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人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定
被引量：
15
1
作者
戴文达
方涛林
+3 位作者
李熙雷
林红
董健
陈峥嵘
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期448-452,共5页
目的探索一个高效分离和扩增人骨髓间充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定。方法抽取人胸椎骨髓标本,联合利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD1...
目的探索一个高效分离和扩增人骨髓间充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定。方法抽取人胸椎骨髓标本,联合利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR。在地塞米松、左旋VitC、β-磷酸甘油、FK506作用下向成骨细胞诱导分化;在TGF-beta3、重组人胰岛素、丙酮酸钠、亚硒酸等作用下向软骨细胞诱导分化;在地塞米松、IBMX、吲哚美辛的作用下向脂肪细胞诱导分化;在VEGF、bFGF作用下向血管内皮细胞分化。结果原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好。细胞表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,CD34、CD45和HLA-DR阴性。经定向诱导分化后,细胞分别呈现成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞的表型特征。结论该方法能从人骨髓中高效分离和扩增MSCs,能成功定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞。
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关键词
骨髓间充质干细胞
细胞培养
细胞分化
组织工程
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职称材料
人骨髓间充质干细胞结合多孔β-TCP构建生物相容性人工骨
被引量：
3
2
作者
戴文达
林红
+3 位作者
方涛林
李熙雷
董健
陈峥嵘
《中国生物医学工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期108-116,共9页
研究人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)结合多孔β磷酸三钙(β-TCP)的生物相容性与体内成骨作用。密度梯度离心结合差异贴壁法分离HBMSCs,常规扩增传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-...
研究人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)结合多孔β磷酸三钙(β-TCP)的生物相容性与体内成骨作用。密度梯度离心结合差异贴壁法分离HBMSCs,常规扩增传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR;分别在成骨、成软骨和成脂肪细胞培养基中定向诱导分化,验证其多向分化能力。将HBMSCs在低压下载入多孔β-TCP立方块,形成MSCs/β-TCP复合物,电镜观察材料内部与细胞结合情况。继续成骨诱导培养2周后植入裸鼠背部皮下,于植入4周和8周后取出复合物做组织学检查。设非成骨诱导培养复合物为对照。原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好;流式细胞仪检测间充质细胞来源表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,造血细胞来源表面标记物CD34、CD45和HLA-DR阴性;能成功高效定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞;细胞在β-TCP材料表面贴附、增殖良好;MSCs/β-TCP复合物植入皮下4周后即有少量新骨生成,至8周时更明显;对照组新骨生成量较少。本方法快速、高效分离扩增HBMSCs;HRMSCs与多孔可降解β-TCP材料生物相容性良好;二者结合能显著提高体内新骨生成,提示其可用于临床作为骨移植替代物,可提高骨移植修复骨缺损的疗效。
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关键词
人骨髓间充质干细胞
成骨细胞
Β-TCP
组织工程
骨生成
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职称材料
题名
人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定
被引量：
15
1
作者
戴文达
方涛林
李熙雷
林红
董健
陈峥嵘
机构
复旦大学
附属
中山医院
骨科
-
复旦大学
上海医学院
外
科学
系
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期448-452,共5页
基金
973项目(2005CB522600)
教育部博士点基金(20060246074)
文摘
目的探索一个高效分离和扩增人骨髓间充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定。方法抽取人胸椎骨髓标本,联合利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR。在地塞米松、左旋VitC、β-磷酸甘油、FK506作用下向成骨细胞诱导分化;在TGF-beta3、重组人胰岛素、丙酮酸钠、亚硒酸等作用下向软骨细胞诱导分化;在地塞米松、IBMX、吲哚美辛的作用下向脂肪细胞诱导分化;在VEGF、bFGF作用下向血管内皮细胞分化。结果原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好。细胞表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,CD34、CD45和HLA-DR阴性。经定向诱导分化后,细胞分别呈现成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞的表型特征。结论该方法能从人骨髓中高效分离和扩增MSCs,能成功定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞。
关键词
骨髓间充质干细胞
细胞培养
细胞分化
组织工程
Keywords
mesenchymal stem cells
cell cultures cell differentiation
tissue engineering
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
人骨髓间充质干细胞结合多孔β-TCP构建生物相容性人工骨
被引量：
3
2
作者
戴文达
林红
方涛林
李熙雷
董健
陈峥嵘
机构
复旦大学附属中山医院骨科复旦大学上海医学院外科学系
出处
《中国生物医学工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期108-116,共9页
基金
国家重点基础研究发展(973)计划(2009CB930000)
国家高技术研究发展(863)计划(2007AA03Z313)
教育部博士点基金(20060246074)
文摘
研究人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)结合多孔β磷酸三钙(β-TCP)的生物相容性与体内成骨作用。密度梯度离心结合差异贴壁法分离HBMSCs,常规扩增传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR;分别在成骨、成软骨和成脂肪细胞培养基中定向诱导分化,验证其多向分化能力。将HBMSCs在低压下载入多孔β-TCP立方块,形成MSCs/β-TCP复合物,电镜观察材料内部与细胞结合情况。继续成骨诱导培养2周后植入裸鼠背部皮下,于植入4周和8周后取出复合物做组织学检查。设非成骨诱导培养复合物为对照。原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好;流式细胞仪检测间充质细胞来源表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,造血细胞来源表面标记物CD34、CD45和HLA-DR阴性;能成功高效定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞;细胞在β-TCP材料表面贴附、增殖良好;MSCs/β-TCP复合物植入皮下4周后即有少量新骨生成,至8周时更明显;对照组新骨生成量较少。本方法快速、高效分离扩增HBMSCs;HRMSCs与多孔可降解β-TCP材料生物相容性良好;二者结合能显著提高体内新骨生成,提示其可用于临床作为骨移植替代物,可提高骨移植修复骨缺损的疗效。
关键词
人骨髓间充质干细胞
成骨细胞
Β-TCP
组织工程
骨生成
Keywords
osteogenesis
mesenchymal stem cells
osteoblast
β-TCP
tissue engineering
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R318.17 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定
戴文达
方涛林
李熙雷
林红
董健
陈峥嵘
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
15
在线阅读
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职称材料
2
人骨髓间充质干细胞结合多孔β-TCP构建生物相容性人工骨
戴文达
林红
方涛林
李熙雷
董健
陈峥嵘
《中国生物医学工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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