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应用PCR-RFLP技术检测阿德福韦耐药相关性HBV变异
被引量：
1
1
作者
毛日成
张继明
+4 位作者
尹有宽
秦艳丽
章婉琴
邬祥惠
翁心华
《中国感染与化疗杂志》
CAS
2007年第5期362-367,共6页
目的建立一种简便、快速、实用的检测阿德福韦(ADV)耐药相关性HBV变异(rtA181V/T/S和rtN236T变异)的方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计套式-PCR引物,使野毒株的PCR产物上游末端引入BglI的酶切位点,使rt236变异株的PCR产物下...
目的建立一种简便、快速、实用的检测阿德福韦(ADV)耐药相关性HBV变异(rtA181V/T/S和rtN236T变异)的方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计套式-PCR引物,使野毒株的PCR产物上游末端引入BglI的酶切位点,使rt236变异株的PCR产物下游末端引入BseDI(SecI)的酶切位点,建立PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法。用此方法分别检测含rt181变异株、rt236变异株及野毒株质粒和3例ADV耐药慢性乙型肝炎患者血清标本。将变异株和野毒株配成不同比例,再用此方法检测,以了解该方法的敏感性。结果本研究建立的PCR—RFLP方法可同时检测rt181变异和rt236变异;用此方法检测血清标本,结果与测序及克隆分析一致;此方法可检测出标本中10%的变异株。结论应用PCR- RFLP方法可同时检测rtA181V/T/S和rtN236T变异,具有较高的敏感性,可用于ADV耐药变异的早期诊断。
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关键词
乙型肝炎病毒
阿德福韦耐药
聚合酶链反应
限制性片段长度多态性
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职称材料
题名
应用PCR-RFLP技术检测阿德福韦耐药相关性HBV变异
被引量：
1
1
作者
毛日成
张继明
尹有宽
秦艳丽
章婉琴
邬祥惠
翁心华
机构
复旦大学附属华山医院传染科华山医院肝病中心
出处
《中国感染与化疗杂志》
CAS
2007年第5期362-367,共6页
基金
上海市科委临床医学重点项目(编号:054119529)
文摘
目的建立一种简便、快速、实用的检测阿德福韦(ADV)耐药相关性HBV变异(rtA181V/T/S和rtN236T变异)的方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计套式-PCR引物,使野毒株的PCR产物上游末端引入BglI的酶切位点,使rt236变异株的PCR产物下游末端引入BseDI(SecI)的酶切位点,建立PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法。用此方法分别检测含rt181变异株、rt236变异株及野毒株质粒和3例ADV耐药慢性乙型肝炎患者血清标本。将变异株和野毒株配成不同比例,再用此方法检测,以了解该方法的敏感性。结果本研究建立的PCR—RFLP方法可同时检测rt181变异和rt236变异;用此方法检测血清标本,结果与测序及克隆分析一致;此方法可检测出标本中10%的变异株。结论应用PCR- RFLP方法可同时检测rtA181V/T/S和rtN236T变异,具有较高的敏感性,可用于ADV耐药变异的早期诊断。
关键词
乙型肝炎病毒
阿德福韦耐药
聚合酶链反应
限制性片段长度多态性
Keywords
Hepatitis B virus
Adefovir dipivoxil resistance
Polymerase chain reaction
Restriction fragment length polymorphism
分类号
R450 [医药卫生—治疗学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用PCR-RFLP技术检测阿德福韦耐药相关性HBV变异
毛日成
张继明
尹有宽
秦艳丽
章婉琴
邬祥惠
翁心华
《中国感染与化疗杂志》
CAS
2007
1
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