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美洲大蠊粪便中微生物的分离和鉴定及其抗菌活性分析
1
作者 官婷婷 许文慧 +2 位作者 肖光帅 杨大松 杨银河 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1190-1199,共10页
【目的】探究美洲大蠊Periplaneta americana粪便中具有抗菌活性的真菌和放线菌,为抗菌药物的开发提供微生物来源。【方法】利用稀释涂布法与选择培养法,从云南省大理白族自治州巍山县美洲大蠊养殖场收集的美洲大蠊成虫粪便中分离纯化... 【目的】探究美洲大蠊Periplaneta americana粪便中具有抗菌活性的真菌和放线菌,为抗菌药物的开发提供微生物来源。【方法】利用稀释涂布法与选择培养法,从云南省大理白族自治州巍山县美洲大蠊养殖场收集的美洲大蠊成虫粪便中分离纯化放线菌和真菌;采用牛津杯琼脂扩散法检测菌株代谢产物对6种病原细菌大肠杆菌Escherichia coli、粪肠球菌Enterococcus faecalis、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus)、铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa和鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium的抗菌活性;通过16S rDNA和ITS rDNA基因测序鉴定抗菌活性菌株,并利用邻接法构建抗菌活性菌株系统发育树。【结果】从美洲大蠊成虫粪便中分离出真菌17株,放线菌19株。共有6株真菌和12株放线菌表现出不同程度的抗菌活性,其中真菌EPAF15-EPAF17及放线菌EPAA12和EPAA17对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鼠伤寒沙门氏菌表现出较为广谱的抗菌活性。系统发育分析显示,具有抗菌活性的真菌隶属于镰刀菌属Fusarium、生丝毕赤酵母属Hyphopichia和丝孢酵母属Trichosporon;具有抗菌活性的放线菌隶属于链霉属Streptomyces。【结论】美洲大蠊成虫粪便中具有种类丰富的可培养微生物,其中的抗菌活性真菌和放线菌的发现不仅能作为进一步深入挖掘新型抗菌活性天然药物的重要微生物储备资源,也为特境微生物资源的充分利用提供了新的思路。 展开更多
关键词 美洲大蠊 粪便 真菌 放线菌 抗菌活性 分子鉴定 系统发育
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基胡蜂化学成分及其抗炎活性研究
2
作者 刘海杨 杨银河 杨大松 《中成药》 北大核心 2025年第8期2593-2597,共5页
目的研究基胡蜂Vespa basalis(Smith)化学成分及其抗炎活性成分。方法采用Sephadex LH-20凝胶、硅胶柱色谱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用RAW264.7细胞模型评价其体外抗炎活性。结果从中分离得到11个... 目的研究基胡蜂Vespa basalis(Smith)化学成分及其抗炎活性成分。方法采用Sephadex LH-20凝胶、硅胶柱色谱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用RAW264.7细胞模型评价其体外抗炎活性。结果从中分离得到11个化合物,分别鉴定为2-吡咯甲酸(1)、3-吲哚甲酸(2)、对羟基苯甲酸(3)、苯乙酸(4)、5α,8α-epidioxy-cholest-6-en-3β-ol(5)、(2R,3S)-2-(3′,4′-dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-7-(N-acetyl-2″-aminethylene)-1,4-benzodioxane(6)、(2R,3S)-2-(3′,4′-dihydroxyphenyl)-3-acetylamino-6-(N-acetyl-2″-aminoethyl)-1,4-benzodioxane(7)、N-乙酰多巴胺(8)、对羟基苯乙酸(9)、(R)-N-[2-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-methoxyethyl]acetamide(10)、(±)-cryptamide A(11)。化合物3、5~6、10对RAW264.7细胞释放NO具有抑制作用,且呈剂量依赖性。结论化合物1、2、5为首次从昆虫中分离得到,6~7、10~11为首次从胡蜂属昆虫中分离得到。化合物3、5~6、10具有抗炎活性。 展开更多
关键词 基胡蜂 化学成分 分离鉴定 抗炎活性
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药用昆虫喙尾琵琶甲肠道抗菌活性放线菌的筛选及鉴定 被引量：3
3
作者 王明明 殷鹏凯 +3 位作者 李铭晖 杨自忠 杨大松 杨银河 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1106-1114,共9页
【目的】探究药用昆虫喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera肠道具有抗菌活性的放线菌,为抗菌药物开发提供新的放线菌资源。【方法】结合稀释涂布法和选择培养法从喙尾琵琶甲成虫肠道分离放线菌。以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methieillin-resis... 【目的】探究药用昆虫喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera肠道具有抗菌活性的放线菌,为抗菌药物开发提供新的放线菌资源。【方法】结合稀释涂布法和选择培养法从喙尾琵琶甲成虫肠道分离放线菌。以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methieillin-resistant Staphylococus aureus)、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌Escherichia coli、粪肠球菌Enterococcus faecalis、鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium和铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa 6株致病细菌以及黑曲霉Aspergillus niger、青霉菌Penicillium expansum和白色念珠菌Canidia albicans 3株致病真菌为指示菌,通过牛津杯琼脂扩散法测试放线菌次生代谢产物的抗菌活性。随后,采用分子生物学方法进行16S rRNA序列分析鉴定活性显著的18株放线菌并构建系统发育树。【结果】从喙尾琵琶甲成虫肠道中分离到176株共生放线菌,初步活性筛选结果显示其中46株放线菌表现出不同程度的抗菌活性。多株放线菌对致病菌具有广谱的抑菌作用且抑菌圈直径超过阳性对照药。选择抑菌圈直径大于15 mm的18株放线菌进行分子鉴定,结果显示均为链霉菌属Streptomyces。【结论】喙尾琵琶甲肠道含有丰富的抗菌活性放线菌资源。 展开更多
关键词 喙尾琵琶甲 肠道放线菌 抗菌活性 分子鉴定 系统发育树
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金环胡蜂虫草来源真菌的分离鉴定及其代谢产物的抗菌、抗炎活性评价 被引量：1
4
作者 崔贵志 王明明 +1 位作者 杨大松 杨银河 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1138-1148,共11页
目的探究金环胡蜂虫草的虫生真菌及内生真菌的多样性,筛选出具有抗菌、抗炎活性的真菌,为活性天然药物的开发提供微生物资源。方法通过稀释涂布法从金环胡蜂虫草有性型虫生真菌的子座和子实体、菌核组织以及虫体三部分分离纯化真菌。采... 目的探究金环胡蜂虫草的虫生真菌及内生真菌的多样性,筛选出具有抗菌、抗炎活性的真菌,为活性天然药物的开发提供微生物资源。方法通过稀释涂布法从金环胡蜂虫草有性型虫生真菌的子座和子实体、菌核组织以及虫体三部分分离纯化真菌。采用分子生物学方法对子座和子实体部位以及虫生真菌、内生真菌进行ITS rDNA序列分析,并构建系统发育树以确定种属分类情况。以马铃薯葡萄糖培养基(potato dextrose agar,PDA)对所有真菌进行小规模培养。以6株病原细菌为指示菌,通过牛津杯琼脂扩散法检测真菌代谢产物粗提物的抗菌活性。并构建脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW 264.7细胞炎症模型,对粗提物进行抗炎活性筛选。结果有性型的虫生真菌与蜂头线虫草属真菌Ophiocordyceps sphecocephala的同源性最高(>98%)。从子座、子实体和菌核组织分离获得33株虫生真菌,虫体分离获得21株内生真菌。这54株真菌经鉴定隶属于2门,4纲,9目,11科,16属。活性检测结果显示,10株真菌粗提物表现出对不同病原细菌的抑制作用,38株真菌粗提物具有不同程度的抗炎活性。结论金环胡蜂虫草具有丰富的虫生真菌及内生真菌物种,其代谢产物具有抗菌、抗炎活性,这为后续活性先导化合物的发现提供了有价值的微生物资源。 展开更多
关键词 金环胡蜂虫草 真菌 抗菌活性 抗炎活性 分子鉴定 系统发育树
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美洲大蠊成虫肠道抗细菌共生放线菌的筛选及鉴定 被引量：2
5
作者 殷鹏凯 王明明 +2 位作者 杨自忠 杨大松 杨银河 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1444-1451,共8页
【目的】鉴于野外美洲大蠊Periplaneta americana对恶劣环境适应性强,本研究旨在从云南省大理州的野外美洲大蠊成虫肠道中分离、筛选出抗细菌活性放线菌,为抗生素开发提供菌种资源。【方法】采用涂布平板法和平板划线法对美洲大蠊成虫... 【目的】鉴于野外美洲大蠊Periplaneta americana对恶劣环境适应性强,本研究旨在从云南省大理州的野外美洲大蠊成虫肠道中分离、筛选出抗细菌活性放线菌,为抗生素开发提供菌种资源。【方法】采用涂布平板法和平板划线法对美洲大蠊成虫肠道放线菌进行分离;以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa、粪肠球菌Enterococcus faecalis、大肠杆菌Escherichia coli和鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium共6种人体病原细菌为指示菌株,采用牛津杯法对分离自这些放线菌的次生代谢产物进行抗菌活性测定;通过形态学特征和16S rRNA基因序列分析,对具有广谱和明显抗菌活性的放线菌进行鉴定,并经16SrRNA基因序列的BlAST同源性比对及系统发育分析确定它们的分类地位。【结果】从美洲大蠊成虫肠道共分离获得41株放线菌。抗菌活性测定结果表明,34株(82.9%)放线菌对至少1种指示病原细菌具有抑制作用,其中有7株对3种以上病原细菌具有抑制作用,9株表现出明显的抗菌活性。根据系统发育分析结果,这些放线菌均被鉴定为链霉菌属Streptomyces spp.。【结论】野外美洲大蠊成虫肠道含有丰富的抗细菌活性的放线菌资源,为后续挖掘新型抗生素提供重要的微生物资源。 展开更多
关键词 美洲大蠊 肠道放线菌 抗细菌活性 16S rRNA 分子鉴定
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喙尾琵琶甲肠道来源真菌的分离及其次级代谢产物的抗菌、抗肿瘤活性筛选
6
作者 李铭晖 王明明 +4 位作者 殷鹏凯 杨自忠 肖怀 杨大松 杨银河 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期885-893,共9页
目的研究药用昆虫喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera成虫肠道的活性真菌,为抗菌、抗肿瘤活性天然产物的开发提供新的真菌资源。方法结合稀释涂布法和选择培养法对喙尾琵琶甲成虫肠道的真菌进行分离纯化;以9株病原菌为指示菌,通过牛津杯琼脂... 目的研究药用昆虫喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera成虫肠道的活性真菌,为抗菌、抗肿瘤活性天然产物的开发提供新的真菌资源。方法结合稀释涂布法和选择培养法对喙尾琵琶甲成虫肠道的真菌进行分离纯化;以9株病原菌为指示菌,通过牛津杯琼脂扩散法检测肠道真菌次级代谢产物的抗菌活性;结合形态学,通过分子生物学方法进行ITS序列比对,鉴定抗菌活性显著的真菌并构建系统发育树;采用5株肿瘤细胞,对已鉴定的菌株进行抗肿瘤活性测试。结果从喙尾琵琶甲肠道中分离获得108株真菌,其中17株真菌具有不同程度的抗菌活性;选择7株抑菌活性显著(抑菌圈直径≥14 mm)的真菌进行鉴定;研究还显示3株真菌的次级代谢产物具有广谱的抗肿瘤活性。结论喙尾琵琶甲肠道来源真菌的次级代谢产物具有一定的抗菌及抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 喙尾琵琶甲 肠道真菌 抗菌活性 抗肿瘤活性 分子鉴定 系统发育树
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