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碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌中bla_(NDM)基因型检测及流行病学分析 被引量:9
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作者 王峰 孙景勇 +1 位作者 张芳芳 袁轶群 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期56-60,共5页
目的检测上海交通大学附属瑞金医院临床分离碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌产NDM型碳青霉烯酶的情况,研究其流行病学特征。方法收集该医院2013年11月-2015年1月临床分离的18株对亚胺培南或美罗培南药敏纸片抑菌圈直径≤19 mm的大肠埃希菌... 目的检测上海交通大学附属瑞金医院临床分离碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌产NDM型碳青霉烯酶的情况,研究其流行病学特征。方法收集该医院2013年11月-2015年1月临床分离的18株对亚胺培南或美罗培南药敏纸片抑菌圈直径≤19 mm的大肠埃希菌。采用聚合酶链反应(PCR)检测bla_(NDM)型碳青霉烯酶基因并对阳性产物进行测序以确定基因型别;通过质粒转移接合试验了解耐药基因是否可以通过质粒进行水平传播;应用多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)对产NDM酶的大肠埃希菌进行同源性分析。结果 18株耐碳青霉烯类大肠埃希菌中6株扩增到bla_(NDM)基因,其中4株为bla_(NDM-1),2株为bla_(NDM-5)。6株产NDM酶的大肠埃希菌中3株成功进行转移接合试验,MLST发现6株产酶菌株共分为5个ST型(ST5018,ST354,ST405,ST2967,ST156),与PFGE结果中5种不同的DNA谱型(A^E)相对应,其中2株菌株同为ST5018型且为PFGE-DNA谱型中A型的不同亚型(A1,A2)。结论本研究检出产NDM酶碳青霉烯类耐药大肠埃希菌。bla_(NDM)阳性病例多为散发,但由质粒介导的水平传播在bla_(NDM)的播散中可能起重要作用。上海地区首次检出NDM-5型碳青霉烯酶,应引起重视。 展开更多
关键词 NDM型碳青霉烯酶 大肠埃希菌 转移接合实验 多位点序列分型 脉冲场凝胶电泳
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小鼠脾内免疫法制备重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体 被引量:1
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作者 武楠 周丹秋 +2 位作者 阮卫 吴丽桂 张慧涨 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期184-188,共5页
目的制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,用于早期弓形虫感染的抗原检测。方法用弓形虫RH株重组抗原SAG1进行常规免疫结合小鼠脾内免疫,杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA法筛选阳性克隆,经亚克隆建株。诱生腹水法制备抗体,protein-... 目的制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,用于早期弓形虫感染的抗原检测。方法用弓形虫RH株重组抗原SAG1进行常规免疫结合小鼠脾内免疫,杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA法筛选阳性克隆,经亚克隆建株。诱生腹水法制备抗体,protein-G亲合层析法进行纯化,测定其亚类、效价;Westernblot法分析其特异性;夹心-ELISA法检测抗体的敏感性及特异性;检测弓形虫感染小鼠血液循环抗原,同时用PCR法检测弓形虫B1基因并比较结果。结果获得2株抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体3B6、10C4,抗体均为IgG1,轻链均为κ链,Western blot显示2株单抗均能识别弓形虫天然的和重组的SAG1抗原。3B6、10C4敏感度分别为31.3ng和62.5ng,与血吸虫病、钩虫病及疟疾患者血清均无交叉反应。弓形虫早期感染检测PCR及ELISA法阳性检出率分别为63.2%、47.4%。结论成功制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,初步用于早期弓形虫感染诊断。 展开更多
关键词 重组SAG1抗原 脾内免疫 单克隆抗体 夹心-ELISA 小鼠
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多巴胺受体D1(DRD1)通过抑制cAMP信号通路促进胶质瘤的增殖、侵袭和迁移 被引量:2
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作者 燕婧 杨瑞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1116-1121,共6页
目的通过检测多巴胺受体D1(DRD1)蛋白在胶质瘤组织中的表达水平,分析DRD1的激动剂和拮抗剂对U87神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响,初步探讨DRD1对c AMP通路的作用。方法免疫组织化学染色法检测60例神经胶质瘤组织及其癌旁组织中DRD... 目的通过检测多巴胺受体D1(DRD1)蛋白在胶质瘤组织中的表达水平,分析DRD1的激动剂和拮抗剂对U87神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响,初步探讨DRD1对c AMP通路的作用。方法免疫组织化学染色法检测60例神经胶质瘤组织及其癌旁组织中DRD1蛋白的表达和分布,Western blot法检测其蛋白水平。培养U87细胞,采用DRD1激动剂SKF38393和拮抗剂SCH23390处理后,CCK-8细胞增殖实验检测处理后细胞增殖情况,Transwell^(TM)侵袭实验检测细胞侵袭情况、划痕实验检测细胞迁移能力; Western blot法检测c AMP通路及其相关蛋白[p44/42丝裂原活化蛋白激酶(p44/42MAPK)、磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶(p-p44/42MAPK)和蛋白激酶A(PKA)]的蛋白水平)。结果神经胶质瘤组织中DRD1的表达水平明显高于其癌旁组织。SCH23390明显抑制U87神经胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,而SKF38393明显促进U87细胞的增殖、侵袭和迁移。SCH23390激活c AMP及其相关通路蛋白的表达,而SKF38393抑制其表达。结论 DRD1蛋白在胶质瘤组织高表达,DRD1通过负向调节c AMP信号通路促进胶质瘤细胞的增殖、侵袭与迁移。 展开更多
关键词 多巴胺受体D1(DRD1) 神经胶质瘤 增殖 侵袭 迁移
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