
本研究探讨靶向封闭端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,ASPSODN)对K562细胞目的基因抑制作用及对端粒酶活性和细胞凋亡的影响。选用3种浓度ASPSODN,分别为0.2μmol/L、0.6μmol/L、1.0μmol/L,同时设空白组、脂质体组和三种相同浓度正义硫代寡核苷酸(SPSODN)作为对照,转染到人红白血病细胞株K562,于24、48小时收集细胞进行检测。用RT-PCR检测靶基因hTERT mRNA的表达,TRAP-ELISA检测细胞端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明:①K562细胞被转染24小时后,hTERT mRNA的表达在脂质体组为0.80±0.24,在0.2μmol/LASPSODN组为0.69±0.12,在SPSODN组为0.72±0.25,它们与空白对照组(0.85±0.28)无统计学差异(p>0.05),而0.6μmol/LASPSODN组的hTERT mRNA的表达(0.42±0.16)比脂质体组明显下调(p<0.05),而相同浓度的SPSODN组则下调不明显(0.69±0.26),1.0μmol/LASPSODN和SPSODN对hTERT表达都表现出一定的抑制。采用台盼蓝拒染法染色显示,经脂质体转染的1.0μmol/LODN无论正义或反义时,细胞死亡明显增多。②24小时端粒酶相对活性空白对照组为88.9%,脂质体作用组为77.7%,两者无显著性差异;0.2、0.6、1.0μmol/LASPSODN作用后端粒酶相对活性分别为60.6%、52%、58%,与空白对照组相比均有显著性差异(p<0.05),其中0.6μmol/LASPSODN组间与脂质体组有显著性差异(p=0.037);而0.2、0.6、1.0μmol/L作用后SPSODN组端粒酶相对活性分别为76.1%、72.2%、65.7%,0.2和0.6μmol/LSPSODN组与空白组、脂质体组间均无统计学差异。48小时ASPSODN各作用组则端粒酶活性有所恢复,0.2、0.6、1.0μmol/LASPSODN作用后端粒酶相对活性分别为84.1%、82.3%、79.6%;而48小时0.2、0.6、1.0μmol/L各SPSODN组端粒酶相对活性分别为74.8%、74.5%、67.9%,0.2和0.6μmol/LSPSODN组间端粒酶活性无明显抑制。③培养48小时后0.6μmol/LASPSODN组和SPSODN组细胞凋亡率分别为4.34%和1.83%,脂质体作用组为1.84%,空白对照组为1.07%,ASPSODN和SPSODN组两者间有统计学差异(p<0.05),ASPSODN组与脂质体作用组及空白对照组间有显著性差异(p<0.01)。结论:ASPSODN靶向hTERT能特异性抑制K562细胞hTERT mRNA的表达,明显下调K562细胞株端粒酶活性,最佳作用浓度为0.6μmol/L,但抑制时间较短,24小时明显抑制,48小时则有所恢复。高浓度(1.0μmol/L)寡核苷酸表现出一定的细胞毒性;48小时0.6μmol/LASPSODN能明显诱导细胞凋亡,而SPSODN组则无此作用,两者间有显著性差异(p<0.05)。
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关键词
端粒酶
端粒酶逆转录酶
反义寡核苷酸
K562细胞株
细胞凋亡
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职称材料
题名
β-catenin在白血病细胞系中表达的研究
被引量：
16
1
作者
麦玉洁
邱录贵
李增军
李新
王国蓉
于珍
徐燕
王亚非
李茜
机构
中国医学
科
学院、北京协和医学院
大连大学附属中山医院血液科
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2007年第5期919-922,共4页
基金
天津市自然科学基金资助项目(编号06YFJMSC08500)
人事部留学回国人员科技活动择优资助项目
文摘
本研究检测β-catenin在白血病/淋巴瘤细胞系中的表达,探讨其与白血病的关系。采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot的方法检测β-catenin在白血病细胞系中的表达。结果表明:白血病细胞系中β-catenin在转录水平上有广泛表达,其中:在U937、KG1a、Jurkat、K562、Namalwa细胞中存在极高表达;在HEL、HUT78、Raji、Daudi、CEM中有中等表达;而在LCL-H、HL-60、NB4、J6-1、Ramos细胞中β-cateninmRNA呈相对较低水平的表达。蛋白表达水平与mRNA表达水平结果一致。所检测的细胞系中,胞核中均可见β-catenin的表达,但程度不一;在U937、K562、KG1a和Jurkat细胞的胞核内可见大量分布。结论:β-catenin作为WNT/β-catenin信号转导途径中重要的"调节子",其在白血病细胞中的过量表达提示WNT/β-catenin信号转导途径可能在白血病细胞中有异常激活。
关键词
Β-CATENIN
白血病细胞系
WNT/β-catenin信号转导途径
Keywords
β-catenin
leukemic cell lines
WNt/β-catenin signaling pathway
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
反义寡核苷酸靶向hTERT对K562细胞株端粒酶活性和细胞凋亡的影响
2
作者
应晓杨
方美云
王一
机构
大连大学附属中山医院血液科
大连
医
科
大学
附属
第一
医院
血液
科
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2008年第1期48-53,共6页
文摘
本研究探讨靶向封闭端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,ASPSODN)对K562细胞目的基因抑制作用及对端粒酶活性和细胞凋亡的影响。选用3种浓度ASPSODN,分别为0.2μmol/L、0.6μmol/L、1.0μmol/L,同时设空白组、脂质体组和三种相同浓度正义硫代寡核苷酸(SPSODN)作为对照,转染到人红白血病细胞株K562,于24、48小时收集细胞进行检测。用RT-PCR检测靶基因hTERT mRNA的表达,TRAP-ELISA检测细胞端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明:①K562细胞被转染24小时后,hTERT mRNA的表达在脂质体组为0.80±0.24,在0.2μmol/LASPSODN组为0.69±0.12,在SPSODN组为0.72±0.25,它们与空白对照组(0.85±0.28)无统计学差异(p>0.05),而0.6μmol/LASPSODN组的hTERT mRNA的表达(0.42±0.16)比脂质体组明显下调(p<0.05),而相同浓度的SPSODN组则下调不明显(0.69±0.26),1.0μmol/LASPSODN和SPSODN对hTERT表达都表现出一定的抑制。采用台盼蓝拒染法染色显示,经脂质体转染的1.0μmol/LODN无论正义或反义时,细胞死亡明显增多。②24小时端粒酶相对活性空白对照组为88.9%,脂质体作用组为77.7%,两者无显著性差异;0.2、0.6、1.0μmol/LASPSODN作用后端粒酶相对活性分别为60.6%、52%、58%,与空白对照组相比均有显著性差异(p<0.05),其中0.6μmol/LASPSODN组间与脂质体组有显著性差异(p=0.037);而0.2、0.6、1.0μmol/L作用后SPSODN组端粒酶相对活性分别为76.1%、72.2%、65.7%,0.2和0.6μmol/LSPSODN组与空白组、脂质体组间均无统计学差异。48小时ASPSODN各作用组则端粒酶活性有所恢复,0.2、0.6、1.0μmol/LASPSODN作用后端粒酶相对活性分别为84.1%、82.3%、79.6%;而48小时0.2、0.6、1.0μmol/L各SPSODN组端粒酶相对活性分别为74.8%、74.5%、67.9%,0.2和0.6μmol/LSPSODN组间端粒酶活性无明显抑制。③培养48小时后0.6μmol/LASPSODN组和SPSODN组细胞凋亡率分别为4.34%和1.83%,脂质体作用组为1.84%,空白对照组为1.07%,ASPSODN和SPSODN组两者间有统计学差异(p<0.05),ASPSODN组与脂质体作用组及空白对照组间有显著性差异(p<0.01)。结论:ASPSODN靶向hTERT能特异性抑制K562细胞hTERT mRNA的表达,明显下调K562细胞株端粒酶活性,最佳作用浓度为0.6μmol/L,但抑制时间较短,24小时明显抑制,48小时则有所恢复。高浓度(1.0μmol/L)寡核苷酸表现出一定的细胞毒性;48小时0.6μmol/LASPSODN能明显诱导细胞凋亡,而SPSODN组则无此作用,两者间有显著性差异(p<0.05)。
关键词
端粒酶
端粒酶逆转录酶
反义寡核苷酸
K562细胞株
细胞凋亡
Keywords
telomerase
hTERT
antisense-oligodeoxynucleotide
K562 cell line
apoptosis
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
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1
β-catenin在白血病细胞系中表达的研究
麦玉洁
邱录贵
李增军
李新
王国蓉
于珍
徐燕
王亚非
李茜
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2007
16
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2
反义寡核苷酸靶向hTERT对K562细胞株端粒酶活性和细胞凋亡的影响
应晓杨
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