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高渗状态下肾脏COX2表达的基因调控
1
作者
卢燕雯
陈靖
+1 位作者
顾勇
林善锬
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期445-450,共6页
目的本研究旨在阐明核转录因子C/EBPβ和NFκB是否协同作用影响高渗状态下COX2的基因表达。方法体外培养肾髓间质细胞(RMICs),通过病毒转导或质粒转染技术将体外构建的COX2基因突变载体转入培养细胞,经高渗培养不同时间后,采用免疫印迹...
目的本研究旨在阐明核转录因子C/EBPβ和NFκB是否协同作用影响高渗状态下COX2的基因表达。方法体外培养肾髓间质细胞(RMICs),通过病毒转导或质粒转染技术将体外构建的COX2基因突变载体转入培养细胞,经高渗培养不同时间后,采用免疫印迹、荧光素酶报告基因活性检测等方法观察培养细胞COX2蛋白表达及活性的改变,同时应用染色质免疫沉淀分析法观察COX2基因与C/EBPβ、NFκB结合能力的改变。结果免疫印迹显示,高渗刺激能明显提高对照组COX2蛋白表达,应用突变序列IκBm阻断NFκB活性后COX2表达明显下降,应用突变序列C/EBP-βP20阻断C/EBPβ亦能显著降低COX2表达,但同时运用突变序列C/EBP-βP20和IκBm无法使COX2表达进一步下降。然而,将野生型、含NFκB或C/EBPβ结合位点突变的COX2启动子萤火虫荧光素酶报告基因的重组质粒转染至RMICs,高渗培养24h后显示:高渗刺激能显著增加野生型组COX2荧光素酶的活性,NFκB位点突变无法阻断该作用,而C/EBPβ结合位点突变却能完全抑制COX2高活性。进一步应用染色质免疫沉淀分析研究显示,高渗刺激能显著增加NFκB(P65)或C/EBPβ与COX2基因的结合,并呈时间依赖性;NFκB结合位点突变不能消除高渗诱导的NFκB(P65)与COX2基因的结合增强,但在NFκB和C/EBPβ结合位点同时突变组该作用被阻断。结论在NFκB活化COX2基因转录过程中需要另一个核转录因子C/EBPβ的参与,C/EBPβ途径在高渗诱导肾脏内髓间质细胞表达COX2过程中具有重要作用。
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关键词
环加氧酶-2
核转录因子ΚB
核转录因子C/EBPβ
高渗应激
肾髓间质细胞
在线阅读
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职称材料
非糖尿病腹膜透析患者胰岛素抵抗及脂代谢紊乱相关分析
被引量：
7
2
作者
张敏
朱彤莹
+5 位作者
李芸
田菁
孙怡
徐美珍
顾勇
林善锬
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期396-400,共5页
目的观测非糖尿病腹膜透析患者胰岛素抵抗和脂代谢紊乱发生情况及分析其相关影响因素。方法入选非糖尿病透析龄大于3个月规律连续不卧床腹膜透析(CAPD)患者48人,在相同条件下测定其身高、体重、体重指数(BMI),空腹血糖、空腹胰岛素及血...
目的观测非糖尿病腹膜透析患者胰岛素抵抗和脂代谢紊乱发生情况及分析其相关影响因素。方法入选非糖尿病透析龄大于3个月规律连续不卧床腹膜透析(CAPD)患者48人,在相同条件下测定其身高、体重、体重指数(BMI),空腹血糖、空腹胰岛素及血脂等生化指标,以生物素-亲和素酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)测定脂联素、瘦素、抵抗素等脂质因子。结果非糖尿病腹透患者48人(男20,女28)稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)为6.32±8.97,其中4位患者在透析过程中发展为糖尿病。根据IR中位数2.59分组,IR≥2.59组(n=24)与<2.59组(n=24)两组比较发现在BMI、三酰甘油、铁蛋白和脂联素、瘦素存在显著差异(P<0.05)。相关分析结果表明IR与铁蛋白(P<0.01)、血脂(胆固醇、三酰甘油)分别成正相关(P<0.05)。结论非糖尿病腹透患者存在胰岛素抵抗,肥胖、高三酰甘油血症、脂联素、瘦素等因素与胰岛素抵抗相关。
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关键词
胰岛素抵抗
高脂血症
脂联素
瘦素
腹膜透析
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职称材料
题名
高渗状态下肾脏COX2表达的基因调控
1
作者
卢燕雯
陈靖
顾勇
林善锬
机构
复旦大学附属华山医院肾脏科-复旦大学肾脏病研究所
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期445-450,共6页
基金
国家自然科学基金(30400211)
教育部"211工程"资助项目
文摘
目的本研究旨在阐明核转录因子C/EBPβ和NFκB是否协同作用影响高渗状态下COX2的基因表达。方法体外培养肾髓间质细胞(RMICs),通过病毒转导或质粒转染技术将体外构建的COX2基因突变载体转入培养细胞,经高渗培养不同时间后,采用免疫印迹、荧光素酶报告基因活性检测等方法观察培养细胞COX2蛋白表达及活性的改变,同时应用染色质免疫沉淀分析法观察COX2基因与C/EBPβ、NFκB结合能力的改变。结果免疫印迹显示,高渗刺激能明显提高对照组COX2蛋白表达,应用突变序列IκBm阻断NFκB活性后COX2表达明显下降,应用突变序列C/EBP-βP20阻断C/EBPβ亦能显著降低COX2表达,但同时运用突变序列C/EBP-βP20和IκBm无法使COX2表达进一步下降。然而,将野生型、含NFκB或C/EBPβ结合位点突变的COX2启动子萤火虫荧光素酶报告基因的重组质粒转染至RMICs,高渗培养24h后显示:高渗刺激能显著增加野生型组COX2荧光素酶的活性,NFκB位点突变无法阻断该作用,而C/EBPβ结合位点突变却能完全抑制COX2高活性。进一步应用染色质免疫沉淀分析研究显示,高渗刺激能显著增加NFκB(P65)或C/EBPβ与COX2基因的结合,并呈时间依赖性;NFκB结合位点突变不能消除高渗诱导的NFκB(P65)与COX2基因的结合增强,但在NFκB和C/EBPβ结合位点同时突变组该作用被阻断。结论在NFκB活化COX2基因转录过程中需要另一个核转录因子C/EBPβ的参与,C/EBPβ途径在高渗诱导肾脏内髓间质细胞表达COX2过程中具有重要作用。
关键词
环加氧酶-2
核转录因子ΚB
核转录因子C/EBPβ
高渗应激
肾髓间质细胞
Keywords
cyclooxygenase-2
nuclear transcription factor kappa B（NFκB）
CCAAT/enhancerbinding protein
hypertonic stress
renal medullary interstitial cells
分类号
Q753 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
非糖尿病腹膜透析患者胰岛素抵抗及脂代谢紊乱相关分析
被引量：
7
2
作者
张敏
朱彤莹
李芸
田菁
孙怡
徐美珍
顾勇
林善锬
机构
复旦大学附属华山医院肾脏科-复旦大学肾脏病研究所
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期396-400,共5页
文摘
目的观测非糖尿病腹膜透析患者胰岛素抵抗和脂代谢紊乱发生情况及分析其相关影响因素。方法入选非糖尿病透析龄大于3个月规律连续不卧床腹膜透析(CAPD)患者48人,在相同条件下测定其身高、体重、体重指数(BMI),空腹血糖、空腹胰岛素及血脂等生化指标,以生物素-亲和素酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)测定脂联素、瘦素、抵抗素等脂质因子。结果非糖尿病腹透患者48人(男20,女28)稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)为6.32±8.97,其中4位患者在透析过程中发展为糖尿病。根据IR中位数2.59分组,IR≥2.59组(n=24)与<2.59组(n=24)两组比较发现在BMI、三酰甘油、铁蛋白和脂联素、瘦素存在显著差异(P<0.05)。相关分析结果表明IR与铁蛋白(P<0.01)、血脂(胆固醇、三酰甘油)分别成正相关(P<0.05)。结论非糖尿病腹透患者存在胰岛素抵抗,肥胖、高三酰甘油血症、脂联素、瘦素等因素与胰岛素抵抗相关。
关键词
胰岛素抵抗
高脂血症
脂联素
瘦素
腹膜透析
Keywords
insulin resistance
dyslipidemia
adiponectim leptim peritoneal dialysis
分类号
R692.5 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高渗状态下肾脏COX2表达的基因调控
卢燕雯
陈靖
顾勇
林善锬
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
非糖尿病腹膜透析患者胰岛素抵抗及脂代谢紊乱相关分析
张敏
朱彤莹
李芸
田菁
孙怡
徐美珍
顾勇
林善锬
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
7
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