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METTL3修饰的RNASEH1-AS1通过BUD13/ANXA2/Wnt/β-catenin轴调控结直肠癌SW480细胞的恶性生物学行为 被引量：3
1
作者 庄盛威 吴志荣 +2 位作者 张秀萍 黄哲昆 张勇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2023年第12期1051-1060,共10页
目的:探究甲基转移酶样蛋白3(METTL3)修饰的RNASEH1-AS1通过BUD13/膜联蛋白A2/Wnt/β-连环蛋白(BUD13/ANXA2/Wnt/β-catenin)轴调控结直肠癌细胞SW480恶性生物学行为的分子机制。方法:选取2022年6月至2022年11月间在复旦大学附属中山医... 目的:探究甲基转移酶样蛋白3(METTL3)修饰的RNASEH1-AS1通过BUD13/膜联蛋白A2/Wnt/β-连环蛋白(BUD13/ANXA2/Wnt/β-catenin)轴调控结直肠癌细胞SW480恶性生物学行为的分子机制。方法:选取2022年6月至2022年11月间在复旦大学附属中山医院厦门医院手术治疗的24例CRC患者,收集患者的CRC组织和对应的癌旁组织,用qPCR法检测其中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2、β-catenin、GSK-3β mRNA的表达,用Pearson法分析CRC组织中RNASEH1-AS1表达分别与METTL3和BUD13表达的相关性。常规培养结直肠癌细胞SW480,分为sh-NC组、sh-RNASEH1-AS1组、NC组、sh-METTL组、si-NC组、si-BUD13组、sh-RNASEH1-AS1+pc-NC组、sh-RNASEH1-AS1+pc-ANXA2组、sh-METTL+pc-NC组、sh-METTL+pc-ASEH1-AS1组,用Lipofectamine?2000转染试剂将sh-NC、sh-RNASEH1-AS1、sh-NC、sh-METTL、si-NC、si-BUD13、sh-RNASEH1-AS1+pc-NC、sh-RNASEH1-AS1+pc-ANXA2、sh-METTL+pc-NC、sh-METTL+pc-ASEH1-AS1分别转染SW480细胞,用qPCR法检测后SW480细胞中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2的表达,细胞克隆形成实验检测转染后各组SW480细胞的增殖能力,FCM术检测转染后各组SW480细胞的凋亡情况,细胞划痕实验检测转染后各组SW480细胞的迁移能力,WB法检测转染后各组SW480细胞中ANXA2、β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、c-Myc、cyclinD1蛋白表达,RNA免疫沉淀(RIP)法检测RNASEH1-AS1与BUD1、BUD1与ANXA2的靶向关系。结果:数据库CRC数据分析和中国人CRC组织和癌旁组织的qPCR法检测结果均显示,与癌旁组织相比CRC组织中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2、β-catenin、GSK-3β均呈明显高表达(均P<0.01),且RNASEH1-AS1表达与METTL3(r=0.698,P<0.01)、BUD13(r=0.784,P<0.01)的表达呈正相关。在结直肠癌各细胞中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2 mRNA均呈高表达(均P<0.05);敲减RNASEH1-AS1或METTL3后SW480细胞中RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2表达显著降低(均P<0.05),而过表达RNASEH1-AS1后上述分子表达明显上调(均P<0.05);敲减RNASEH1-AS1或METTL3可抑制SW480的增殖、迁移和p-β-catenin、p-GSK-3β、c-Myc、cyclinD1蛋白的表达,促进其凋亡(均P<0.05),而过表达RNASEH1-AS1则可促进SW480增殖、迁移和p-β-catenin、p-GSK-3β、c-Myc、cyclinD1蛋白的表达和抑制其凋亡(均P<0.05);RNASEH1-AS1通过招募BUD13靶向促进ANXA2的表达(均P<0.05);过表达ANXA2可部分逆转敲减RNASEH1-AS1对SW480细胞的影响(均P<0.05)。结论:METTL3修饰的RNASEH1-AS1通过BUD13/ANXA2/Wnt/β-catenin轴调控SW480细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 结直肠癌 SW480细胞 甲基转移酶样蛋白3 RNASEH1-AS1 BUD13 膜联蛋白A2
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合并EGFR和BRAF突变的晚期肺大细胞神经内分泌癌1例
2
作者 符茂东 张秀萍 +2 位作者 郑景妹 项忆瑾 马骏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2023年第15期803-804,共2页
患者女性,81岁,因胸闷1周于2020年4月7日就诊复旦中山厦门医院。肺穿刺活检病理示:大细胞神经内分泌癌。免疫组织化学示:CK7(-),Ki-67(50%,+),TTF-1(+),p63(-),p40(-),Syn(++),CgA(-),CD56(+)(图1)。基因(组织)示:EGFR第19外显子缺失(19... 患者女性,81岁,因胸闷1周于2020年4月7日就诊复旦中山厦门医院。肺穿刺活检病理示:大细胞神经内分泌癌。免疫组织化学示:CK7(-),Ki-67(50%,+),TTF-1(+),p63(-),p40(-),Syn(++),CgA(-),CD56(+)(图1)。基因(组织)示:EGFR第19外显子缺失(19Del)。胸腹盆CT、颅脑MRI及骨扫描:右胸膜转移(5.2×2.1 cm)、肝多发转移(较大者位于肝尾状叶2.8×2.4 cm)、右小脑转移(3.5×3.0 cm)及多处骨转移(图2)。 展开更多
关键词 肺大细胞神经内分泌癌 EGFR 19Del突变 BRAF V600E突变 靶向治疗
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