目的 :观察低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)增殖情况及低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达变化,探讨ASMC低氧反应机制。方法:体外传代(5代)培养大鼠ASMC分3组:常氧状态下培养...目的 :观察低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)增殖情况及低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达变化,探讨ASMC低氧反应机制。方法:体外传代(5代)培养大鼠ASMC分3组:常氧状态下培养为正常对照组(A组),低氧状态下培养为单纯低氧组(B组),低氧+HIF-1α抑制剂2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol,2ME)为低氧2ME干预组(C组)。甲基甲苯基硫(MTS)法检测细胞增殖,荧光实时定量RT-PCR检测HIF-1αmRNA表达,Western blot检测HIF-1α蛋白表达。结果:1大鼠ASMC增殖B组比A组更加明显(1.123±0.006 vs 0.809±0.003,P<0.05),C组较B组明显受抑制(1.012±0.005 vs 1.123±0.006,P<0.05);2HIF-1αmRNA和蛋白表达B组比A组表达明显增加(5.265±0.040 vs 0.449±0.017,P<0.05和0.905±0.013 vs 0.105±0.008,P<0.05),C组较B组表达明显减少(1.903±0.044 vs 5.265±0.040,P<0.05和0.278±0.012 vs 0.905±0.013,P<0.05)。ASMC增殖与HIF-1αmRNA表达呈正相关(r=0.850),与HIF-1α蛋白表达呈正相关(r=0.883)。结论:低氧刺激促进大鼠ASMC增殖,可能是由HIF-1α所介导。展开更多
文摘目的 :观察低氧状态下大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)增殖情况及低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达变化,探讨ASMC低氧反应机制。方法:体外传代(5代)培养大鼠ASMC分3组:常氧状态下培养为正常对照组(A组),低氧状态下培养为单纯低氧组(B组),低氧+HIF-1α抑制剂2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol,2ME)为低氧2ME干预组(C组)。甲基甲苯基硫(MTS)法检测细胞增殖,荧光实时定量RT-PCR检测HIF-1αmRNA表达,Western blot检测HIF-1α蛋白表达。结果:1大鼠ASMC增殖B组比A组更加明显(1.123±0.006 vs 0.809±0.003,P<0.05),C组较B组明显受抑制(1.012±0.005 vs 1.123±0.006,P<0.05);2HIF-1αmRNA和蛋白表达B组比A组表达明显增加(5.265±0.040 vs 0.449±0.017,P<0.05和0.905±0.013 vs 0.105±0.008,P<0.05),C组较B组表达明显减少(1.903±0.044 vs 5.265±0.040,P<0.05和0.278±0.012 vs 0.905±0.013,P<0.05)。ASMC增殖与HIF-1αmRNA表达呈正相关(r=0.850),与HIF-1α蛋白表达呈正相关(r=0.883)。结论:低氧刺激促进大鼠ASMC增殖,可能是由HIF-1α所介导。
