目的探讨芍药苷对高糖诱导大鼠皮质神经元氧化应激及凋亡的保护作用。方法从新生SD乳鼠大脑皮质分离和培养神经元,4 d后分为对照组、高糖组(50 mmol/L高糖)、低、中和高浓度组(2.5、5.0、10.0μmol/L芍药苷预处理再加50 mmol/L高糖)。...目的探讨芍药苷对高糖诱导大鼠皮质神经元氧化应激及凋亡的保护作用。方法从新生SD乳鼠大脑皮质分离和培养神经元,4 d后分为对照组、高糖组(50 mmol/L高糖)、低、中和高浓度组(2.5、5.0、10.0μmol/L芍药苷预处理再加50 mmol/L高糖)。采用细胞增殖活力检测试剂观察细胞活力,用吸光度(A)值表示;检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;通过2',7'-二氢二氯荧光素二乙酸酯荧光探针检测活性氧水平;Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;免疫荧光染色测定细胞线粒体膜电位(MMP);Western blot测定Bcl-2、Bax、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase3)蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组A值明显降低(0.452±0.505 vs 0.985±1.010,P<0.01)。与高糖组比较,低浓度组A值无明显变化(P>0.05),中和高浓度组A值增高(0.648±0.714和0.782±0.805 vs 0.452±0.505,P<0.05,P<0.01);SOD、CAT活性增加,活性氧水平降低,MMP表达增加;凋亡细胞减少;且中和高浓度组Bcl-2蛋白(0.506±0.601和0.742±0.803 vs 0.107±0.137)表达显著增加、Bax(0.748±0.659和0.411±0.355 vs 1.488±1.359)、cleaved-Caspase3(1.274±1.438和1.036±0.853 vs 2.137±2.601)蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论芍药苷能够抑制高糖诱导的乳鼠皮质神经元细胞氧化应激反应及凋亡,其作用可能与调节凋亡相关蛋白有关。展开更多
文摘目的探讨芍药苷对高糖诱导大鼠皮质神经元氧化应激及凋亡的保护作用。方法从新生SD乳鼠大脑皮质分离和培养神经元,4 d后分为对照组、高糖组(50 mmol/L高糖)、低、中和高浓度组(2.5、5.0、10.0μmol/L芍药苷预处理再加50 mmol/L高糖)。采用细胞增殖活力检测试剂观察细胞活力,用吸光度(A)值表示;检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;通过2',7'-二氢二氯荧光素二乙酸酯荧光探针检测活性氧水平;Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;免疫荧光染色测定细胞线粒体膜电位(MMP);Western blot测定Bcl-2、Bax、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase3)蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组A值明显降低(0.452±0.505 vs 0.985±1.010,P<0.01)。与高糖组比较,低浓度组A值无明显变化(P>0.05),中和高浓度组A值增高(0.648±0.714和0.782±0.805 vs 0.452±0.505,P<0.05,P<0.01);SOD、CAT活性增加,活性氧水平降低,MMP表达增加;凋亡细胞减少;且中和高浓度组Bcl-2蛋白(0.506±0.601和0.742±0.803 vs 0.107±0.137)表达显著增加、Bax(0.748±0.659和0.411±0.355 vs 1.488±1.359)、cleaved-Caspase3(1.274±1.438和1.036±0.853 vs 2.137±2.601)蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论芍药苷能够抑制高糖诱导的乳鼠皮质神经元细胞氧化应激反应及凋亡,其作用可能与调节凋亡相关蛋白有关。
