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冻结肩患者关节囊组织中TGF-β和MMPs表达研究 被引量:16
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作者 李宏云 陈世益 +1 位作者 翟伟韬 陈疾忤 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1363-1366,共4页
目的研究转化生长因子-β(TGF-β)和基质金属蛋白酶(MMPs)在冻结肩发生中的可能作用。方法以12例接受肩关节镜手术的冻结肩患者为研究对象,术中取肩袖间隙部位关节囊组织,Real-time PCR和Western blotting分别检测TFG-β、MMP1、MMP2、M... 目的研究转化生长因子-β(TGF-β)和基质金属蛋白酶(MMPs)在冻结肩发生中的可能作用。方法以12例接受肩关节镜手术的冻结肩患者为研究对象,术中取肩袖间隙部位关节囊组织,Real-time PCR和Western blotting分别检测TFG-β、MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP12 mRNA和蛋白表达。以同期接受肩关节镜手术的12例非冻结肩患者作为对照,其中肩关节不稳2例、肩袖损伤5例、肩峰下撞击症5例。结果冻结肩组和对照组关节囊组织TGF-β mRNA表达分别为3.36×104±2.18×103和1.85×104±3.31×103,蛋白表达分别为1.55±0.33和1.13±0.21,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。冻结肩组关节囊组织MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP12 mRNA和蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05)。结论冻结肩的发生可能与患者关节囊组织中TFG-β和MMPs的高表达有关。 展开更多
关键词 冻结肩 转化生长因子-Β 基质金属蛋白酶 纤维化
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PET人工韧带材料纳米化对骨髓基质干细胞粘附、增殖及分化影响的实验研究 被引量:5
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作者 高凯 陈世益 +7 位作者 蒋佳 吴凌翔 李宏 张鹏云 李云霞 陈疾忤 华英汇 钟伟 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期533-537,589,共6页
目的:观察人骨髓基质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)在经过表面纳米化处理的PET人工韧带材料表面的粘附、增殖及成骨分化。方法:根据PET膜片表面处理情况分为PET组(PET膜片未经表面处理)、LBL组(PET膜片表面... 目的:观察人骨髓基质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)在经过表面纳米化处理的PET人工韧带材料表面的粘附、增殖及成骨分化。方法:根据PET膜片表面处理情况分为PET组(PET膜片未经表面处理)、LBL组(PET膜片表面经透明质酸、壳聚糖纳米自组装涂层处理)和HA组(PET膜片经透明质酸、壳聚糖纳米自组装处理后,表面再加纳米羟基磷灰石涂层)3组。在上述3种PET材料上分别培养hBMSCs后进行各项检测。扫描电镜(SEM)观察hBMSCs在材料上培养1天和7天时的细胞形态。培养7天后,Alamar blue法检测hBMSCs的增殖,pNPP法检测碱性磷酸酶(ALP)活性。RealTimePCR检测培养3天hBMSCs的整合素β1mRNA表达。结果:SEM显示HA组和LBL组hBMSCs能更好地伸展和粘附,形态明显优于PET组。培养7天,HA组和LBL组的细胞增殖、ALP活性定量均显著高于PET组(P<0.001);HA组细胞增殖显著高于LBL组(P=0.01),HA组ALP活性显著高于LBL组(P<0.001)。培养3天后,HA组和LBL组hBMSCs的整合素β1mRNA表达显著高于PET组(P<0.001),HA组显著高于LBL组(P=0.003)。结论:PET人工韧带材料表面经壳聚糖、透明质酸纳米自组装涂层和纳米羟基磷灰石涂层处理后,能明显促进人hBMSCs的粘附、增殖和分化。纳米羟基磷灰石涂层的作用最明显。 展开更多
关键词 聚对苯二甲酸乙二醇酯 纳米羟基磷灰石 骨髓间充质干细胞 粘附
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人γ干扰素基因转染成肌细胞在治疗骨骼肌损伤中的应用
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作者 陈疾忤 陈世益 +1 位作者 李宏云 尚西亮 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期298-303,共6页
目的:构建转人γ干扰素(human interferonγ,hIFNγ)基因的成肌细胞,探讨hIFNγ对小鼠急性钝挫伤骨骼肌修复过程的影响。方法:①应用基因重组技术,将hIFNγ基因克隆到pEGFP-C2真核表达载体中,以酶切和测序方法鉴定重组质粒pEGFP-C2-... 目的:构建转人γ干扰素(human interferonγ,hIFNγ)基因的成肌细胞,探讨hIFNγ对小鼠急性钝挫伤骨骼肌修复过程的影响。方法:①应用基因重组技术,将hIFNγ基因克隆到pEGFP-C2真核表达载体中,以酶切和测序方法鉴定重组质粒pEGFP-C2-hIFNγ的正确性;②经脂质体介导转染C2C12成肌细胞,用RT-PCR和Western Blot法检测转基因细胞的hIFNγ表达。③64只7-12周雄性C3H小鼠,制作右侧腓肠肌钝挫伤动物模型,随机分成4组,即A组(注射hIFNγ),B组(注射转hIFNγ的C2C12细胞),C组(注射空白成肌细胞),D组(未干预)。挫伤后第10天,A、B、C组的小鼠,于腓肠肌损伤局部注射不同药物,D组不进行干预以作为自然愈合对照。分别于伤后7、14、28、42天,从各组中随机抽取4只小鼠进行右侧腓肠肌损伤部位取材,以荧光定量PCR和免疫荧光化学染色检测不同时间点波形蛋白(Vimentin)及Ⅱb型肌球蛋白重链(MHC-Ⅱb)的表达。结果:①酶切和测序结果均证实成功构建了hIFNγ真核表达质粒pEGFP-C2-hIFNγ,RT-PCR和Western Blot检测到转染细胞中hIFNγ基因的表达;②干预后各时间点,A、B组小鼠损伤骨骼肌Vimentin表达较C组和D组降低;伤后42天,B组损伤骨骼肌Vimentin表达低于A组,其余时间点A、B两组间无显著差异;③各组MHC-Ⅱb表达无明显差异。结论:①成功制备了含hIFNγ基因的真核表达质粒,转染后获得了高效表达hIFNγ的鼠C2C12成肌细胞;②采用转染hIFNγ的C2C12成肌细胞局部注射,可以抑制骨骼肌纤维化标志产物波形蛋白的表达,与注射外源性IFNγ的作用近似。③局部注射转hIFNγ基因的成肌细胞或外源性IFNγ,未发现对骨骼肌再生标志产物MHC-Ⅱb表达有明显影响。 展开更多
关键词 人γ干扰素 成肌细胞 转染 Ⅱb型肌球蛋白重链 波形蛋白
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对苯二甲酸乙二醇酯人工韧带重建前交叉韧带研究进展
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作者 高凯 陈世益 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期664-668,共5页
20世纪80~90年代,各种材料制造的人工韧带如雨后春笋般涌现出来,被用于前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建。由于材料生物相容性较差和韧带整体结构设计的缺陷,人工韧带重建ACL术后2年的失败率达60%,大多数人工韧带已... 20世纪80~90年代,各种材料制造的人工韧带如雨后春笋般涌现出来,被用于前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建。由于材料生物相容性较差和韧带整体结构设计的缺陷,人工韧带重建ACL术后2年的失败率达60%,大多数人工韧带已被临床淘汰。自体和异体移植物都存在固有的缺陷,近年来人工韧带重新受到关注。经过改良的人工韧带重建ACL的临床研究逐渐增多, 展开更多
关键词 人工韧带重建 前交叉韧带 对苯二甲酸 乙二醇 临床研究 生物相容性 异体移植物 结构设计
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超高分子量聚乙烯在骨科领域的应用及基础研究进展 被引量:13
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作者 艾承冲 蒋佳 陈世益 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期717-723,共7页
超高分子量聚乙烯(ultra-high molecular weight polyethylene,UHMWPE)凭借其良好的拉伸强度、耐磨性、耐冲击性、化学稳定性、低密度等特性在骨科人工关节假体、骨科缝线和人工韧带等领域广泛应用。临床研究发现UHMWPE关节产品产生磨... 超高分子量聚乙烯(ultra-high molecular weight polyethylene,UHMWPE)凭借其良好的拉伸强度、耐磨性、耐冲击性、化学稳定性、低密度等特性在骨科人工关节假体、骨科缝线和人工韧带等领域广泛应用。临床研究发现UHMWPE关节产品产生磨损颗粒所导致的骨质溶解是髋关节置换术后失败的主要原因,为此许多研究致力于提高它的耐磨性以及改善它的生物相容性。本文对UHMWPE在骨科的临床应用和基础研究相关进展作一综述。 展开更多
关键词 超高分子量聚乙烯 改性 生物相容性
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慢病毒介导BMP2和VEGF165基因共转染对骨髓基质干细胞成骨分化的影响 被引量:1
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作者 蒋佳 范存义 曾炳芳 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期753-758,共6页
目的观察慢病毒介导骨形成蛋白2(BMP2)和血管内皮生长因子165(VEGF165)基因共转染对骨髓基质干细胞(MSCs)成骨分化的影响。方法构建携带BMP2、VEGF165和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒表达载体,包装、生产携带BMP2、VEGF165和GFP基... 目的观察慢病毒介导骨形成蛋白2(BMP2)和血管内皮生长因子165(VEGF165)基因共转染对骨髓基质干细胞(MSCs)成骨分化的影响。方法构建携带BMP2、VEGF165和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒表达载体,包装、生产携带BMP2、VEGF165和GFP基因的重组慢病毒(Lv-BMP、Lv-VEGF、Lv-GFP)。分离、培养W istar大鼠骨髓MSCs,分别以Lv-GFP(GFP组)、Lv-BMP(BMP组)、Lv-VEGF(VEGF组)转染MSCs,Lv-BMP和Lv-VEGF共转染MSCs(BMP+VEGF组),另设未转染MSCs对照组。RT-PCR法检测转染后7 d各组细胞BMP2、VEGF165 mRNA表达以及转染后1、2、4周各组细胞骨钙素(OCN)mRNA表达;ELISA法检测转染后1、4、8周各组细胞培养上清液BMP2、VEGF165蛋白表达以及转染后1、2、4周各组细胞培养上清液OCN蛋白表达;转染后第14天,各组细胞行碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性检测。结果 BMP+VEGF组BMP2、VEGF165 mRNA和蛋白高效共表达,BMP2 mRNA和蛋白表达与BMP组比较差异无统计学意义(P>0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达与VEGF组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组、GFP组和VEGF组无BMP2 mRNA和蛋白表达;对照组、GFP组和BMP组无VEGF165 mRNA和蛋白表达;BMP+VEGF组OCN mRNA和蛋白表达显著高于其他各组(P<0.01)。BMP+VEGF组ALP染色阳性区域大于对照组、VEGF组和BMP组;BMP+VEGF组ALP活性显著高于其他各组(P<0.01)。结论慢病毒介导BMP2和VEGF165基因共转染可促进骨髓MSCs成骨分化。 展开更多
关键词 骨形成蛋白2 血管内皮生长因子165 共转染 慢病毒载体 成骨分化
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