目的:探讨卵巢癌基因1[ovarian cancer gene 1,OVCA1;也称为DPH2L(diphthamide synthesis protein 2-like)基因]体外对卵巢癌细胞系A2780迁移和侵袭能力的抑制作用。方法:采用脂质体法将GFP标记的携带OVCA1的重组质粒 pEGFP-OVCA1或GFP...目的:探讨卵巢癌基因1[ovarian cancer gene 1,OVCA1;也称为DPH2L(diphthamide synthesis protein 2-like)基因]体外对卵巢癌细胞系A2780迁移和侵袭能力的抑制作用。方法:采用脂质体法将GFP标记的携带OVCA1的重组质粒 pEGFP-OVCA1或GFP空白质粒分别转染A2780细胞后,G418筛选稳定转染细胞,有限稀释法筛选稳定转染细胞的单克隆细胞株,荧光显微镜检查绿色荧光蛋白的表达及RT-PCR方法检测A2780细胞OVCA1基因mRNA的表达。A2780-OVCA1细胞为实验组,A2780-GFP细胞和A2780细胞为对照组,采用划痕实验、Transwell体外迁移实验和Matrigel体外侵袭实验检测 OVCA1对A2780细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:重组质粒pEGFP-OVCA1转染后获得了稳定表达GFP标记OVCA1蛋白的A2780细胞株。A2780-OVCA1组划痕后的细胞迁移速度明显小于两对照组(P<0.05);A2780-OVCA1组穿过Transwell 滤膜的迁移细胞数明显少于两对照组(P<0.05);A2780-OVCA1组穿过Matrigel滤膜的侵袭细胞数明显少于两对照组(P< 0.05)。结论:OVCA1在体外具有显著抑制卵巢癌A2780细胞迁移和侵袭的作用。展开更多
