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RNA干扰技术抑制类风湿关节炎成纤维细胞COX-2合成 被引量:2
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作者 姜林娣 王汉洲 +3 位作者 郭津生 赵凤娣 薛如意 王吉耀 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期302-306,312,共6页
目的体外合成针对人环氧化酶-2(hCOX-2)的小分子干扰RNA(siRNA),并转染入人滑膜成纤维细胞,通过比较不同siRNA抑制COX-2 mRNA表达、COX-2蛋白合成以及下游产物PGE2水平,旨在确定特异性阻断人滑膜成纤维细胞COX-2的siRNA。方法分离、培... 目的体外合成针对人环氧化酶-2(hCOX-2)的小分子干扰RNA(siRNA),并转染入人滑膜成纤维细胞,通过比较不同siRNA抑制COX-2 mRNA表达、COX-2蛋白合成以及下游产物PGE2水平,旨在确定特异性阻断人滑膜成纤维细胞COX-2的siRNA。方法分离、培养和传代人类风湿关节炎(类风关)滑膜成纤维细胞。设计合成4条针对hCOX-2 mRNA siRNA(1#-4#siRNA),1条随机序列siRNA。设立1#-4#siRNA和随机序列siRNA组(NC)及未转染对照组(CTL组)。应用Lipofect AMINE2000将上述siRNA分别转染人滑膜成纤维细胞,4h后各培养孔加入终浓度为100nmol/L的佛波酯。转染36h、48h后,各组提取蛋白质和总RNA,应用RT-PCR检测hCOX-2 mRNA表达水平,通过Western Blot检测hCOX-2蛋白表达水平。采用ELISA方法检测各组上清液PGE2的水平。结果转染36h,PCR结果显示,CTL、NC、1#siRNA、2#RNA、3#RNA、4#siRNA、阳性对照HeLa细胞组hCOX-2 mRNA电泳条带密度值分别为1、0.72、0.3、0.25、0.4、0.04、2.1。WesternBlot结果提示上述各组hCOX-2蛋白密度值分别为1、1.04、0.52、0.39、0.9、0和2.48。转染48h后,各组hCOX-2蛋白条带密度值分别为0.05、0.52、0.51、0.9和0.15。转染24h、48h和72h后,4#siRNA组培养上清液PGE2的水平较其他各组低。结论4#siRNA能有效抑制人滑膜成纤维细胞COX-2 mRNA表达和COX-2蛋白的合成,且上清液中PGE2水平最低,证实4#siRNA能特异性阻断COX-2在滑膜成纤维细胞表达。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 环氧化酶 前列腺素E2 RNA干扰 成纤维细胞
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血清IgG水平和IgG4相关性疾病反应指数在IgG4-RD活动性评估中的应用 被引量:4
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作者 纪宗斐 马玲瑛 +3 位作者 张丽娟 马莉莉 陈慧勇 姜林娣 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期647-653,共7页
目的验证IgG4相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)反应指数(responder index,RI)在IgG4-RD疾病活动性评估中的诊断效率,并进一步探索新的生物学标志物。方法纳入117例符合2012年日本标准的IgG4-RD患者,由3名专科专家通过医师整体... 目的验证IgG4相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)反应指数(responder index,RI)在IgG4-RD疾病活动性评估中的诊断效率,并进一步探索新的生物学标志物。方法纳入117例符合2012年日本标准的IgG4-RD患者,由3名专科专家通过医师整体评估(physician global assessment,PGA)将患者分为活动组(n=78)和稳定组(n=39)。总结患者的一般情况、临床资料、实验室检查和IgG4-RD RI,分析两组患者一般情况和实验室检查的差异。进一步分析血清标志物及IgG4-RD RI评估IgG4-RD疾病活动性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和曲线下面积。结果活动组IgG4-RD患者的外周血嗜酸性粒细胞百分比、血小板、血沉、C反应蛋白、IgG、IgG4、球蛋白、白介素6(interleukin-6,IL-6)和可溶性IL-2受体(soluble IL-2 receptor,sIL2R)较稳定组显著升高;血红蛋白、总胆固醇和甘油三酯显著降低。IgG、IgG4、球蛋白、血沉和sIL-2R水平均与IgG4-RD RI呈正相关(P<0.05)。IgG4-RD RI和血清IgG水平用于判断疾病活动性的曲线下面积达到0.940和0.916。以IgG4-RD RI≥6为标准,敏感度和特异度分别可达到92.3%和86.5%;以IgG≥11.6 g/L为标准,敏感度和特异度为89.1%和82.6%。结论在IgG4-RD活动性评估中,IgG4-RD RI评分具有最高的诊断效率,血清IgG水平也可作为疾病活动性的标志物,敏感度和特异度较高,IgG4-RD RI评分和血清IgG水平是临床诊治中可靠、实用的评估方法。 展开更多
关键词 IgG4相关性疾病(IgG4-RD) IGG4 IgG 球蛋白 反应指数(RI)
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IgG4相关性疾病(IgG4-RD)发病机制的研究进展 被引量:11
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作者 纪宗斐 马玲瑛 姜林娣 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期114-118,142,共6页
IgG4相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)是以多发脏器肿大、血清IgG4升高为特点的一类自身免疫性疾病,发病机制仍不明确。病原体感染导致抗原呈递细胞表面模式识别受体激活,通过抗原呈递促进CD4+T细胞激活,分化为Th1、Th2、Treg... IgG4相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)是以多发脏器肿大、血清IgG4升高为特点的一类自身免疫性疾病,发病机制仍不明确。病原体感染导致抗原呈递细胞表面模式识别受体激活,通过抗原呈递促进CD4+T细胞激活,分化为Th1、Th2、Treg和Tfh细胞,产生一系列T细胞因子,进一步促进B细胞活化并转化为浆细胞,产生IgG4。而巨噬细胞和Treg细胞产生的转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)和血小板源性生长因子等进一步促进了纤维化的发生。以上细胞因子和免疫细胞参与IgG4-RD发病,为今后的治疗策略提供了新的思路。 展开更多
关键词 IgG4相关性疾病(IgG4-RD) 发病机制 浆细胞
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