蛇毒L-氨基酸氧化酶的生物学作用 被引量：4

1

作者 郭春梅 刘淑清 孙明忠 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2012年第B12期205-212,共8页

蛇毒(snake venom,SV)是天然的最丰富的蛋白(酶)源之一,而L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)是SV的主要蛋白(酶)组成成份,也是SV重要的活性和毒性蛋白成份,其生物学活性多样。近年来的研究表明,SV-LAAOs具有明显的影响血小板... 蛇毒(snake venom,SV)是天然的最丰富的蛋白(酶)源之一,而L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)是SV的主要蛋白(酶)组成成份,也是SV重要的活性和毒性蛋白成份,其生物学活性多样。近年来的研究表明,SV-LAAOs具有明显的影响血小板聚集、诱导细胞凋亡、细胞毒性、抑菌活性及抗病毒/HIV活性等生物功能。本文简述了SV-LAAO的酶学和结构特性,综述了SV-LAAO以上生物学作用及其相关作用机制,以期为今后深入研究SV-LAAO提供参考。 展开更多

关键词 蛇毒 L-氨基酸氧化酶 生物学活性

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大连刺参体腔液甘露糖结合凝集素序列的鉴定及分析 被引量：1

2

作者 谢广成 李丹彤 +3 位作者 丁文勇 刘洋 林琳 梁莎 《河北渔业》 2011年第1期5-8,24,共5页

根据NCBI提交的刺参体腔液(Apostichopus japonicus)甘露糖结合凝集素(Mannan-binding lectins,MBLs)序列(AY625513)设计引物,抽取刺参体腔液进行总RNA提取,采用RT-PCR技术,获得498 bp目的片段。通过克隆、测序确定得到刺参MBLs序列。... 根据NCBI提交的刺参体腔液(Apostichopus japonicus)甘露糖结合凝集素(Mannan-binding lectins,MBLs)序列(AY625513)设计引物,抽取刺参体腔液进行总RNA提取,采用RT-PCR技术,获得498 bp目的片段。通过克隆、测序确定得到刺参MBLs序列。将得到序列进行核苷酸和氨基酸序列比对,鉴定了大连刺参MBLs序列,并为我国不同区域刺参的进一步分类提供了科学的分子水平依据。 展开更多

关键词 刺参 甘露糖结合凝集素 序列分析

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白眉蝮蛇去整合素Adinbitor对Akt信号转导通路及对SSMC7721细胞增殖、迁移和凋亡的影响 被引量：6

3

作者 胡燕荣 刘淑清 +3 位作者 田余祥 于丽华 崔秀云 赵宝昌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期662-668,共7页

研究白眉蝮蛇去整合素adinbitor对蛋白激酶B(Akt)通路信号分子的影响及对SSMC7721细胞增殖、迁移及凋亡的影响.采用MTT法检测adinbitor对SSMC7721细胞增殖的作用;Hoechst33258试剂盒检测adinbitor对SSMC7721凋亡的影响;Transwell检测adi... 研究白眉蝮蛇去整合素adinbitor对蛋白激酶B(Akt)通路信号分子的影响及对SSMC7721细胞增殖、迁移及凋亡的影响.采用MTT法检测adinbitor对SSMC7721细胞增殖的作用;Hoechst33258试剂盒检测adinbitor对SSMC7721凋亡的影响;Transwell检测adinbitor对SSMC7721细胞迁移的作用;Western印迹检测adinbitor对信号分子Akt及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、核因子κB(NF-κB)的抑制蛋白IκB-α及NF-κBp65的影响;分光光度法检测其对半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3)活性的影响.结果显示,adinbitor可显著抑制SSMC7721细胞的迁移和增殖(与对照组比较,P<0.05),促进凋亡.在浓度梯度adinbitor作用下,Akt表达量基本不变,但其磷酸化受到抑制.细胞浆内IκB-α表达增加,细胞核内NF-κBp65表达减少,caspase-3活化倍数平均在2.24～3.85之间,以上作用均呈现剂量依赖性.结果说明,adinbitor可通过抑制Akt相关信号转导分子的作用而抑制SSMC7721细胞增殖和迁移,并促进其凋亡. 展开更多

关键词 去整合素 艾丁比特(adinbitor) 增殖 迁移 凋亡 蛋白激酶B 核因子ΚB 半胱天冬蛋白酶-3

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免疫球蛋白糖链结构异常和自身免疫性疾病 被引量：10

4

作者 张文利 燕秋 朱正美 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期348-352,共5页

免疫球蛋白在人体体液免疫中发挥巨大作用 ,而其均为糖蛋白 .免疫球蛋白中与蛋白质相连的寡糖链结构及组成对其功能有很大影响 ,当寡糖链糖基化异常时 ,可导致一些自身免疫性疾病 .从IgA肾病和类风湿性关节炎的结构基础、分子机制、酶... 免疫球蛋白在人体体液免疫中发挥巨大作用 ,而其均为糖蛋白 .免疫球蛋白中与蛋白质相连的寡糖链结构及组成对其功能有很大影响 ,当寡糖链糖基化异常时 ,可导致一些自身免疫性疾病 .从IgA肾病和类风湿性关节炎的结构基础、分子机制、酶学基础、临床意义等方面对这两类自身免疫性疾病的发病机制与糖基化异常之间的密切相关性予以详细论述 ,为这两类疾病在临床上建立一种特异、灵敏的血清学检测方法提供了理论基础 ,开辟了一条新途径 . 展开更多

关键词 免疫球蛋白 自身免疫性疾病 N-糖链 IGA肾病 类风湿性关节炎 糖基化 糖链结构异常

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抗核糖核酸酶抑制因子抗体的制备与纯化 被引量：9

5

作者 舒晓宏 李传刚 +4 位作者 张海涛 陈俊霞 田余祥 于丽华 崔秀云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期572-574,共3页

目的 :制备并纯化抗核糖核酸酶抑制因子 (RI)的抗体。方法 :从人胎盘中提取RI,经亲和层析纯化后免疫家兔制备RI抗体。用rProteinASepharoseFastFlow层析对抗RI抗体进行纯化 ,并用SDS PAGE、ELISA及Westernblot等进行鉴定。结果 :制备并... 目的 :制备并纯化抗核糖核酸酶抑制因子 (RI)的抗体。方法 :从人胎盘中提取RI,经亲和层析纯化后免疫家兔制备RI抗体。用rProteinASepharoseFastFlow层析对抗RI抗体进行纯化 ,并用SDS PAGE、ELISA及Westernblot等进行鉴定。结果 :制备并纯化了抗RI抗体 ,经SDS PAGE分析达到了电泳纯。结论 :获得了效价高、特异性强、稳定性好的抗RI抗体 。 展开更多

关键词 核糖核酸酶抑制因子 抗体 亲和层析 纯化

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蛋白激酶B及其在磷脂酰肌醇3-激酶介导的信号转导中的作用 被引量：11

6

作者 邹伟 李兆育 +1 位作者 李春蕾 崔肇春 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期120-124,共5页

蛋白激酶B(PKB)是原癌基因c akt的表达产物 ,它参与由生长因子激活的经磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI3K)介导的信号转导过程。与许多蛋白激酶相似 ,PKB分子具有一特殊的AH/PH结构域 (AH/PHdomain) ,后者能介导信号分子间的相互作用。PKB是PI3K... 蛋白激酶B(PKB)是原癌基因c akt的表达产物 ,它参与由生长因子激活的经磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI3K)介导的信号转导过程。与许多蛋白激酶相似 ,PKB分子具有一特殊的AH/PH结构域 (AH/PHdomain) ,后者能介导信号分子间的相互作用。PKB是PI3K直接的靶蛋白。PI3K产生的脂类第二信使PI 3,4, P2 和PI 3,4,5 P3等均能与PKB和磷酸肌醇依赖性蛋白激酶 (PDK)的AH/PH结构域结合 ,使二者转位于质膜上并活化。PDK也能使PKB磷酸化而激活 ,激活的PKB又进一步激活抗细胞凋亡机制、葡萄糖代谢 (糖原合成、糖酵解及葡萄糖的摄取 )及蛋白质合成等过程 。 展开更多

关键词 蛋白激酶B 磷脂酰肌醇3-激酶 信号转导

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不同发育时期小鼠胚泡表面Lewis寡糖抗原的表达 被引量：5

7

作者 葛常辉 王玉华 +3 位作者 杜昱光 王晗 赵瑾瑶 朱正美 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期342-346,共5页

在胚泡表面表达的Lewis寡糖抗原 (LewisX ,LewisY)在胚胎发育以及着床过程中起重要作用 .应用免疫印迹和免疫荧光等方法对着床前小鼠胚泡表面的Lewis寡糖抗原进行分析 .结果发现 :小鼠胚泡LewisX寡糖蛋白有 2 7kD、2 9kD、6 8kD和 80kD ... 在胚泡表面表达的Lewis寡糖抗原 (LewisX ,LewisY)在胚胎发育以及着床过程中起重要作用 .应用免疫印迹和免疫荧光等方法对着床前小鼠胚泡表面的Lewis寡糖抗原进行分析 .结果发现 :小鼠胚泡LewisX寡糖蛋白有 2 7kD、2 9kD、6 8kD和 80kD 4种 ,LewisY寡糖蛋白有 70kD和 90kD 2种 ;2种寡糖抗原均在 8细胞时期开始表达 ,其中 ,LewisY寡糖抗原在胚泡表面的表达持续升高 ,直至胚泡着床 ;而LewisX寡糖抗原的表达则在桑椹期后逐渐降低 ,但仍在胚胎期的囊胚腔侧的顶端可见有部分表达 ;应用RT PCR的分析结果显示 ,LewisX合成的关键糖基转移酶FUT9基因在 4细胞及桑椹期高表达 ,到胚泡期虽然强度明显减弱 ,但仍有表达 ;而LewisY合成关键酶FUT1基因在 4细胞未见表达 ,在桑椹和胚泡阶段均有表达并逐渐升高 ,表达趋势与相应寡糖的表达趋势基本一致 .结果说明 。 展开更多

关键词 发育时期 小鼠 胚泡表达 Lewis寡糖抗原 表达

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肝再生的调控及原癌基因表达 被引量：4

8

作者 邹原 宫德正 +1 位作者 崔秀云 梅懋华 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期7-12,共6页

肝脏再生过程中受到多种体液因素的调控。肝细胞生长因子（ＨＧＦ）、肝刺激因子（ＨＳＳ）等对肝细胞有促分裂作用；转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）等则具有抑制作用。此外，肝再生还需要去甲肾上腺素（ＮＥ）、胰岛素等辅助分裂原的... 肝脏再生过程中受到多种体液因素的调控。肝细胞生长因子（ＨＧＦ）、肝刺激因子（ＨＳＳ）等对肝细胞有促分裂作用；转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）等则具有抑制作用。此外，肝再生还需要去甲肾上腺素（ＮＥ）、胰岛素等辅助分裂原的存在，共同调节肝再生。肝细胞分裂增殖与原癌基因表达密切相关。肝细胞从静息期进入细胞周期，以及在整个细胞周期中，某些原癌基因有特征性的表达。 展开更多

关键词 肝损伤 肝再生 调控 原癌基因 表达

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耻垢分枝杆菌glmU基因克隆、表达及多克隆抗体的制备 被引量：4

9

作者 张文利 申慧 +1 位作者 辛毅 马郁芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期601-603,共3页

目的:制备抗耻垢分枝杆菌(Smeg)GlmU的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:用PCR技术扩增SmegglmU,构建可在大肠杆菌中表达的重组质粒pET29b-SmegglmU,用IPTG诱导表达,经Ni-NTA-Agarose柱层析纯化后,以其为免疫原制备抗SmegGlmU的... 目的:制备抗耻垢分枝杆菌(Smeg)GlmU的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:用PCR技术扩增SmegglmU,构建可在大肠杆菌中表达的重组质粒pET29b-SmegglmU,用IPTG诱导表达,经Ni-NTA-Agarose柱层析纯化后,以其为免疫原制备抗SmegGlmU的多克隆抗体,并以间接ELISA方法测定抗体效价,以Western blot方法鉴定抗体的特异性。结果:在大肠杆菌中得到了可溶性表达的SmegGlmU;以其免疫小鼠获得抗血清,Western blot鉴定显示获得了能特异性地作用于耻垢分枝杆菌GlmU的多克隆抗体,ELISA测定表明其效价高于1∶6400。结论:获得了能特异性地作用于耻垢分枝杆菌GlmU的高效价多克隆抗体,为应用反义RNA技术研究glmU基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 GlmU 多克隆抗体 分枝杆菌

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2D-DIGE-HPLC-nESIMS/MS对2,4-二硝基苯磺酸损伤HaCaT细胞差异蛋白质的鉴定 被引量：2

10

作者 孙明忠 杨帆 +3 位作者 侯志杰 郭春梅 郭一萌 刘淑清 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期146-151,共6页

采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白,建立了人角质形成细胞HaCaT受2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激前后的双向胶内差异凝胶电泳(2D-DIGE)图谱,每组平行样本数为3。凝胶采用蛋白荧光染料Deep Purple进行后染色(Post-stain)。DeCyder定量分析... 采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白,建立了人角质形成细胞HaCaT受2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激前后的双向胶内差异凝胶电泳(2D-DIGE)图谱,每组平行样本数为3。凝胶采用蛋白荧光染料Deep Purple进行后染色(Post-stain)。DeCyder定量分析软件在每块凝胶上平均检测到1 200个以上蛋白斑点,每块胶上都匹配得到的相同蛋白质斑点有846个。其中有7个斑点丰度变化在50%以上,统计学意义显著(P值小于0.05)。利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI MS/MS)成功鉴定5个表达上调的斑点分别为X染色体开放阅读框26(Cxorf26)、人辅分子伴侣23(PTGES3)、钙调蛋白(CALM3)、肌球蛋白轻链6(MYL6)和断裂点丛集区蛋白1(BANF1);2个表达下调蛋白斑点被鉴定为转录延伸因子B肽链2(TCEB2)和核糖体蛋白L23(RPL23)。除MYL6被报道与皮肤疾病相关外,其它蛋白与皮肤病变的关系有待研究。该研究得到的7个差异表达蛋白为DNBS类化学致癌物职业接触者皮肤病变研究提供了有价值的线索。 展开更多

关键词 2 4-二硝基苯磺酸 职业暴露 2D—DIGE HPLC—nESI MS/MS HACAT

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GM_3抑制人白血病J6－2细胞肌醇磷脂代谢循环 被引量：3

11

作者 马克里 刘彦 崔肇春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第3期249-253,共5页

采用无载体￣（３２）Ｐ和［￣３Ｈ］肌醇标记磷脂，观察了促分化剂神经节苷脂ＧＭ＿３对人单核样白血病Ｊ６－２细胞肌醇磷脂代谢的影响，ＧＭ＿３抑制［￣（３２）Ｐ］Ｐｉ和［￣３Ｈ］肌醇掺入Ｊ６－２细胞磷脂酰肌醇（ＰＩ），促进... 采用无载体￣（３２）Ｐ和［￣３Ｈ］肌醇标记磷脂，观察了促分化剂神经节苷脂ＧＭ＿３对人单核样白血病Ｊ６－２细胞肌醇磷脂代谢的影响，ＧＭ＿３抑制［￣（３２）Ｐ］Ｐｉ和［￣３Ｈ］肌醇掺入Ｊ６－２细胞磷脂酰肌醇（ＰＩ），促进［￣（３２）Ｐ］Ｐｉ和［￣３Ｈ］肌醇掺入磷脂酰肌醇－４，５－二磷酸（ＰＩＰ＿２），抑制［￣（３２）Ｐ］Ｐｉ掺入磷脂酸（ＰＡ），抑制［￣３Ｈ］肌醇掺入三磷酸肌醇（ＩＰ＿３）．ＧＭ＿３的上述作用均为浓度依赖性的，随ＧＭ＿３浓度的提高而增强．上述结果表明，ＧＭ＿３抑制Ｊ６－２细胞的肌醇磷脂代谢循环． 展开更多

关键词 神经节苷脂GM3 白血病 肌醇磷脂 代谢

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慢性炎症性肺动脉高压大鼠肺动脉蛋白激酶C的活性变化 被引量：3

12

作者 董旭 王钢 +3 位作者 王怀良 章新华 宗志宏 邢军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期875-877,共3页

目的观察慢性炎症性肺动脉高压大鼠在肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C(PKC)的活性变化。方法建立野百合碱诱导的慢性炎症性肺动脉高压大鼠模型,采用同位素标记的放射活性测定法检测肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C的活性。结... 目的观察慢性炎症性肺动脉高压大鼠在肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C(PKC)的活性变化。方法建立野百合碱诱导的慢性炎症性肺动脉高压大鼠模型,采用同位素标记的放射活性测定法检测肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C的活性。结果随着慢性炎症性肺动脉高压的进展,大鼠肺动脉PKC总活性和胞浆PKC活性先是逐渐上升,而后逐渐下降(与对照组相比,P<0.05),但胞膜PKC活性和PKC活性的膜质比持续上升(与对照组相比,P<0.05)。结论PKC活性的上调和PKC的转位活化可能参与了慢性炎症性肺动脉高压的形成过程。 展开更多

关键词 肺动脉高压 蛋白激酶C 炎症 野百合碱

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Ras-GTP-Raf复合物及其信号传导的分子机制 被引量：3

13

作者 李兆育 邹伟 崔肇春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期372-374,共3页

Ras GTP Raf复合物是RTKs介导的Ras通路的一个关键环节 ,在Ras GTP Raf复合物中信号传递的分子机制是Ras GTP Raf复合物作为一个整体开关信号传导、启动信号放大级联反应及可能导致肿瘤发生 .此外 ,PKC介导的Raf的激活也必需有Ras GTP ... Ras GTP Raf复合物是RTKs介导的Ras通路的一个关键环节 ,在Ras GTP Raf复合物中信号传递的分子机制是Ras GTP Raf复合物作为一个整体开关信号传导、启动信号放大级联反应及可能导致肿瘤发生 .此外 ,PKC介导的Raf的激活也必需有Ras GTP Raf复合物的存在 . 展开更多

关键词 信号传导 Ras-GTP-Raf复合物 肿瘤

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脂多糖增加小鼠巨噬细胞多磷酸肌醇脂代谢转换 被引量：2

14

作者 刘彦 王寅 +1 位作者 朱正美 崔肇春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第3期289-294,共6页

多磷酸肌醇脂（这里指ＰＩＰ和ＰＩＰ２）的代谢在细胞信息传递和膜运转中起着重要的作用．脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）于激活小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）初期（０．５～１ｈ）和后期（１６ｈ）明显增加来自... 多磷酸肌醇脂（这里指ＰＩＰ和ＰＩＰ２）的代谢在细胞信息传递和膜运转中起着重要的作用．脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）于激活小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）初期（０．５～１ｈ）和后期（１６ｈ）明显增加来自［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ的３２Ｐ参入Ｍφ的ＰＩＰ和ＰＩＰ２，３２Ｐ参入ＰＩＰ２的显著性大于ＰＩＰ．ＬＰＳ的这种作用在其激活Ｍφ的初期不受酪氨酸蛋白激酶抑制剂ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ、蛋白激酶Ａ激动剂（ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ）及百日咳毒素的影响；但佛波酯（ＰＭＡ）长时间预处理的Ｍφ（其ＰＫＣ活性被耗竭）再受ＬＰＳ刺激，［３２Ｐ］ＰＩＰ２水平较ＬＰＳ刺激未受ＰＭＡ预处理的Ｍφ明显降低．结果表明，ＬＰＳ于激活Ｍφ的初期和后期更显著增加ＰＩ４Ｐ－５激酶的活性，导致ＰＩＰ２合成增加，ＰＩＰ２合成的增加可能与Ｍφ激活时不同时期所表达的功能相关． 展开更多

关键词 脂多糖 巨噬细胞 多磷酸肌醇脂 代谢转换

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蛋白激酶C亚型在慢性“炎症性”肺动脉高压大鼠肺动脉中的表达 被引量：2

15

作者 董旭 王钢 +3 位作者 王怀良 章新华 宗志宏 邢军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期558-560,共3页

目的研究慢性“炎症性”肺动脉高压大鼠在肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C(PKC)亚型的表达。方法建立野百合碱诱导的慢性“炎症性”肺动脉高压大鼠模型,应用Westernblot技术检测肺动脉高压形成过程中大鼠肺动脉四种PKC亚型(PKCα、... 目的研究慢性“炎症性”肺动脉高压大鼠在肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C(PKC)亚型的表达。方法建立野百合碱诱导的慢性“炎症性”肺动脉高压大鼠模型,应用Westernblot技术检测肺动脉高压形成过程中大鼠肺动脉四种PKC亚型(PKCα、PKCβⅡ、PKCδ和PKCε)的表达变化。结果PKCα、PKCβⅡ和PKCδ亚型在正常和肺动脉高压大鼠肺动脉中均有表达,而PKCε亚型未检测到。在肺动脉高压形成过程中,大鼠肺动脉胞浆和胞膜组分表达的PKCα均逐渐上升,到第14天达到高峰后略有下降,且胞膜表达量的升高远比胞浆明显。胞浆PKCβⅡ和PKCδ表达量均在第8天达最高,而胞膜中二者均表现出持续升高的趋势。结论PKCα、PKCβⅡ和PKCδ亚型可能参与了慢性“炎症性”肺动脉高压的形成,其表达变化可能与其转位有关。 展开更多

关键词 肺动脉高压 PKC 野百合碱 蛋白质亚型

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白血病抑制因子对胚泡金属蛋白酶表达的影响 被引量：1

16

作者 孔英 葛常辉 +1 位作者 燕秋 朱正美 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期278-282,共5页

为了探讨白血病抑制因子 (LIF)对胚泡着床作用的机理 ,胚泡经与LIF及其特异性抗体培养后 ,通过RT PCR及免疫印迹技术 ,分析了LIF与着床前小鼠胚泡的基质金属蛋白酶 9(MMP9)表达和分泌之间的关系 .结果显示 :LIF可明显诱导胚泡MMP9的分... 为了探讨白血病抑制因子 (LIF)对胚泡着床作用的机理 ,胚泡经与LIF及其特异性抗体培养后 ,通过RT PCR及免疫印迹技术 ,分析了LIF与着床前小鼠胚泡的基质金属蛋白酶 9(MMP9)表达和分泌之间的关系 .结果显示 :LIF可明显诱导胚泡MMP9的分泌和基因表达 ;经LIF特异性抗体封闭后 ,胚泡MMP9的分泌及基因表达下降 ,且下降趋势随着LIF被封闭时间延长而减弱 ,对MMPs组织抑制因子 1(TIMP1)的影响则不明显 .说明LIF可能通过诱导MMP9的分泌及基因表达来影响胚泡对子宫内膜细胞外基质的水解 ,促进着床 . 展开更多

关键词 小鼠 胚泡 白血病抑制因子 基质金属蛋白酶 单克隆抗体 基因表达

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人FUT4基因近端启动子结构的初步分析 被引量：2

17

作者 杨雪松 刘帅 燕秋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期365-369,共5页

LeY是一种双岩藻糖化寡糖,在大多数上皮来源的肿瘤细胞(包括乳腺癌、卵巢癌等)中高表达.岩藻糖基转移酶Ⅳ(fucosyltransferaseⅣ,FUT4)是合成LeY的关键酶.前期工作发现,FUT4通过增加LeY糖的合成来促进细胞的增殖.但有关FUT4的转录调控... LeY是一种双岩藻糖化寡糖,在大多数上皮来源的肿瘤细胞(包括乳腺癌、卵巢癌等)中高表达.岩藻糖基转移酶Ⅳ(fucosyltransferaseⅣ,FUT4)是合成LeY的关键酶.前期工作发现,FUT4通过增加LeY糖的合成来促进细胞的增殖.但有关FUT4的转录调控机制尚不清楚.本文通过对人FUT4基因近端启动子进行生物信息学分析,并构建不同长度启动子序列荧光虫荧光素酶报告基因表达载体,分析其转录活性.使用First EF程序分析并获得FUT4近端启动子序列,采用PCR法扩增FUT4基因近端不同长度的启动子序列,定向克隆,获得不同长度的启动子重组质粒.重组质粒经双酶切及测序鉴定正确.荧光素酶活性分析不同长度的FUT4基因启动子片段的转录活性.结果显示,pGL6-FUT4-1.2 kb在MCF-7和MDA-MB-231细胞中转录活性明显升高(P<0.05).说明FUT4基因启动子区域定位于转录起始位点上游的-800～-1 600 bp的区域内. 展开更多

关键词 岩藻糖基转移酶Ⅳ 转录调控 启动子 报告基因

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GM3与Ca^(2+)-ATP酶的重建及其冷冻断裂电镜观察 被引量：4

18

作者 王丽华 杨小毅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第4期356-360,共5页

应用生物膜的分离与重建技术 ,将GM3、大豆磷脂与肌质网Ca2 + ATP酶共同重建在脂质体上 ,酶活力明显增加 .经负染、冷冻断裂复型后电镜等形态学方法证实形成的脂酶体囊泡封闭性好 ,脂酶体上Ca2 + ATP酶蛋白颗粒均匀。

关键词 神经节甙脂 冷冻断裂 腺苷三磷酸酶 钙

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Emb和EmbC功能结构域对分枝杆菌聚阿拉伯糖合成的影响 被引量：2

19

作者 张文利 马莉 +3 位作者 辛毅 徐跃飞 任风 马郁芳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1051-1060,共10页

本研究通过构建精确保留EmbB的N端跨膜区和EmbC的C端结构域相拼接的杂化质粒,将该质粒导入到embB和embC基因敲除的耻垢分枝杆菌中,观察杂合蛋白表达对这2种菌株细胞壁中阿拉伯糖合成的影响.结果表明,Embs蛋白家族成员N端完整的跨膜区能... 本研究通过构建精确保留EmbB的N端跨膜区和EmbC的C端结构域相拼接的杂化质粒,将该质粒导入到embB和embC基因敲除的耻垢分枝杆菌中,观察杂合蛋白表达对这2种菌株细胞壁中阿拉伯糖合成的影响.结果表明,Embs蛋白家族成员N端完整的跨膜区能使其正确地定位于细胞膜,此为其发挥作用的必要前提;尽管Emb家族成员间同源性高,但相互间的定位作用不能替代;Embs蛋白家族成员的C末端是其催化性的结构域,但在发挥作用时,需要其N末端的结构域能使其正确定位.本文通过研究Emb蛋白的功能性结构域,深入探讨Emb蛋白结构与功能间的关系,从而为研发有效的抗结核化合物,克服耐药性结核分枝杆菌提供理论依据. 展开更多

关键词 分枝杆菌 EmbB和EmbC蛋白 细胞壁

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超声辐照超声微泡介导siRNA转染膀胱癌T24细胞的实验研究 被引量：1

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作者 宋希双 杨德勇 +4 位作者 汪淑晶 车翔宇 王建伯 叶林 王丽娜 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期772-776,共5页

目的探讨超声辐照超声微泡介导siRNA转染人膀胱癌T24细胞的有效性。方法使用超声辐照超声微泡的方法介导FITC-siRNA转染人膀胱癌T24细胞,通过荧光显微镜及流式细胞学方法观察siRNA的转染效率,使用MTT方法观察细胞活力。结果与各阴性对... 目的探讨超声辐照超声微泡介导siRNA转染人膀胱癌T24细胞的有效性。方法使用超声辐照超声微泡的方法介导FITC-siRNA转染人膀胱癌T24细胞,通过荧光显微镜及流式细胞学方法观察siRNA的转染效率,使用MTT方法观察细胞活力。结果与各阴性对照组相比,超声辐照超声微泡的方法可以明显增加siRNA向T24细胞中的转染效率。随着超声辐照强度的增加,siRNA的转染效率在一定范围内有所提高,同时也增加了对T24细胞毒性。与脂质体介导的siRNA体外转染相比,超声辐照超声微泡介导的siRNA转染效率仍然较低。结论超声辐照超声微泡能够有效提高siRNA转染膀胱癌细胞的效率,有可能为膀胱癌的基因靶向治疗提供新的转染手段。 展开更多

关键词 膀胱癌 SIRNA 超声微泡 转染

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