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恶性疟原虫杂合45肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌中的初步表达
被引量：
5
1
作者
黄建生
王昌才
任大明
《第一军医大学学报》
CSCD
1994年第3期167-170,共4页
将人工合成的恶性疟原虫杂合４５肽基因克隆到表达载体ｐＷＲ４５０－１中，获得了重组质粒ｐＷＲＡ。将ｐＷＲＡ先转化到ＬＢ５０００修饰后，再转化到ＳＬ３２６１，得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）。ｐＷＲＡ在...
将人工合成的恶性疟原虫杂合４５肽基因克隆到表达载体ｐＷＲ４５０－１中，获得了重组质粒ｐＷＲＡ。将ｐＷＲＡ先转化到ＬＢ５０００修饰后，再转化到ＳＬ３２６１，得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）。ｐＷＲＡ在ＳＬ３２６１中以β－半乳糖膏苷酶－杂合多肽抗原Ａ融合蛋白质（ＧＺ－Ａ）形式表达，表达量约７．２％。从ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）中纯化的ＧＺ－Ａ可与抗ＧＺ－Ａ抗体反应，滴度为１：３２．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示在ＧＺ－Ａ相应位置出现特异条带。上述结果初步说明ＳＬ３２６１表达的ＧＺ－Ａ具有抗原性。连续传代ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）未见质粒丢失及明显的毒性，为恶性疟口服活疫苗的制备打下了基础。
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关键词
恶性疟
45肽基因
重组
疟原虫
伤寒沙门氏菌
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职称材料
结核分支杆菌分泌蛋白Ag85B基因的克隆及表达
2
作者
王宝林
翁心华
+4 位作者
季朝能
潘孝彰
陈一平
李忠明
毛裕民
《上海医科大学学报》
CSCD
2000年第4期253-256,共4页
目的 对分支杆菌的一种分泌蛋白Ag85B的基因进行克隆、表达 ,为结核病进行诊断打下基础。 方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板 ,以PCR法对基因ag85b进行扩增 ,产物与载体质粒 pET2 4b构建表达Ag85B的重组质粒 ,将此重组质粒先转...
目的 对分支杆菌的一种分泌蛋白Ag85B的基因进行克隆、表达 ,为结核病进行诊断打下基础。 方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板 ,以PCR法对基因ag85b进行扩增 ,产物与载体质粒 pET2 4b构建表达Ag85B的重组质粒 ,将此重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内 ,抽提质粒 ,酶切检验 ,再转化入表达宿主大肠杆菌JM 1 0 9(DE3)菌株内 ,对转化菌株以IPTG进行诱导后 ,破菌 ,离心 ,上清进行SDS PAGE电泳。结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有蛋白表达 ,所表达的蛋白质分相对分子质量为 30 0 0 0。结论 目的基因克隆入宿主菌内 ,重组结核杆菌分泌蛋白Ag85B的成功表达为进行临床诊断试验奠定了基础。
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关键词
结核分支杆菌
分泌蛋白
Ag85B基因
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职称材料
题名
恶性疟原虫杂合45肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌中的初步表达
被引量：
5
1
作者
黄建生
王昌才
任大明
机构
第一军医
大学
分子生物学教研室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
1994年第3期167-170,共4页
文摘
将人工合成的恶性疟原虫杂合４５肽基因克隆到表达载体ｐＷＲ４５０－１中，获得了重组质粒ｐＷＲＡ。将ｐＷＲＡ先转化到ＬＢ５０００修饰后，再转化到ＳＬ３２６１，得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）。ｐＷＲＡ在ＳＬ３２６１中以β－半乳糖膏苷酶－杂合多肽抗原Ａ融合蛋白质（ＧＺ－Ａ）形式表达，表达量约７．２％。从ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）中纯化的ＧＺ－Ａ可与抗ＧＺ－Ａ抗体反应，滴度为１：３２．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示在ＧＺ－Ａ相应位置出现特异条带。上述结果初步说明ＳＬ３２６１表达的ＧＺ－Ａ具有抗原性。连续传代ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）未见质粒丢失及明显的毒性，为恶性疟口服活疫苗的制备打下了基础。
关键词
恶性疟
45肽基因
重组
疟原虫
伤寒沙门氏菌
Keywords
Salmonella typhimurium
attenuated
Plasmodium falciparum
hybrid 46-peptide gene
recomhnation
expression
分类号
R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学]
R378.23 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
结核分支杆菌分泌蛋白Ag85B基因的克隆及表达
2
作者
王宝林
翁心华
季朝能
潘孝彰
陈一平
李忠明
毛裕民
机构
上海医科
大学
华山医院传染病科
复旦大学
遗传
学
研究所
国家
重点
实验室
出处
《上海医科大学学报》
CSCD
2000年第4期253-256,共4页
文摘
目的 对分支杆菌的一种分泌蛋白Ag85B的基因进行克隆、表达 ,为结核病进行诊断打下基础。 方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板 ,以PCR法对基因ag85b进行扩增 ,产物与载体质粒 pET2 4b构建表达Ag85B的重组质粒 ,将此重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内 ,抽提质粒 ,酶切检验 ,再转化入表达宿主大肠杆菌JM 1 0 9(DE3)菌株内 ,对转化菌株以IPTG进行诱导后 ,破菌 ,离心 ,上清进行SDS PAGE电泳。结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有蛋白表达 ,所表达的蛋白质分相对分子质量为 30 0 0 0。结论 目的基因克隆入宿主菌内 ,重组结核杆菌分泌蛋白Ag85B的成功表达为进行临床诊断试验奠定了基础。
关键词
结核分支杆菌
分泌蛋白
Ag85B基因
Keywords
mycobacterium tuberculosis
secreted protein
vector
clone
expression
分类号
R52 [医药卫生—内科学]
Q754 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
恶性疟原虫杂合45肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌中的初步表达
黄建生
王昌才
任大明
《第一军医大学学报》
CSCD
1994
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
结核分支杆菌分泌蛋白Ag85B基因的克隆及表达
王宝林
翁心华
季朝能
潘孝彰
陈一平
李忠明
毛裕民
《上海医科大学学报》
CSCD
2000
0
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