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人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的建立及鉴定
被引量：
7
1
作者
陈威中
吴满平
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期768-775,共8页
目的建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,以体外模拟人动脉壁,为动脉粥样硬化及炎症等疾病的发病机制和治疗研究打下基础。方法采用胶原酶灌注消化法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothel...
目的建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,以体外模拟人动脉壁,为动脉粥样硬化及炎症等疾病的发病机制和治疗研究打下基础。方法采用胶原酶灌注消化法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothelial cell,HUAEC),采用组织块贴块法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)。用含有抗坏血酸(≥50μg/mL)的培养基孵育平滑肌细胞,使之合成并分泌胶原蛋白,形成内皮细胞的生长基质;然后将内皮细胞以饱和密度接种到平滑肌细胞上,使内皮细胞和平滑肌细胞直接接触并整合形成内皮细胞-平滑肌细胞共培养(EC-SMC co-culture)模型。分别用免疫荧光染色和Dil-Ac-LDL吞噬实验对共培养模型进行形态学和功能学的鉴定。结果形态学鉴定结果显示,两种细胞已成功整合,模拟出体内动脉壁的形态。Dil-Ac-LDL吞噬实验的结果显示共培养模型的内皮细胞中有荧光信号,并且共培养模型中内皮细胞Dil-Ac-LDL的内吞量显著高于单纯内皮细胞(EC monoculture or ECmonolayer),证明共培养模型中内皮细胞与平滑肌细胞已建立联系。结论本实验成功建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,可在体外更好地模拟人动脉壁形态和基本功能。
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关键词
人脐动脉内皮细胞
人脐动脉平滑肌细胞
动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型
免疫荧光染色
Dil-Ac-LDL吞噬
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职称材料
体外RNA干扰下调ERM表达对胃癌SGC细胞转移能力的影响
被引量：
1
2
作者
欧阳明
何晓婕
杨青
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期505-509,共5页
目的探讨radixin和moesin是否也和ezrin一样在肿瘤转移中起调控作用。方法选取ERM均表达的人胃癌SGC细胞作为模型,运用RNA干扰(RNAi)方法分别构建ezrin,radixin和moeisn表达特异性下调的稳定细胞株,并比较它们的体外转移能力。结果体外...
目的探讨radixin和moesin是否也和ezrin一样在肿瘤转移中起调控作用。方法选取ERM均表达的人胃癌SGC细胞作为模型,运用RNA干扰(RNAi)方法分别构建ezrin,radixin和moeisn表达特异性下调的稳定细胞株,并比较它们的体外转移能力。结果体外细胞侵袭实验表明ERM中任一蛋白的特异性下调均能减弱细胞的转移能力,Western blot分析显示ERM中的任一蛋白的特异性下调均引起E-cadherin表达的明显增加。结论 3种ERM蛋白在SGC细胞的转移过程中都起重要的作用,下调ERM蛋白中的任一成员都能明显降低SGC细胞的转移能力,ERM与E-cadherin间的相互作用可能在肿瘤的发展过程中至关重要。我们的发现同时也为ERM功能冗余论提供了佐证。
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关键词
ERM
RNA干扰
肿瘤转移
功能冗余
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职称材料
题名
人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的建立及鉴定
被引量：
7
1
作者
陈威中
吴满平
机构
复旦大学药学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期768-775,共8页
文摘
目的建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,以体外模拟人动脉壁,为动脉粥样硬化及炎症等疾病的发病机制和治疗研究打下基础。方法采用胶原酶灌注消化法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothelial cell,HUAEC),采用组织块贴块法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)。用含有抗坏血酸(≥50μg/mL)的培养基孵育平滑肌细胞,使之合成并分泌胶原蛋白,形成内皮细胞的生长基质;然后将内皮细胞以饱和密度接种到平滑肌细胞上,使内皮细胞和平滑肌细胞直接接触并整合形成内皮细胞-平滑肌细胞共培养(EC-SMC co-culture)模型。分别用免疫荧光染色和Dil-Ac-LDL吞噬实验对共培养模型进行形态学和功能学的鉴定。结果形态学鉴定结果显示,两种细胞已成功整合,模拟出体内动脉壁的形态。Dil-Ac-LDL吞噬实验的结果显示共培养模型的内皮细胞中有荧光信号,并且共培养模型中内皮细胞Dil-Ac-LDL的内吞量显著高于单纯内皮细胞(EC monoculture or ECmonolayer),证明共培养模型中内皮细胞与平滑肌细胞已建立联系。结论本实验成功建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,可在体外更好地模拟人动脉壁形态和基本功能。
关键词
人脐动脉内皮细胞
人脐动脉平滑肌细胞
动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型
免疫荧光染色
Dil-Ac-LDL吞噬
Keywords
human umbilical artery endothelial cells
human umbilical artery smooth muscle cells
EC- SMC co-culture
immunofluorescence staining
Dil-Ac-LDL uptake
分类号
Q26 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
体外RNA干扰下调ERM表达对胃癌SGC细胞转移能力的影响
被引量：
1
2
作者
欧阳明
何晓婕
杨青
机构
复旦大学
生命科学
学院
生物
化学
系
复旦大学药学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期505-509,共5页
基金
教育部留学回国人员科研启动基金项目
上海市浦江人才计划资金项目
文摘
目的探讨radixin和moesin是否也和ezrin一样在肿瘤转移中起调控作用。方法选取ERM均表达的人胃癌SGC细胞作为模型,运用RNA干扰(RNAi)方法分别构建ezrin,radixin和moeisn表达特异性下调的稳定细胞株,并比较它们的体外转移能力。结果体外细胞侵袭实验表明ERM中任一蛋白的特异性下调均能减弱细胞的转移能力,Western blot分析显示ERM中的任一蛋白的特异性下调均引起E-cadherin表达的明显增加。结论 3种ERM蛋白在SGC细胞的转移过程中都起重要的作用,下调ERM蛋白中的任一成员都能明显降低SGC细胞的转移能力,ERM与E-cadherin间的相互作用可能在肿瘤的发展过程中至关重要。我们的发现同时也为ERM功能冗余论提供了佐证。
关键词
ERM
RNA干扰
肿瘤转移
功能冗余
Keywords
ERM
RNA interference
tumor metastasis
functional redundancy
分类号
R730 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的建立及鉴定
陈威中
吴满平
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
体外RNA干扰下调ERM表达对胃癌SGC细胞转移能力的影响
欧阳明
何晓婕
杨青
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
在线阅读
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职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
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