检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

人参皂苷Rd高产突变株Paecilomyces bainier sp229-7的生长特性和生物转化被引量：7: 1; 作者周超群史训龙 +1 位作者李继扬周珮《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期59-62,67,共5页; 目的通过研究突变株拟青霉菌sp229-7(Paecilomyces bainiersp229-7)的生长及转化底物情况,探讨突变株转化三七茎叶总皂苷的高效性。方法在不同条件下,运用摇瓶转化法考查菌株生长和转化底物特性;分别采用静息态细胞、胞外酶以及粗酶液,... 展开更多; 关键词人参皂苷RD 生物转化菌株特性底物耐受拟青霉菌sp229-7; 在线阅读下载PDF 职称材料

基因工程酵母菌来源的D-氨基酸氧化酶分离纯化被引量：2: 2; 作者史训龙冯美卿 +2 位作者贺佳音袁中一周珮《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期71-74,85,共5页; 目的以基因工程酵母表达的胞内D-氨基酸氧化酶(DAAO)为原料,通过破细胞,分离纯化DAAO。方法采用机械研磨,反复冻溶,超声波等多种方法破细胞,获得粗酶液,硫酸铵分段沉淀。沉淀透析后,经 DEAE Sephadex A-50,DEAE-DE52,Q-sepharose等... 展开更多; 关键词 S-100 细胞法能透析分离纯化电泳表达硫酸铵沉淀基因工程酵母 D-氨基酸氧化酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

D-氨基酸氧化酶在毕赤酵母中的表达及快速纯化被引量：2: 3; 作者冯美卿史训龙 +2 位作者孙传文周伟周珮《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期622-625,共4页; 目的建立简便、快速纯化D-氨基酸氧化酶(DAAO)的新方法,以利用高纯度的DAAO转化头孢菌素C制备戊二酰-7-氨基头孢霉烷酸(GL-7ACA)。方法通过基因工程手段,构建N端和C端各镶嵌6个组氨酸的DAAO重组质粒,电转化Pichia pastoris GS115电感受... 展开更多; 关键词 D-氨基酸氧化酶毕赤酵母表达快速纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

那西肽产生菌S.actuosus选育及发酵条件的优化被引量：6: 4; 作者万睿刘晓会 +1 位作者李继杨周珮《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期579-581,共3页; 目的　提高那西肽产量。方法　介绍那西肽产生菌活跃链霉菌S .actuosus(Z10 ) 的诱变育种 ,诱变的方法有紫外线、亚硝基胍及两者的联合诱变 ,并对高发酵单位菌种优化发酵条件和测定其生化曲线。结果　通过紫外线及亚硝基胍联合诱变获得... 展开更多; 关键词发酵条件产生菌亚硝基胍诱变黄豆粉高产菌株紫外线联合菌种生化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人参皂苷Rd高产突变株Paecilomyces bainier sp229-7的生长特性和生物转化被引量：7: 1; 作者周超群史训龙李继扬周珮; 机构复旦大学药学院生物合成药物化学教研室; 出处《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期59-62,67,共5页; 文摘目的通过研究突变株拟青霉菌sp229-7(Paecilomyces bainiersp229-7)的生长及转化底物情况,探讨突变株转化三七茎叶总皂苷的高效性。方法在不同条件下,运用摇瓶转化法考查菌株生长和转化底物特性;分别采用静息态细胞、胞外酶以及粗酶液,测定其对底物转化情况。结果菌体12～48 h之间生长最旺盛,36 h加入底物转化率最高,加入底物后72 h转化基本结束,转化产物只有人参皂苷Rd,底物投料量至少可以达到20 mg/mL,克分子转化率达80%以上,转化温度27℃～32℃之间最佳。静息态细胞、胞外酶以及粗酶液都可以将人参皂苷Rb1转化为人参皂苷Rd。结论与文献报道相比,Paecilomyces bainiersp229-7突变株具有良好的底物耐受性和专一性,快速生长的后期是底物投料的最佳时机,Rb1转化为Rd的时间缩短为3 d,投料量至少增加20倍,显著提高了转化效率,可望应用于工业生产。突变株的高转化效率可能与转化酶由细胞内产生并部分分泌到胞外有关,增加了酶与底物接触机会,避免了产物在胞内过量积累。; 关键词人参皂苷RD 生物转化菌株特性底物耐受拟青霉菌sp229-7; Keywords ginsenoside Rd biotransformation strain characteristics substrate tolerance Paecilomyces bainier sp229-7; 分类号 R915 [医药卫生—微生物与生化药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因工程酵母菌来源的D-氨基酸氧化酶分离纯化被引量：2: 2; 作者史训龙冯美卿贺佳音袁中一周珮; 机构复旦大学药学院生物合成药物化学教研室浙江大学生命科学院生物技术系中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所; 出处《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期71-74,85,共5页; 文摘目的以基因工程酵母表达的胞内D-氨基酸氧化酶(DAAO)为原料,通过破细胞,分离纯化DAAO。方法采用机械研磨,反复冻溶,超声波等多种方法破细胞,获得粗酶液,硫酸铵分段沉淀。沉淀透析后,经 DEAE Sephadex A-50,DEAE-DE52,Q-sepharose等离子交换柱进行第一步分离,获得的含酶粗品,再经Sephaciyl S-100分子筛进一步纯化获得电泳纯的DAAO。结果超声波破壁为最佳的破壁方法,得到的每毫升酶液所含的酶活力是其他破壁方法的两倍以上,最高达到12 000 U／mi,。两步硫酸铵沉淀能粗分DAAO,50％硫酸铵沉淀酶回收率可达85％以上。用Q-sepharose、Sephacryl S-100分子筛柱层析两步纯化,酶活力回收率最高可达 90％,SDS-PAGE显示单一蛋白条带。结论本实验方法能得到电泳纯的DAAO,总回收率约为40％。; 关键词 S-100 细胞法能透析分离纯化电泳表达硫酸铵沉淀基因工程酵母 D-氨基酸氧化酶; Keywords D-amino acid oxidase extraction purification; 分类号 R459.5 [医药卫生—治疗学] Q93 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名D-氨基酸氧化酶在毕赤酵母中的表达及快速纯化被引量：2: 3; 作者冯美卿史训龙孙传文周伟周珮; 机构复旦大学药学院生物合成药物化学教研室; 出处《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期622-625,共4页; 文摘目的建立简便、快速纯化D-氨基酸氧化酶(DAAO)的新方法,以利用高纯度的DAAO转化头孢菌素C制备戊二酰-7-氨基头孢霉烷酸(GL-7ACA)。方法通过基因工程手段,构建N端和C端各镶嵌6个组氨酸的DAAO重组质粒,电转化Pichia pastoris GS115电感受态细胞,利用PCR方法筛选阳性转化子,再经甲醇诱导筛选出高表达菌。结果高表达重组菌(PHD12)摇瓶发酵单位达到2 000 IU/L,发酵罐内达到22 500 IU/L。并利用Ni螯合型树脂对表达的DAAO经一步分离纯化,以60%的总收率获得纯化产物。纯化产物保持良好的转化CPC-Na活性。结论利用基因工程表达组氨酸标记蛋白,可简化基因工程的下游工序。; 关键词 D-氨基酸氧化酶毕赤酵母表达快速纯化; Keywords D-amino acid oxidase Pichia pastoris expression purification; 分类号 Q814 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名那西肽产生菌S.actuosus选育及发酵条件的优化被引量：6: 4; 作者万睿刘晓会李继杨周珮; 机构复旦大学药学院生物合成药物化学教研室; 出处《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期579-581,共3页; 基金上海SK研究与发展基金资助项目 ( 2 0 0 3 0 0 1-S); 文摘目的　提高那西肽产量。方法　介绍那西肽产生菌活跃链霉菌S .actuosus(Z10 ) 的诱变育种 ,诱变的方法有紫外线、亚硝基胍及两者的联合诱变 ,并对高发酵单位菌种优化发酵条件和测定其生化曲线。结果　通过紫外线及亚硝基胍联合诱变获得高产菌株Z12 ,该菌种进行 4次传代试验显示稳定 ,经发酵条件优化后在培养基中添加 2 %黄豆粉 ,0 .0 1%硫酸锰可以提高那西肽产量。菌种Z12 相对于出发菌种Z10 提高那西肽产量达 5 8.9%。; 关键词发酵条件产生菌亚硝基胍诱变黄豆粉高产菌株紫外线联合菌种生化; Keywords Bioassay Biomedical engineering Manganese compounds Mutagenesis Optimization Strain; 分类号 R512 [医药卫生—内科学] TQ453.5 [化学工程—农药化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人参皂苷Rd高产突变株Paecilomyces bainier sp229-7的生长特性和生物转化	周超群史训龙李继扬周珮	《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2010	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基因工程酵母菌来源的D-氨基酸氧化酶分离纯化	史训龙冯美卿贺佳音袁中一周珮	《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	D-氨基酸氧化酶在毕赤酵母中的表达及快速纯化	冯美卿史训龙孙传文周伟周珮	《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	那西肽产生菌S.actuosus选育及发酵条件的优化	万睿刘晓会李继杨周珮	《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2004	6	在线阅读下载PDF 职称材料